This experiment was carried out to investigate the immuno-regulatory effects of histamine on IL-1 synthesis and Ca2+ uptake in P388Dl macrophage-like cell line. The addition of histamine (10-8-10-3 M) increased IL-1 production in P388D1, cells, in a dose dependent manner, the treatment of EGTA (10-7-10-4M) and Co2+ ion (10-5-10-4M) decreased macrophage-derived IL-1 activity, and the pretreatment of histamine at the peak of 10-4M significantly enhanced Ca2+ uptake to P388Dl Cells. These results suggested that exogenous histamine was effective on IL-1 production from macrophage and the intracellular Ca2+ uptake play a important role in histamine-stimulated IL-1 synthesis.
Similar to the other known structures of Bacillus thuringiensis Cry $\delta$-endotoxins, the crystal structure of the 65-kDa activated Cry4Ba toxin comprises three domains which are, from the N- to C-terminus, a bundle of $\alpha$-helices, a three-$\beta$-sheet domain, and a $\beta$-sandwich. To investigate the properties of the C-terminal domain III in isolation from the rest of the toxin, the cloned Cry4Ba-domain III was over-expressed as a 21-kDa soluble protein in Escherichia coli, which cross-reacted with anti-Cry4Ba domain III monoclonal antibody. A highly-purified domain III was obtained in a monomeric form by ion-exchange and size-exclusion FPLC. Circular dichroism spectroscopy indicated that the isolated domain III fragment distinctly exists as a $\beta$-sheet structure, corresponding to the domain III structure embodied in the Cry4Ba crystal structure. In vitro binding analysis via immuno-histochemical assay revealed that the Cry4Ba-domain III protein was able to bind to the apical microvilli of the susceptible Stegomyia aegypti larval midguts, albeit at lower-binding activity when compared with the full-length active toxin. These results demonstrate for the first time that the C-terminal domain III of the Cry4Ba mosquito-larvicidal protein, which can be isolated as a native folded monomer, conceivably participates in toxin-receptor recognition.
Objectives: The purpose of this study was to investigate the effects of Gardeniae Fructus Water Extract (GF) on the production of inflammatory mediators in RAW 264.7 cell treated with lipopolysaccharide (LPS). Methods: Gradeniae Fructus was extracted with distilled water (2,000 ml) for 2 hours. In order to evaluate cytotoxicity of GF, 3 - (4,5-dimethylthiazol-2-yl) - 2,5 - diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay was performed. To investigate antiinflammatory effects, the concentration of nitric oxide (NO) was measured with No assay, calcium (Ca) was measured with Fluo-4 Ca assay, and cytokine was measured by Bio-Plex cytokine assay in RAW 264.7 cell. And when p-value is below 0.05, it is judged to have the significant difference statistically. Results: 1. GF did not show any cytotoxicity. 2. GF suppressed the production of NO and Ca at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/ml$. 3. GF suppressed the production of interleukin (IL)-$1{\beta}$, IL-10, IL-12p40, macrophage-colony stimulating factor (M-CSF), macrophage inflammatory protein (MIP)-$1{\beta}$ and keratinocyte chemoattractant(KC) at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/ml$. 4. GF suppressed the production of vascular endothelial growth factor (VEGF), granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) and monocyte cheomattractant protein (MCP)-1 at the concentration of 25, 50 and $100{\mu}g/ml$. 5. GF suppressed the production of granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) and regulated on activation, normal T cell expressed and secreted (RANTES) at the concentration of 25 and $50{\mu}g/ml$. 6. GF suppressed the production of MIP-2 at the concentration of 50 and $100{\mu}g/ml$, and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ at the concentration of 50 and $200{\mu}g/ml$. Conclusions: These results suggest that GF has anti-inflammatory effect and immuno-modulating activity.
Shirazinia, Reza;Rahimi, Vafa Baradaran;Kehkhaie, Ashrafali Rezaie;Sahebkar, Amirhossein;Rakhshandeh, Hassan;Askari, Vahid Reza
Journal of Pharmacopuncture
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v.22
no.1
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pp.16-27
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2019
Generative and vegetative parts of the cactuses have had a long-lasting position in folk medicine and their effects could partly be confirmed in scientific experiments. Nowadays, the cactus, fruits, and cladodes are the focus of many studies because of their desirable properties. Therefore, the summarized reports of valuable properties of medicinal plants may be a good way to familiarize researches with a new source of drugs with lower side effects and higher efficacy. Opuntia dillenii, a well-known member of the Cactaceae family, is used as a medicinal plant in various countries and grows in the desert, semi-desert, tropical and sub-tropical areas. It shows diverse pharmacological activities such as: antioxidant, anti-inflammatory, anti-tumor, neuroprotective, hepatoprotective, hypotensive etc. OD fruit also possesses valuable constitutes for instance: betalains, ascorbic acid, total phenol, protein as well as essential elements which suggest the significant potential of this plant as a complementary therapy against several pathological conditions. This review describes experimental evidence about pharmacological and therapeutic potential of OD in order to give the basis of its application in the prevention and treatment of some chronic diseases. More studies on OD can help better understanding of its pharmacological mechanism of action to explain its traditional uses and to identify its potential new therapeutic applications.
