우렁쉥이 Halocynthia roretzi의 사후에 근육의 ATP 분해경로를 검토하기 위하여 1989년 4월 우리나라 남해안의 충무 근해에서 양식중인 시료를 채취하여 근육의 엑스분을 조제하고 핵산관련 물질을 이온교환 크로마토그래피와 고속액체 크로마토그래피 방법으로 IMP를 동정하였으며, 또한 우렁쉥이 근육을 $0^{\circ}C$와 $20^{\circ}C$에 저장하면서 ATP 분해 생성물의 경시변화를 살펴보았다. 근육의 엑스분 중에서 IMP가 분포 확인되었다. 그리고 저장중의 일부 시료에서 Ado가 확인되었고, 모든 시료에서 IMP가 검출되어 Ado와 IMP분해 경로의 존재가 확인되었다. ATP 관련물질은 사후 저장 초기단계에서 AMP는 급격히 감소하고, Ino는 빠른 속도로 증가되었지만 Ado와 IMP는 미량으로써 큰 증감현상을 보이지 않았다. 이와 같은 변화는 우렁쉥이 근육중에 AMP deaminase 활성은 있으나 미약하여 여러 해산 무척추동물에서처럼 Ado 분해경로를 가지는 것으로 추정된다. 따라서 우렁쉥이 근육의 ATP는 해산 무척추동물 중의 새우${\cdot}$게류, 갯가재 등의 갑각류 근육에서처럼 Ado경유와 IMP경유의 양쪽 분해경로를 같이 가지고 있는 것으로 판단된다.
Objective: Inosine monophosphate (IMP) is a key factor that imparts of meat flavor. Differences in the IMP content in the muscles were evaluated to improve chicken meat quality. Methods: For this study, the IMP content was detected by high performance liquid chromatography. The gene expression profiles of Jingyuan chickens with different feeding patterns and different sexes were analyzed by RNA-sequencing (RNA-seq). Results: Breast muscle IMP content in free-range chickens was extremely significantly higher than that of caged chickens (p<0.01). Breast muscle IMP content in hens was also higher than that of cocks, but the difference was not significant. Correlation analysis showed that the breast muscle IMP content in caged hens and cocks was negatively correlated with the shear force, and the breast muscle IMP content in free-range hens was significantly negatively correlated with the shear force (p<0.05). The two key genes associated with IMP synthesis in chickens with different feeding patterns were glutamate-ammonia ligase (GLUL) and phosphodiesterase 10A (PDE10A). Bioinformatics analysis revealed that the GLUL and PDE10A genes are involved in glutamine biosynthesis and purine salvage pathways respectively. In addition, GLUL expression was positively correlated with the IMP content in caged and free-range chickens, and PDE10A expression was significantly positively correlated with the IMP content in caged and free-range chickens (p<0.05). Conclusion: These findings will facilitate the comprehension of the deposition of IMP in the muscles and thereby aid the process of selection and breeding of good quality local chickens.
To, Van;Kim, Hyun Ju;Jang, Wijeong;Sreejith, Perinthottathil;Kim, Changsoo
한국발생생물학회지:발생과생식
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제25권4호
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pp.313-319
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2021
Hub cells comprise a niche for germline stem cells and cyst stem cells in the Drosophila testis. Hub cells arise from common somatic gonadal precursors in embryos, but the mechanism of their specification is still poorly understood. Here we find that RNA binding proteins Lin28 and Imp mediate transcript stability of Bowl, a known hub specification factor; Bowl transcripts were reduced in the testis of Lin28 and Imp mutants, and also when RNA-mediated interference against Lin28 or Imp was expressed in hub cells. In tissue culture Luciferase assays involving the Bowl 3'UTR, stability of Luc reporter transcripts depended on the Bowl 3'UTR and required Lin28 and Imp. Our findings suggest that proper Bowl function during hub cell specification requires Lin28 and Imp in the testis hub cells.
In attempts to obtain IMP Producting strains, Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6872 was treated wilts N.1.6. Adenine-guanine requiring mutants were obtained from Brevibacterium ammoniagenes ATCC 6872, and then a strain of them was selected for production of IMP and named Brevibacterium ammoniagenes No.9(ade', gu'). The production of IMP by Brevibacterium ammoniagenes nuts No.9 was about 3mg/ml for 4 day of culture. The optimal concentration of adenine and guanine was 150mg/mg.
