• 제목/요약/키워드: ITS rDNA sequences

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Phylogenetic relationship of ribosomal ITS2 and mitochondrial COI among diploid and triploid Paragonimus westermani isolates

  • Park, Gab-Man;Im, Kyung-Il;Yong, Tai-Soon
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제41권1호
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    • pp.47-55
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    • 2003
  • We compared patterns of intraspecific polymorphism of two markers with contrasting modes of evolution, nuclear ribosomal DNA (rDNA) and mitochondrial DNA (mtDNA), in the lung fluke, diploid and triploid Paragonimus westermani from three geographical regions of Korea. The genetic distances between three populations of Korean diploid and triploid P. westermani showed no significant difference in the nucleotide sequences of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (mtCOI) and ribosomaal second internal transcribed spacer (ITS2) genes. A highly resolved strict-consensus tree was obtained that illustrated phylogenetically useful information of the ITS2 and mtCOI sequences from diploid and triploid P. westermani.

Analysis of Phylogenetic Relationship of 30 Cultivars of Korean Mulberry (Rosales: Moraceae) in Korea

  • Kwon, O-Chul;Kim, Hyun-Bok;Sung, Gyoo-Byung;Kim, Yong-Soon;Ju, Wan-Taek
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제37권2호
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    • pp.82-89
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    • 2018
  • This study was carried out to understand phylogenetic relationships of the 30 mulberry cultivars converved in Korea based on the ITS rDNA region, and they were compared to 40 reference sequences from GenBank. The size and the G+C content of the ITS rDNA gene regions from the 30 Korean mulberry cultivars and 40 reference sequences varied from 612-630 bp and 58.19-61.62%, respectively. Based on the results of the comparative phylogenetic analysis of the ITS rDNA regions of the 30 Korean mulberry cultivars and 40 reference sequences, they were divided into three groups (Group 1, 2, and 3) and two subgroups (Group 1A and 1B within Group 1). The sequence lengths of the Korean mulberry cultivar numbers 1-26 and 27-30 were 615 bp and 616 bp, respectively. At 205 bp location of ITS1 rDNA region, the cultivar numbers 1-26 contain the nucleotide thymine but the cultivar numbers 27-30 contain the nucleotide adenine. In addition, the insertion of the nucleotide adenine at 206 bp location was found only in the four Korean mulberry cultivars (numbers 27-30). Based on these sequence information and phylogenetic result, the 30 Korean mulberry cultivars were identified as M. alba and M. australis. This study will contribute to the construction of genetic database constructions and accurate variety identifications for unidentified mulberry varieties in Korea.

Rapid and Accurate Species-Specific Detection of Phytophthora infestans Through Analysis of ITS Regions in Its rDNA

  • Kim, Kyoung-Su;Lee, Youn-Su
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제10권5호
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    • pp.651-655
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    • 2000
  • Polymerase chain reaction (PCR) was used to specifically detect Phytophthora infestans by analyzing the sequences of the ribosomal internal transcribed spacer regions (ITS) in the rDNA of the Phytophthora species. Based on the sequence data, PISP-1 together with the ITS3 primer were used to detect p. infestans. A single ca. 450 bp segment was observed in P. infestans, but not in the other fungal or bacterial isolates. Two factors, the annealing temperature and template DNA quantity, were investigated to determine the optimal conditions. Using these species-specific primers, a unique band was obtained within annealing temperatures of $55^{\circ}C$-$61^{\circ}C$ and template DNA levels of 10 pg-100 ng.

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Ribosomal DNA의 ITS 염기서열에 의한 동충하초속균의 유연관계 (Genetic Relationship of Cordyceps spp. Based on Internal Transcribed Spacer Sequences of Ribosomal DNA)

  • 남성희;황재삼;조세연;구태원
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제41권3호
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    • pp.174-179
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    • 1999
  • The genetic relationships among six Cordyceps spp. were investigated based on internal transcribed spacer sequences of ribosomal DNA .A portion of the these genes was amplified by PCR. Approximately 590 base pairs were successfully amplified, cloned, sequenced, compared. The nucleotide sequence of the six amplified fragments were aligned by the clustal W program. As a result, Cordyceps militaris shared 87, 96, 98, 90 and 97% sequences homology with Paecilomyces japonica, Paecilomyces sp. J300, Paeciomyces farinosa. Paecilomyces sp. J500 and Cordyceps sinensis, respectively. Paecilomyces japonica also shared 87, 88, 92 and 87% sequence similarity with Paecilomyces sp. J300, Paecilomyces farinosa, Paecilomyces sp. J500 and Cordyceps sinensis, repectively.