Kim, Dae-Hee;Park, Sook-Jahr;Jung, Ji-Yoon;Kim, Sang-Chan;Byun, Sung-Hui
The Korea Journal of Herbology
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v.24
no.4
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pp.39-47
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2009
Objectives : Hwangnyeonhaedok-tang (Huanglian Jiedu Tang; HHT) has been widely used for purging' 'fire' and lessening virulence of any pathogenic organism. However it has been rarely conducted to evaluate the immuno-biological activity. In this study, we evaluated anti-inflammatory effects of HHT in LPS-activated Raw264.7 cells. Methods : Cells were treated with $1\;{\mu}g/ml$ of LPS 1 h prior to the addition of HHT. Cell viability was measured by MTT assay. The production of NO was determined by reacting cultured medium with Griess reagent. PGE2 and proinflammatory cytokines were detected by ELISA. Expression of iNOS, COX-2, $I{\kappa}B{\alpha}$ and NF-${\kappa}B$ were analyzed by immunoblot analysis. Results : All three doses of HHT (0.03, 0.10 and 0.30 mg/ml) had no significant cytotoxicity during the entire experimental period. The levels of NO and PGE2 were dramatically augmented by LPS compared to control. However, HHT extract dose-dependently reduced these increases. Expression of iNOS and COX-2 protein were also decreased by treatment with HHT extract. Furthermore, HHT extract significantly reduced the nuclear translocation of NF-${\kappa}B$ which is critical in regulating inflammation through transcription of iNOS and COX-2. In addition, HHT extract reduced the elevated production of inflammatory cytokines including TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$ and IL-6. Conclusions : The results in this study demonstrate that HHT extract exerts anti-inflammatory activities through the inhibition of NO, PGE2 and proinflammatory cytokines production via the suppression of NF-${\kappa}B$.
Yeonji Lee;Hyunwoon Lim;Jin-Woo Song;Jaesik Kim;Seunghan Lee;Kang-Woong Kim;Kyeong-Jun Lee
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.56
no.3
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pp.300-308
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2023
This study aimed to evaluate the utilization of low fish meal (LFM) diet and black soldier fly (BSF) Hermetia illucens meal supplementation in LFM diet as a fish meal (FM) replacer or functional additive for juvenile olive flounder Paralichthys olivaceus. Three LFM diets were prepared to contain 30, 25, and 20% FM, respectively (designated as F30, F25, and F20). Three BSF diets were prepared by adding 2.0, 2.5, and 3.0% BSF in the LFM diets, respectively (designated as F30B2.0, F25B2.5, and F20B3.0). A total of 540 fish (initial mean body weight: 22.3±0.01g) were randomly distributed into 18 tanks (240 L) in triplicate groups and fed the experimental diets twice daily for 12 weeks. Results showed that there were no significant differences in the growth performance, feed utilization and survival among all the groups. Lysozyme activity significantly increased in F30B2.0 and F25B2.5 groups compared to their respective LFM groups. Total immunoglobulin was significantly higher in F30 group than in F20 group. Anti-protease and myeloperoxidase activities were significantly higher in F30B2.0 group than in F20 group. Innate immunity gradually decreased with decreasing FM level in all the groups. BSF supplementation significantly improved immunity compared to their respective LFM diets. Therefore, BSF could be used as an immuno-stimulant supplement in LFM diets for P. olivaceus.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.45
no.1
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pp.52-60
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2016
The biological activity of polysaccharide is greatly influenced by polysaccharide structure and molecular distribution. Here, we developed a rapid and convenient isolation method for fractionating polysaccharides with different characteristics and optimized it using a polysaccharide mixture from Korean persimmon leaves. A crude polysaccharide mixture, persimmon leaves-enzyme (PLE) fraction, was isolated from persimmon leaves digested with pectinase and ethanol precipitation. The PLE fraction was further fractionated with a serially diluted ethanol solution (ethanol : deionized water=4:1, 2:1, 1.5:1, 1:1, and 0.5:1) to produce 10 subfractions (five precipitate fractions labeled from PLE-4 to PLE-0.5 and five supernatant fractions labeled from PLE-4S to PLE-0.5S). HPLC analysis indicated that PLE-4 and -2 consisted of diverse polysaccharides, whereas PLE-1.5, -1, and -0.5 contained high molecular weight (MW) polysaccharides. The fractions from PLE-4 to PLE-1 were mostly composed of 13 different characteristic sugars in rhamnogalacturonan (RG) I and II, and the sugars contained an arabino-${\beta}$-3,6-galactan moiety. However, PLE-0.5 did not contain RG-II or ${\beta}$-arabino-3,6-galactan. Treatment of macrophages with fractions PLE-1.5S and PLE-1S led to a $10{\mu}g/mL$ increase in interleukin (IL)-6 production, whereas treatment with PLE-4S and PLE-2S fractions composed of low MW polysaccharides resulted in reduced levels of IL-6. These results indicate that this isolation method may be useful for the rapid and convenient fractionation of bioactive RGs from polysaccharide mixtures with various properties.
