Non-viral vectors, including lipid- or polymer-based systems, have attracted much attention to date as a gene delivery vehicle, due to safety issues with viral vectors. Chitosan, a naturally existing cationic polymer, has shown great potential as a gene delivery carrier, as it has low immunogenicity and toxicity, excellent transcellular transport ability, and is relatively easy to chemically modify. This review summarizes and discusses the general features of chitosan and its applications as a delivery carrier of DNA and RNA.
We fused the promoter region of an H3.2 chicken histone gene, whose expression is dependent on the cell cycle, to the 5' coding region of an H3.3 chicken histone gene, which is expressed constitutively at a low level throughout the cell cycle. This fusion gene showed a cell cycle-regulated pattern of expression, but in a different manner. The mRNA level of the fusion gene increase during the S phase of the cell cycle by about 3.7-fold at 6 h and 2.7-fold at 12 h after the serum stimulation. The mRNA level of the intact H3.2 gene, however, increased by an average of 3.6-fold at 6 h and 8.7-fold at 12 h. This different expression pattern might be due to the differences in their 3' end region that is responsible for mRNA stability. The 3' end of the H3.2 mRNA contains a stem-loop structure, instead of a poly(A) tail present in the H3.3 mRNA. We also constructed a similar fusion gene using a H3.3 histone gene whose introns had been eliminated to rule out the possibility of involvement of the introns in cell cycle-regulated expression. The expression of this fusion gene was almost identical to the fusion gene made previously. These results indicate that the promoter region of the H3.2 gene is only partially responsible for its expression during the S phase of the cell cycle.
Malak, Camelia A Abdel;Elghanam, Doaa M;Elbossaty, Walaa Fikry
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권18호
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pp.8197-8201
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2016
Background: To investigate the expression of the fragile histidine triad (FHIT) gene in acute lymphoblastic leukemia and its clinical significance. Materials and Methods: The level of expressed FHIT mRNA in peripheral blood from 50 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and in 50 peripheral blood samples from healthy volunteers was measured via RT-PCR. Correlation analyses between FHIT gene expression and clinical characteristics (gender, age, white blood count, immunophenotype of acute lymphoblastic leukemia and percentage of blast cells) of the patients were performed. Results: The FHIT gene was expressed at $2.49{\pm}7.37$ of ALL patients against $14.4{\pm}17.9$ in the healthy volunteers. The difference in the expression levels between ALL patients and healthy volunteers was statistically significant. The rate of gene expression did not significantly vary with immunophenotype subtypes. Gene expression was also found to be correlated with increase of total leukocyte and decrease in platelets, but not with age, gender, immunophenotyping or percentage of blast cells. Conclusions: FHIT gene expression is low in acute lymphoblastic leukemia and could be a useful marker to monitor minimal residual disease. This gene is also a candidate target for the immunotherapy of acute lymphoblastic leukemia.
HOTAIR is an lncRNA that has been known to have an oncogenic role in different cancers. There is limited knowledge of genetic and epigenetic elements and their interactions for the gene encoding HOTAIR. Therefore, understanding the molecular mechanism and its regulation remains to be challenging. We used different in silico analyses to find genetic and epigenetic elements of HOTAIR gene to gain insight into its regulation. We reported different regulatory elements including canonical promoters, transcription start sites, CpGIs as well as epigenetic marks that are potentially involved in the regulation of HOTAIR gene expression. We identified repeat sequences and single nucleotide polymorphisms that are located within or next to the CpGIs of HOTAIR. Our analyses may help to find potential interactions between genetic and epigenetic elements of HOTAIR gene in the human tissues and show opportunities and limitations for researches on HOTAIR gene in future studies.
We demonstrated the quantitative detection of a toxin-producing Microcystis aeruginosa (M. aeruginosa) strain with the laboratory protocol of the NanoGene assay. The NanoGene assay was selected because its laboratory protocol is in the process of being transplanted into a portable system. The mcyD gene of M. aeruginosa was targeted and, as expected, its corresponding fluorescence signal was linearly proportional to the mcyD gene copy number. The sensitivity of the NanoGene assay for this purpose was validated using both dsDNA mcyD gene amplicons and genomic DNAs (gDNA). The limit of detection was determined to be 38 mcyD gene copies per reaction and 9 algal cells/ml water. The specificity of the assay was also demonstrated by the addition of gDNA extracted from environmental algae into the hybridization reaction. Detection of M. aeruginosa was performed in the environmental samples with environmentally relevant sensitivity (${\sim}10^5$ algal cells/ml) and specificity. As expected, M. aeruginosa were not detected in nonspecific environmental algal gDNA over the range of $2{\times}10^0$ to $2{\times}10^7$ algal cells/ml.
