The diagnostic accuracy of routine cytological preparations from effusions ranges from 60% to 70%. Immunohistochemical markers, especially tumor-associated antigens, have been successfully employed to increase diagnostic sensitivity in effusion cytology. However, more than two different antibodies in diagnosis of effusions are needed. In the view of prevalence of abnormalities of p53 gene in human malignancies we investigated the diagnostic usefulness of demonstration of p53 protein immunoreactivity in distinguishing benign changes versus malignant processes in effusions. p53 protein expression was studied immunohistochemically in 76 effusions(28 malignant and 48 benign) using anti-human p53 antibody p53 immunoreactivity was identified in 19 of 28(67.9%) malignant effusions. In contrast, no p53 immunoreactivity was observed in all benign effusions. A specificity of 100% and a sensitivity of 67.9% were observed. These results suggest that immunohistochemical detection of p53 protein seems to be helpful in distinguishing benign changes versus malignant processes in effusions, although its principal limitation is its relatively low sensitivity.
Neuroprotective properties of lithium were investigated by using in vivo NMDA excitotoxicity model. The appearance of TUNEL positive cells was prominent within 24 h of NMDA (70 mg/kg, i.p.) injection in the regions of the cortex, hippocampal formation, and thalamus of mouse cerebrum. NMDA treatment resulted in the extensive enhancement of Bax immunoreactivity in the cortical and hippocampal regions. NMDA also increased the immunoreactivity of caspase 8 in the similar regions of the mouse cerebrum. However, the increased immunoreactivity of Bax and caspase 8 were dramatically attenuated by chronic lithium pretreatment (lithium chloride, 300 mg/kg/d, i.p. for $7{\sim}10$ days). At the same time, lithium ion blocked the appearance of TUNEL positive cells, and the morphological assessment indicated an effective neuroprotection by lithium against NMDA excitotoxicity. Although the exact action mechanism of lithium is not straightforward at this time, we propose that the inhibition of Bax and caspase cascade is involved in the neuroprotective action of lithium.
This study was performed to investigate the effect of ultrasound irradiation on $TGF-\beta_1$ expression in the surgically injured achilles tendons of rats. The results of this study were as following: 1. The control group (3 days after injury) expressed little immunoreactivity for $TGF-\beta_1$. 2. In the experimental groups, $TGF-\beta_1$ immunoreactivity of group 11(applied US for 3 days) was increased markedly than that of group 1(applied US for 1 day). 3, The experimental group 11(applied US for 3 days) expressed higher immunoreactivity for $TGF-\beta_1$ than control group. These findings suggest that ultrasound irradiation on the injured Achilles tendon may be of benefit such as increasing $TGF-\beta$ release in the inflammatory phase of heal ins process.
Purpose: This study aimed to compare the effect on nerve regeneration of ultrasound irradiation in rats with peripheral nerve injury. Methods: To investigate alterations of the NCAM immunoreactivity in non-crushed part and crushed part of the spinal cord, the unilateral sciatic nerve of the rats were crushed. The expression of NCAM was used as the marked of peripheral nerve regeneration, and also plays an important role in developing nerve system. Experimental animals were sacrificed by perfusion fixation at post-injury 1, 3, 7, 14 days after ultrasound irradiation. The pulsed US was applied at a frequency of 1MHz and a spatial average-temporal average Intensity of 0.5W/of (20% pulse ratio) for 1 mins. The Luxol fast blue-cresyl violet stain were also done to observe the morphological changes. Results: Alteration of NCAM immunoreactivity in the crushed part and the non-crushed part of lower lumbar spinal cord were observed. NCAM-immunoreactivity cells were some increased in the dorsal horn lamina I, III and cell ventral horn at 1 day after unilateral sciatic nerve injury. However, there was not significant difference in the relationship between crushed part and non-crushed part. NCAM-inmmunoreactivity was remarkably increased at 3 days after unilateral sciatic nerve injuryin the gray matter and white matter. NCAM-immunoreactivity was increased in the ventral horn and post horn of experimental crushed part. Also, NCAM-immunoreactivity in large motor neurons in ventral horns lamina VIII, IX were increased at 7 days after unilateral sciatic nerve injury. At 14 days after sciatic nerve crushed injury, there was no significant difference. All group were decreased for 14 days. In the time course of NCAM expression, all groups showed a significant difference at 3day groups(p<0.05). Whereas, CC group was noted a significant difference between 3day and 7 day group respectively. In NCAM expression, there were significantly increased in all group. In the relationship between CNC group and ENC group, significant difference was detected among 3, 7, 14 day group(p<0.05). The difference between CC group and ENC group were noted in all groups(p<0.05). Conclusion: It is consequently suggested that the effects of the ultrasound irradiation may increase the NCAM immunoreactive neurons and glial cell in the spinal cord after unilateral sciatic nerve crushed injury. Therefore, the increased NCAM immunoreactivity in the spinal cord may reflect the neuronal damage and healing process induced by a ultrasound irradiation after peripheral nerve injury in rat.