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소형의 포자를 형성하는 Alternaria 균류의 분자생물학적 특징 (Molecular Characterization of Small-Spored Alternaria Species)

  • 김병련;박명수;조혜선;유승헌
    • 식물병연구
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    • 제11권1호
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    • pp.56-65
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    • 2005
  • 이 연구는 Alternaria속 균류 중에서 분생포자의 형태가 유사하여 분류, 동정이 매우 어려운 소형의 포자를 형성하는 11종의 Alternaria의 종간 유연관계와 분류체계를 확립하기 위하여 공시균들의 ribosomal DNA의 ITS 및 미토콘드리아 small submit 영역의 염기서열 분석, 그리고 URP primer에 의한 핵산지문분석을 실시하였다. 소형의 포자를 형성하는 11종 Alternaria속의 rDNA internal transcribed spacer(ITS) 영역과 미토콘드리아 small submit rDNA 의 염기서열을 분석하였던 바 A. infectoria를 제외한 10종의 Alternaria에서 100%의 상동성을 나타내었다. 이는 공시한 10종의 Alternaria가 유전적으로 매우 근연의 관계에 있음을 나타내며, 이 marker는 공시균들의 종구분에 이용할 수 없음을 나타내는 것이다. URP primer 10종을 공시하여 소형의 포자를 형성하는 Alternaria 균류의 핵산지문분석을 실시한 결과, 개개의 primer 로는 종간의 구분이 불가능하였으나 여러개의 primer를 종합하여 UPGMA분석을 실시할 경우 비록 종간 유사도는 높았디만 각각의 종은 독립된 cluster를 형성하여 종간 구별이 가능하였다. 자리공에서 분리한 Alternaria sp.는 URP-PCR 핵산지문 분석 결과 다른 Alternaria 종들과 차이가 인정됨으로 이 균은 미기록인 신종의 Alternaria로 사료되었다. A.infectoria는 다른 Alternaria 종들과 ITS 분석 및 URP-PCR 핵산지문분석에서 큰 차이를 보임으로서 뚜렷이 구별되는 종으로 판단되었다.

Multiplex PCR을 이용한 4 종류 목향(木香)의 감별 (Identification 4 kinds of Muxiang using Multiplex PCR)

  • 도의정;이금산;주영승;오승은
    • 대한본초학회지
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    • 제29권3호
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    • pp.19-26
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    • 2014
  • Objectives : Aucklandiae Radix (Muxiang) one of important herbal medicines in oriental medicine, is defined as the dried root of Aucklandia lappa (Asteraceae). Owing to the similarities in the morphology and name, Inulae Radix (Tu-Muxiang) and Vladimiriae Radix (Chuan-Muxiang) as well as Aristolochiae Radix (Qing-Muxiang) originated from other medicinal plants are often used as substitutes and/or adulterants of Aucklandiae Radix. Therefore, a reliable authentication of these herbal medicines is necessarily for the public health and prevention of misuse. Methods : 32 samples of medicinal plants supplying Aucklandiae Radix, Inulae Radix, Vladimiriae Radix, and Aristolochiae Radix were collected in Korea and China. The ITS (Internal transcribed spacer) nucleotide sequences of samples were determined. The PCR primers to amply DNA marker of each herbal medicine were designed basing on the specific ITS regions showing differences in the sequences among medicinal plants. Results : Primer set Al R/IS F designed in this work amplified 220 bp PCR product only in samples of Aucklandiae Radix. In contrast, primer set Ih F/IS R, Vs R/IS F, and AcR F1/Ac R amplified 250 bp product, 356 bp prouct, and 516 bp product respectively to identify Inulae Radix, Vladimiriae Radix, and Aristolochiae Radix. Conclusions : The primers designed basing on the nucleotide sequences of ITS regions appearing differenced in the sequences among medicinal plants amplified the DNA markers for the identification of Aucklandiae Radix, Inulae Radix, Vladimiriae Radix, and Aristolochiae Radix. These herbal medicines were more efficiently identified by multiplex PCR method using all primers in a single PCR process.

Nucleotide sequence analysis of the 5S ribosomal RNA gene of the mushroom tricholoma matsutake

  • Hwang, Seon-Kap;Kim, Jong-Guk
    • Journal of Microbiology
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    • 제33권2호
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    • pp.136-141
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    • 1995
  • From a cluster of structural rRNA genes which has previsouly been cloned (Hwang and Kim, in submission; J. Microbiol. Biotechnol.), a 1.0-kb Eco RI fragment of DNA which shows significant homology to the 25S and rRNA s of Tricholoma matsutake was used for sequence analysis. Nucleotide sequence was bidirectionally determined using delection series of the DNA fragment. Comparing the resultant 1016-base sequence with sequences in the database, both the 3'end of 25S-rRNA gene and 5S rRNA gene were searched. The 5S rRNA gene is 118-bp in length and is located 158-bp downstream of 3'end of the 25S rRNA gene. IGSI and IGS2 (partial) sequences are also contained in the fragment. Multiple alignment of the 5S rRNA sequences was carried out with 5S rRNA sequences from some members of the subdivision Basidiomycotina obtained from the database. Polygenetic analysis with distance matrix established by Kimura's 2-parameter method and phylogenetic tree by UPGMA method proposed that T. matsutake is closely related to efibulobasidium allbescens. Secondary structure of 5S rRNA was also hypothesized to show similar topology with its generally accepted eukaryotic counterpart.

