Type I signal peptidase cleaves the signal sequence from the amino terminus of membrane and secreted proteins afters these protein insert across the membrane. This enzyme serves as a potential target for the development of novel antibacterial agents due to its unique physiological and biochemical properties. Despite considerable research, the signal peptidase assay still remains improvement to provide further understanding of the mechanism and high-throughput inhibitor screening of this enzyme. In this paper, three known signal peptidase assays are tested with an E. coli D276A mutant signal peptidase to distinguish the sensitivity of each assays. In vitro assay using the procoat synthesized by in vitro transcription translation shows that the D276A signal peptidase I was inactive while in vivo processing of pro-OmpA expressed in the temperature-sensitive E. coli strain IT41 as well as in vitro assay using pro-OmpA nuclease A substrate show that D276A signal peptidase I has activity like wild-type signal peptidase. These results suggest that in vitro assay using the pro-OmpA nuclease A and in vivo pro-OmpA processing assay are more sensitive monitors than in vitro assay using the pro-coat. In conculsion, caution should be used when interpreting the in vitro results using the procoat.
Selaginellae Herba has been used as folk medicine for antineoplastics, coagulants, antidotes and invigorants. To find an in vitro screening method for liver protective effect of Selaginellae Herba in benzo(a)pyrene intoxicated injury were examined in primary cultured rat hepatocytes. Using MTT assay, herba concentration showed dose dependently viability. The lowest concentration of benzo(a)pyrene giving cytotoxicity revealed around 50gM. The hepatoprotective effect of Selaginellae Herba in both water and chloroform extracts was also increased dose dependently.
In vitro method는 in vivo results를 예측하기 위해 사용되어지는 것이 가장 큰 목적이므로 지급까지 in vitro SPF test는 여러 formulations를 screen 하거나 self-tanners의 activity에 미치는 cosmetic ingredients의 영향을 연구하는 데에 이용되어져 왔다. In vitro SPF test는 신속하고 객관적이며 적은 비용으로 사람에게 in vivo test를 하기에 앞서 protective formulas를 pre-screen 하며, 따라서 in vitro test가 유용하게 원하는 역할을 하기 위해서는 in vitro SPF 평가법의 정확성이 무엇보다 중요하다. 본 연구에서는 건조시간을 15분으로 고정하면서 기존에 사용해온 substrate인 Transpore$^{(R)}$ tape을 이용, 도포 방법을 개선하기 위한 시도를 하였다. 우선 기존 시험법의 분석을 통한 현 수준을 파악하고, 사용되고 있는 Transpore$^{(R)}$ tape의 외측으로부터 일정 부위만 사용하도록 개선하였다. 또한 다양한 시도를 통해 광원의 scan 부위에만 국소적으로 도포하는 방법이 도포시 발생하는 오차를 줄일 수 있음을 확인하였으며, 개선된 시험법을 이용하여 반복성과 선형성이 뛰어난 시험 결과를 얻어낼 수 있었다. 통계 패키지 분석을 통한 시험법의 신뢰성 검토에서도 우수한 결과를 보여 이와 같은 시험법을 통해 in vivo와 in vitro SPF의 보다 정확한 예측 시스템 관계를 구축할 수 있을 것으로 기대한다.
The trichothecenes are sesquiterpenoid mycotoxins characterized by the 12,13-epoxytrichothec-9-ene ring system. We have tested cytotoxicity of several naturally-occurring or synthesized trichothecenes against human solid tumor cell lines. Among them, trichothecin(I) and $4-\beta$-Acetoxy-12,13-epoxytrichothec-9-ene (trichodermin, II) exhibited highly cytotoxic activities. 4-.betha.-Hydroxy-12,13-epoxytrichothec-9-ene (trichodermol, III) and $4-\beta$-Methoxy-12,13-epoxytrichothec-9-ene (IV) had mild cytotoxicities. But 12,13-Epoxytrichothec-9-ene-4-one (V) and $4-\beta$-Hydroxy-12,13-epoxytrichothec-9-ene(VI) had no cytotoxicities up to 10 $\mug/ml$. And in the tested cell lines, HCT15 colon cancer cell line was the most sensitive to all tested trichothecenes.
Fifty-eight strains of Aspergillus spp. isolated from various grains were examined for the screening of aflatoxins by the method of the Thin-Layer Chromatography (TLC), using the aflatoxin producing strain of Aspergillus flavus ATCC 15517 as a control. The results as follows: 1. Samples of Aspergillus spp. isolated from various grains were extracted with chloroform and chromatographied by the thin-layer chromatography method. 2. Three strains of Aspergillus spp. among the 58 strains can be found that the spots having the same Rf value as control with culture extract of Aspergillus flavus ATCC 15517. 3. The further prove studies of aflatoxins were proceed by the methods of in vivo and in vitro tests. And this methods considered to capable for the use of mass screening among the samples.
In this study, the origin of the monovinyl chlorophyll a carboxylic biosynthetic route was investigated in barley (Hordeum vulgare L.) and com (Zea mays L.). Protoporphyrin IX accumulated in vivo or in vitro was found to be all of the divinyl form. Furthermore, the conversion of divinyl protoporphyrin IX to monovinyl protoporphyrin IX in vitro was not observed. In contrast, the biosynthesis and accumulation of monovinyl Mg-protoporphyrin IX and its methyl ester occurred in etiolated leaves and divinyl Mg-protoporphyrin IX was convertible to monovinyl Mg-protoporphyrin IX in vitro. These results suggest that the monovinyl chlorophyll ${\alpha}$ carboxylic biosynthetic route in plants may originate from the divinyl Mg-protoporphyrin IX pool.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제4권1호
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pp.5-11
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2002
Seven fungicides viz., salcylic acid, bacistin (Carbandazim 50% WP), bayleton (Triadimefon 25% WP), Dithane M-45 (Mancozeb 75% WP), captan (Captaf 50% WP) formaldehyde and benzoic acid at three concentrations (0.50,0.75 and 1.0%) and ten plant products viz., Hena leaf, garlic bulb, tomato leaf, mango bark, cotton leaf, turmeric powder, onion, tulsi leaf, neem leaf and ginger at 1.0,2.0 and 3.0% concentrations were screened against Aspergillus flavus and A. tamarii in vitro. Among fungicides, salcylic acid and bavistin and among plants Hena and Mango bark powder were found to be very effective at all concentrations tested. Based on in vitro screening, only selected six fungicides at 1.0, 1.5 and 2.(0% and six plants at 2.0,4.0 and 6.0% concentrations were tested in vivo for controlling Aspergillosis in silkworm. Salcylic acid and bavistin fungicides and Hena leaf powder and Mango bark powder have shown considerable effect in controlling Aspergillus infection in silkworm at all concentrations tested.
The phototoxicity inhibitory activity of 15 natural products having antiinflammatory effect was screened by three in vitro methods: yeast growth inhibition test with Candida albicans, RBC photohemolysis and MTT assay. We induced phototoxic reaction by irradiating UVA (365 nm) on chlorpromazine (CPZ) that has been widely documented as phototoxic agent in clinical and experimental studies and then observed the effects of the natural products after treating them with CPZ. In yeast growth inhibition test, X. stramonium showed the inhibitory effect on the UVA phototoxicity and E. officinalis, Yeast, P. suffruticosa showed phototoxicity inhibitory effect in that their % hemolysis compared with control were 36.14${\pm}$ 2.69, 42.82${\pm}$1.35, 36.41${\pm}$0.48 on UVA. In MTT assay, all tested natural products increased cell viability compared with the control.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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