Multidrug resistance of tumors has been a severe obstacle to the success of cancer chemotherapy. The study wants to investigate the reversal effects of imperatorin (IMP) on doxorubicin (DOX) resistance in K562/DOX leukemia cells, A2780/Taxol cells and in NOD/SCID mice, to explore the possible molecular mechanisms. K562/DOX and A2780/Taxol cells were treated with various concentrations of DOX and Taol with or without different concentrations of IMP, respectively. K562/DOX xenograft model was used to assess anti-tumor effect of IMP combined with DOX. MTT assay, Rhodamine 123 efflux assay, RT-PCR, and Western blot analysis were determined in vivo and in vitro. Results showed that IMP significantly enhanced the cytotoxicity of DOX and Taxol toward corresponding resistance cells. In vivo results illustrated both the tumor volume and tumor weight were significantly decreased after 2-week treatment with IMP combined with DOX compared to the DOX alone group. Western blotting and RT-PCR analyses indicated that IMP downregulated the expression of P-gp in K562/DOX xenograft tumors in NOD/SCID mice. We also evaluated glycolysis and glutamine metabolism in K562/DOX cells by measuring glucose consumption and lactate production. The results revealed that IMP could significantly reduce the glucose consumption and lactate production of K562/DOX cells. Furthermore, IMP could also remarkably repress the glutamine consumption, α-KG and ATP production of K562/DOX cells. Thus, IMP may sensitize K562/DOX cells to DOX and enhance the antitumor effect of DOX in K562/DOX xenograft tumors in NOD/SCID mice. IMP may be an adjuvant therapy to mitigate the multidrug resistance in leukemia chemotherapy.
Shahryari, F.;Safarnejad, M.R.;Shams-Bakhsh, M.;Schillberg, S.;Nolke, G.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제23권8호
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pp.1047-1054
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2013
Witches' broom of lime is a disease caused by Candidatus Phytoplasma aurantifolia, which represents the most significant global threat to the production of lime trees (Citrus aurantifolia). Conventional disease management strategies have shown little success, and new approaches based on genetic engineering need to be considered. The expression of recombinant antibodies and fragments thereof in plant cells is a powerful approach that can be used to suppress plant pathogens. We have developed a single-chain variable fragment antibody (scFvIMP6) against the immunodominant membrane protein (IMP) of witches' broom phytoplasma and expressed it in different plant cell compartments. We isolated scFvIMP6 from a naïve scFv phage display library and expressed it in bacteria to demonstrate its binding activity against both recombinant IMP and intact phytoplasma cells. The expression of scFvIMP6 in plants was evaluated by transferring the scFvIMP6 cDNA to plant expression vectors featuring constitutive or phloem specific promoters in cassettes with or without secretion signals, therefore causing the protein to accumulate either in the cytosol or apoplast. All constructs were transiently expressed in Nicotiana benthamiana by agroinfiltration, and antibodies of the anticipated size were detected by immunoblotting. Plant-derived scFvIMP6 was purified by affinity chromatography, and specific binding to recombinant IMP was demonstrated by enzyme-linked immunosorbent assay. Our results indicate that scFvIMP6 binds with high activity and can be used for the detection of Ca. Phytoplasma aurantifolia and is also a suitable candidate for stable expression in lime trees to suppress witches' broom of lime.
The present study examined the effects of dietary supplementation with nucleotide (inosine monophosphate product, IMP) on the growth performance, feed utilization, and non-specific immune responses of juvenile tilapia Oreochromis niloticus. Triplicate groups of tilapia (initial body weight, $7.4{\pm}0.04$ g) were fed experimental diets containing 0%, 0.05%, 0.1%, and 0.2% IMP. Fish were fed six times a day until apparent satiation for 13 weeks. At the end of the feeding trial, final body weight and food utilization of fish fed 0.1% IMP were significantly higher than those of fish fed the control diet. Results of hematological parameters were not affected by dietary IMP. However, blood protein level was significantly higher in the 0.05% treatment, as compared to that of the control and 0.2% IMP diets. Myeloperoxidase activity was higher in fish fed 0.1% IMP than in fish fed the control and 0.2% IMP diets. These results suggest that dietary supplementation with IMP can enhance the growth performance, feed utilization, and innate immune response of juvenile tilapia. The optimal IMP supplementation level appears to be 0.1% in practical feed formulations for tilapia.