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Phylotype에 의한 수종의 Phellinus속의 분류체계 확립 및 종간구별을 위한 신속동정법 개발 (Taxonomical Classification and Species-specific Detection of Genus Some Phellinus using Phylotype)

  • 김성윤;이재윤;김기영;이기원;박재민;김문옥;이태호;이재동
    • 한국균학회지
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    • 제31권3호
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    • pp.121-128
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    • 2003
  • 국내 유통균주에 대한 Phellinus속의 분류체계를 확립하고 종간구별을 위한 신속동정법을 개발하기 위해 계통학적 정보를 지니고 있는 ITS1, 5.8S rRNA및 ITS2부위의 염기서열을 밝히고 ITS1과 ITS2 부위의 다양한 염기서열을 이용하여 종 특이적인 유전자 탐침을 개발하였다. 본 연구에서 조사된 바에 의하면, 상황버섯으로 시판되고 있는 국내유통균주는 총 9균주로서 P. pini가 4종, P. baumii가 3종, P. igniarius와 P. linteus가 각각 1종으로 확인되었으며 P. gilvus은 조사되지 알았다. 그 중 P. pini는 대부분 중국에서 수입된 제품이었고 P. igniarius를 포함한 P. baumii는 주로 북한산 제품으로 조사되었다. 한편 P. linteus와 P. baumii는 변이가 높은 ITS1 , ITS2 부위에서도 다른 종에 비하여 높은 상동성을 나타내어 종 특이적인 유전자 탐침이 유효하지 않은 반면에 P. igniarius, P. pini, P. gilvus종에 대한 detection primer로 각각 IF1-IR3, PF1-PF3, GF2-FR4 primer는 유전자 탐침이 유효함을 확인하였다. 유연관계가 아주 가까운 P. linteus와 P. baumii에 대한 정확한 분석을 위해서는 변이가 심한 ITS 부위와 보존성이 높은 18S rDNA 부위의 염기서열을 함께 분석, 비교하여야 가능하리라 사료된다.

개머루와 까마귀머루의 유전적 유연관계 분석 (Genetic Relationship of the Ampelopsis brevipedunculata var. heterophylla and Vitis thunbergii var. sinuata with the Other Vitis Plants)

  • 배영민
    • 생명과학회지
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    • 제27권1호
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    • pp.89-94
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    • 2017
  • 포도과(Vitaceae) 포도속(Vitis) 식물들 19종의 intergenic spacer 1 및 intergenic spacer 2의 염기서열을 Genbank에서 수집하였다. 그러나 국내에서 흔하게 발견되는 포도과 포도속 식물인 까마귀머루(Vitis thunbergii var. sinuata)와 포도과 개머루속 식물인 개머루(Ampelopsis brevipedunculata var. heterophylla)의 염기서열은 Genbank에서 발견할 수 없었다. 따라서 개머루와 까마귀머루를 채집하고 genomic DNA를 분리하여서 18S rDNA, ITS1, 5.8S rDNA, ITS2 및 28S rDNA의 일부를 증폭하고, 그 염기서열을 분석하였다. 이렇게 얻어진 염기서열을 다른 포도속 식물들의 염기서열과 MUSCLE (Multiple sequence comparison by log-expectation) algorithm으로 서로 비교하여 neighbor-joining tree 및 pairwise distance (p-distance)를 계산해 보았다. 그 결과 국내 자생종인 개머루와 까마귀 머루는 서로 간에는 높은 상동성을 보이지만 외국의 포도속 식물들과는 유전적 상관관계가 상당히 멀다는 것을 발견할 수 있었다. 이것은 아마도 우리나라 자생종들의 경우에 오랜 시간 동안 외국의 포도속 식물들과 지리적으로 격리된 상태에서 독립적으로 진화한 결과가 아닌가 생각된다. 또한 개머루와 까마귀머루의 염기서열의 상동성이 높은 데에도 불구하고, 형태를 기준으로 하는 기존의 분류체계에 따라서 개머루는 개머루속으로 까마귀머루는 포도속으로 분류가 되고 있다. 형태를 기준으로 하는 기존의 분류체계와 염기서열을 기준으로 하는 유전적 분류체계간의 괴리를 본 연구에서 다시 한 번 확인할 수 있었다.