This study was performed to investigate anticancer activities and immuno modulatory activities in the several parts of the A. mono and A. okamotoanum. The cytotoxicity of 1 $mg/m{\ell}$ of the water extracts on normal human lung cell(HEL299) was < 19.5%. The anticancer activity of all extracts were increased in over 55% against AGS (stomach adenocarcinoma), A549 (lung adenocarcinoma), Hep3B (liver adenocarcinoma, and MCF-7 (breast adenocarcinoma) cells. The growth of human immune B and T cells was improved of A. mono and A. okamotoanum in adding 1.0 $mg/m{\ell}$ concentration. The secretion of the IL-6 and $TNF-{\alpha}$ of human immune B and T cells was increased with all extracts of A. mono and A. okamotoanum. All extracts of. A. mono and A. okamotoanum increased NK cell growth. The results showed that the barks and woods extracts of A. mono and A. okamotoanum had useful biological activities. In addition, bark of A. okamotoanuim showed the highest anticancer and immune activities.
Inhibitory effect of useful components from Cheongmoknosang mulberry leaves extracts against Helicobacter pylori were investigated to develope them to a health functional food. It was confirmed that H. pylori bacterial infection occurred after 6 weeks over in C57BL/6 mouse which was caused the infection, and the average number of pathogens was $8{\times}10^5$ CFU/mL. Effects of the prevention and cure against H. pylori were tested by the mouth administration with Cheongmoknosang mulberry leaves extracts include the active ingredient, and number of H. pylori colony in stomach of drug groups were decreased more than control group. The result of testing immuno-glogulin isotype from the separated serum from a mouse, IgG1, IgA produced more in administered group, and it is expected to inhibit the H. pylori infection because of increasing antibody production in the mixture. These results suggest that caffeic acid, rosemarinic acid and chlorogenic acid in Cheongmoknosang mulberry leaves extracts are very effective to prevent or cure against H. pylori infection. So the ratio of infection is increasing and it is regarded to be able to prevent and cure the disease like gastritis, gastric ulcer and gastric cancer which are caused by H. pylori.
Yam has been recognized as healthy food due to its various biological activities, such as anti-obesity, antimicrobial, anticancer and immuno-stimulation activities, and its consumption has been increased during last decades. In this study, to investigate low-temperature, long-term storage of yam and to develop processed yam products, yam-putrefactive psychrotrophic bacteria were isolated from rotted yam and identified based on BBL identification system, fatty acid analysis in cell membrane and 16S rDNA sequence analysis. The putrefaction activity of isolated thirteen bacteria was evaluated using yam-slices (NaOCl-treated, autoclaved yam and without treatment), and YAM-10 and YAM-12 were identified as major psychrotrophic putrefactive bacteria. Both YAM-10 (Pseudomonas cepacia) and YAM-12 (Pseudomonas rhodesiae) bacteria grew well at 4$\sim$12$^{\circ}C$ and showed strong activity of polymer degrading enzymes, especially amylase, carboxy methyl cellulase and xylanase, at 20$^{\circ}C$. But they failed to grow at acidic pH (<5) or alkaline pH (>10). Our results suggested that the control of psychrotrophic Pseudomonas sp. by pH change and inhibition of polymer degrading enzymes, such as amy-lase, are necessary to long-term storage of yam.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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