In this paper, changes in the concentration of inosine monophosphate (IMP) of muscles in Taihe Silkies chickens from 2 to 28 weeks of age were studied. The results showed that: (1) with increasing age, IMP content of muscles decreased continuously. (2) the relationship between body weight and IMP content of musculus pectoralis major was significantly negative (p<0.01), so was body weight and IMP content of musculus peronaeus, and their coefficients of correlation were -0.45, -0.38 respectively; the relationship between IMP contents of musculus pectoralis major and that of musculus peronaeus was more significantly positive (p<0.01), and its coefficient of correlation was 0.59. (3) by multiple regression analysis, changes of IMP content of muscles depended on the weeks of age and body weight. (4) from 2 to 28 weeks of age, the heritabilities of IMP content of musculus pectoralis major were calculated between 0.33-0.48, and those of musculus peronaeus were calculated between 0.51-0.69.
보다 간편하게 핵산관련물질을 정량할 목적으로 고속액체크로마토그래피를 이용한 정량법을 검토하였으며, 이 방법을 이용하여 시판 수산건제품의 ATP분해생성물의 함량을 정량하였다. 장치는 HPLC/ALC-244(Waters Associates Inc.)를, 칼럼은 ${\mu}-Bondapak\;C_{18}$ stainless steel column($3.9mm\;i.d.{\times}30.0cm$)을, 검출기는 UV검출기(254nm)를, integrator는 Yanagimoto system-1000을 각각 사용하였으며, 이동상(移動相)으로서는 $1\%$ triethylamine${\codt}$phosphoric acid 혼액 (pH 6.5, $1\%$ triethylamine 용액을 phosphoric acid로써 pH조절)을 사용하고 2ml/min로 용리시키는 것이 가장 분리능이 좋았다. 용리되는 순서는 hypoxanthine, IMP, inosine, AMP, ADP 및 ATP의 순이었으며, retention time 20분이내에 분석이 완료되었다. 그러나 5'-IMP와 5'-GMP는 분리되지 않았다. 자건품(煮乾品)은 이노신산(IMP) 함량이 전반적으로 많았는데, 그 중에서도 벤뎅이가 가장 함량이 많았다. 소건품(素乾品)에는 inosine, hypoxanthine 함량이 많았으며, 조미건제품(調味乾製品)도 소건품과 비슷한 양상이었으나 IMP 함량이 비교적 높은 것은 조미할 때 핵산계조미료가 첨가되었기 때문이라고 볼 수 있었다.
사람의 감염증 치료에 사용되는 carbapenem계 약제에 대한 내성균의 출현 및 확산은 감염증 치료를 제한할 뿐만 아니라 집단 발병의 원인이 될 수 있다. 이에 본 연구에서는 ${\beta}$-lactam 약제에 내성을 갖는 Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)를 대상으로 metallo-beta-lactamase (MBL)의 유전형을 규명함으로써 내성세균의 감염증 치료지침 및 확산방지책 마련에 기초 자료를 제공하고자 하였다. 본 연구의 대상이 된 254개의 임상 검체 중에서 42주의 P. aeruginosa 를 분리하여 imipenem 혹은 meropenem에 내성을 나타내는 Hodge 변법과 EDST에서 각각 28주와 23주가 양성반응을 보였다. DNA의 염기서열 분석결과 $bla_{IMP-6}$ 유전자 보유균이 8주, $bla_{VIM-2}$ 유전자 보유균이 17주로 59.5%(25/42)가 MBL을 생성하는 것으로 나타났다. $bla_{IMP-6}$의 유전자 환경은 $bla_{IMP-6}$-qac-aacA4-$bla_{OXA-1}$-aadA1 유전자 배열을 지니고 있었다. 또한 ERIC PCR 결과 IMP-6과 VIM-2를 생성하는 일부 균주에서 역학적 연관성이 있음이 확인되었다. 본 연구에서 분리한 carbapenem계 항균제 내성 P. aeruginosa가 보유한 $bla_{IMP-6}$ 유전자는 대구지역에서 발병이 보고된 유전자의 gene cassette와 일치하는 것으로 확인되었다. 따라서 이들 세균이 지역사회에 정착하고 있고 이들을 보유한 세균에 의한 감염증 치료시 치료약제에 대한 선택압을 증가시킬 것으로 우려된다. 그러므로 항균제 내성 검사를 통하여 적절한 항균제를 선택하고, 항균제 내성균들의 출현과 확산을 막는 연구가 계속되어야 할 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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