Objectives : This study was designed to evaluate the effects of Ohyaksungi-san(Wuyaoshungi-san) and Jungsongouhyul pharmacopuncture on pain reduction and nerve regeneration after crush injury in rat sciatic nerve. Methods : Animal model was produced through crush injury of right sciatic nerve and they were divided into four groups; Group I: no treatment control group; Group II: experimental group treated with Ohyaksungi-san(Wuyaoshungi-san); Group III: experimental group treated with Jungsongouhyul pharmacopuncture; Group IV: experimental group treated with Ohyaksungi-san(Wuyaoshungi-san) and Jungsongouhyul pharmacopuncture. For the assessment of pain, this study was observed the paw withdrawal latency(PWL) and immunoreactivity on the substance-P. For the assessment of nerve regeneration, the sciatic functional index(SFI) and immunoreactivity on the BDNF were measured. Results : 1. In the assessment of pain, the PWL of experimental groups was significantly higher than control group and group IV was significantly higher than other groups at the all days. 2. In immunohistochemical response of substance-P, as time passes, the immunoreactivity of all groups were decreased gradully. Especially, group IV had the lowest immunoreactivity. 3. In the assessment of SFI, the SFI of experimental groups were significantly higher than control group. 4. In immunohistochemical response of BDNF, the BDNF immunoreactivity of all groups was significantly higher than control group and especially, group IV had the highest immunoreactivity at the 14 days after injury. 5. H & E stain was used on the liver and kidney to investigate toxic effect of Jungsongouhyul pharmacopuncture and Ohyaksungi-san(Wuyaoshungi-san) on on 21 days after injury. However there were no any toxic effects both control group and experimental groups. Conclusions : On the basis of these results, we propose that Ohyaksungi-san(Wuyaoshungi-san) and Jungsongouhyul pharmacopuncture were related to pain reduction and motor nerve recovery, also decreased substance-P expression and increased BDNF expression after crush injury of sciatic nerve, especially these two treatments could be more effective when they were combined simultaneously.
Nam, Sung Min;Kwon, Hyun Jung;Kim, Woosuk;Kim, Jong Whi;Hahn, Kyu Ri;Jung, Hyo Young;Kim, Dae Won;Yoo, Dae Young;Seong, Je Kyung;Hwang, In Koo;Yoon, Yeo Sung
Laboraroty Animal Research
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v.34
no.4
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pp.176-184
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2018
In this study, we observed chronological changes in the immunoreactivity and expression level of myelin basic protein (MBP), one of the most abundant proteins in the central nervous system, in the hippocampus of Zucker diabetic fatty (ZDF) rats and their control littermates (Zucker lean control; ZLC). In the ZLC group, body weight steadily increased with age; the body weight of the ZDF group, however, peaked at 30 weeks of age, and subsequently decreased. Based on the changes of body weight, animals were divided into the following six groups: early (12-week), middle (30-week), and chronic (52-week) diabetic groups and their controls. MBP immunoreactivity was found in the alveus, strata pyramidale, and lacunosum-moleculare of the CA1 region, strata pyramidale and radiatum of the CA3 region, and subgranular zone, polymorphic layer, and molecular layer of the dentate gyrus. MBP immunoreactivity was lowest in the hippocampus of 12-week-old rats in the ZLC group, and highest in 12-week-old rats in the ZDF group. Diabetes increased MBP levels in the 12-week-old group, while MBP immunoreactivity decreased in the 30-week-old group. In the 52-week-old ZLC and ZDF groups, MBP immunoreactivity was detected in the hippocampus, similar to the 30-week-old ZDF group. Western blot results corroborated with immunohistochemical results. These results suggested that changes in the immunoreactivity and expression of MBP in the hippocampus might be a compensatory response to aging, while the sustained levels of MBP in diabetic animals could be attributed to a loss of compensatory responses in oligodendrocytes.
Pancreatic endocrine cells of the native Korean goat were investigated immunocytochemically at electron microscopic level. All glucagon-, insulin-, somatostatin- and pancreatic polypeptide(PP)-immunoreactive cells were showed chromogranin(CG) immunoreactivity in the secretory granules of each cells. In addition, bovine pancreatic polypeptide immunoreactivity was found to be colocalized in the secretory granules of the glucagon and insulin cells. These observations support that chromogranin is available as the marker of pancreatic endocrine cells on the native Korean goat and BPP colocalized in the secretory granules of glucagon and insulin cells.
Biodegradable polymeric microspheres were studied for their usefulness as carriers for the delivery of vaccine antigens. However, protein antigen could be denatured during microencapsulation processes due to the exposure to the organic phase and stress condition of cavitation and shear force. Therefore this study was carried out to re-evaluate the degree of protein denaturation during microencapsulation with poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) copolymer. PLGA microspheres containing ovalbumin (OVA), prepared by W/O/W multiple emulsification method, were suspended in pH 7.4 PBS and incubated with shaking at $37.5^{\circ}C$. Drug released medium was collected periodically and analyzed for protein contents by micro-BCA protein assay. In order to evaluate the protein integrity, release medium was subjected to the analyses of SDS-PAGE and size exclusion chromatography (SEC). And enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was introduced to measure the immunoreactivity of entrapped OVA and to get an insight into the three-dimensional structure of epitope. The structures of entrapped protein were not affected significantly by the results of SDS-PAGE and SEC. However, immunoreactivity of released antigen was varied, revealing the possibility of protein denaturation in some microspheres when it was evaluate by ELISA method. Therefore, in order to express the degree of protein denaturation, antigenicity ratio (AR) was obtained as follows: amount of immunoreactivity of OVA/total amount of OVA released ${\times}100(%)$. ELISA method was an efficient tool to detect a protein denaturation during microencapsulation and the comparison of AR values resulted in more accurate evaluation for immunoreactivity of entrapped protein.
Kim, Myeong-Ok;Koh, Phil-Ok;Kim, Jin-Hyun;Chung, Ki-Myung;Kang, Sang-Soo;Park, Wan-Sung
Animal cells and systems
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v.4
no.2
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pp.173-179
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2000
Evidence suggested that atypical antipsychotics (APs) such as clozapine show less side effects than those of typical APs such as haloperidol and sulpiride. However, little is known about chronic effects of these drugs on changes in gonadotropin releasing hormone (GnRH) mRNA expression and luteinizing hormone (LH) immunoreactivity. Male rats were divided into water-, haloperidol-, sulpiride-, and clozapine-treated groups, and these drugs were administered orally for 4 weeks. The changes in the expression of GnRH mRNA and the LH immunoreactivity were determined in the hypothalamus and pituitary, respectively, using in situ hybridization and immunohistochemistry. GnRH mRNAs were clearly expressed in the water-treated control vats. This was significantly reduced by the chronic treatments with the typical APs, especially with haloperidol, but not with atypical APs clozapine. Likewise, LH immunoreactivity was clearly stained in the control group. While its immunoreativity was significantly reduced by the chronic APs treatments, clozapine treatment showed only slight attenuation. The results show that the atypical APs clozapine has less side effects in the gonadal function than the typical APs haloperidol and the sulpiride. These results suggest that clozapine is a safer drug than the typical APs, at least in the reproductive system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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