Gene set enrichment analysis (GSEA)는 두 개의 클래스를 가지는 마이크로어레이 실험 데이터 분석을 위해 생물학적 특징을 기반으로 구성된 다양한 유전자-집합 중에서 두 클래스의 발현값들이 통계적으로 중요한 차이를 나타내는 유의한 유전자-집합을 추출하기 위한 분석 방법이다. 특히, 유전자에 대한 다양한 생물학적인 정보를 지닌 유전자 주석 데이터베이스(Cytogenetic Band, KEGG pathway, Gene Ontology 등)를 이용하여 마이크로어레이 실험에 사용된 전체 유전자 중 특정 기능을 가지는 유전자들을 그룹화하여 다양한 유전자-집합을 발굴하고, 각 유전자-집합 내에서 두 클래스간에 발현값의 차이를 참조하여 유의한 유전자들을 결정하여, 이를 기반으로 통계적으로 유의한 유전자-집합들을 최종 검출하는 방법이다. 본 논문에서는 GSEA 분석 과정에서 현재 주로 사용되고 있는 signal-to-noise ratio 기반 유전자 서열화(gene ranking) 방법 대신에, Fisher criterion을 이용한 유전자 서열화 방법을 적용함으로써 기존의 GSEA 방법에서 추출하지 못한 생물학적으로 의미 있는 새로운 유의 유전자-집합을 추출하는 방법을 제안하고자 한다. 또한, 제안한 방법의 성능을 고찰하기 위하여 공개된 Leukemia 관련 마이크로어레이 실험 데이터 분석에 적용하였으며, 기존의 알려진 결과와 비교 분석함으로써 제안한 방법의 유용성을 검증하고자 하였다.
The ${\beta}-CGTase$ gene of alkalophilic Bacillus firmus var. alkalophilus was cloned into E. coli using $pZErO^{TM}-2$ as a vector. The cloned gene encoded a total of 710 amino acid residues consisting of 674 amino acids of the matured protein and 36 amino acids of the signal peptide, including 20 amino acids from the lacZ gene in the vector. Although the cloned ${\beta}-CGTase$ gene did not contain the promoter and start codons, it was expressed by the lac promoter and lacZ start codon in the $pZErO^{TM}$ vector. A comparison was made with the amino acid sequence and ten other CGTases from Bacillus sp. Also, ten highly conserved regions, which are important amino acid residues in catalysis of CGTase, were identified. The lac promoter used for expression of the ${\beta}-CGTase$ gene was induced constitutively in recombinant E. coli even without IPTG possibly because of a lack of the lacI gene in both host and vector, repressing the lacZ gene in the lac operon. Its expression was catabolically repressed by glucose, however, its repression was reduced by soluble starch, mainly because of the extremely high increase of the cAMP level. ${\beta}-CGTase$ can be overproduced in the recombinant E. coli by maintaining intracellular cAMP levels mostly through the intermittent feeding of glucose during cultivation.
The pear psylla, $Cacopsylla$$pyricola$ (Hemiptera: Psyllidae), is a serious insect pest of commercial pear crops. The species, which resides on pear trees throughout its life cycle, is rapidly spreading in some regions of the world. The population genetic structure of the species collected from several pear orchards in Korea was studied to understand the nature of dispersal and field ecology of the species. The 658-bp region of mitochondrial COI gene and the 716-bp long complete internal transcribed spacer 2 (ITS2) of the nuclear ribosomal DNA were sequenced. Unlike other previously studied insect pests, the COI-based genetic diversity of the pear psylla was extremely low (maximum sequence divergence of 0.15%). This finding allowed us to conclude that the species may have been introduced in Korea relatively recently. ITS2 sequence-based analyses of phylogeny, population differentiation, gene flow, and hierarchical population structure all concordantly suggested that the pear psylla populations in Korea are neither genetically isolated nor hampered for gene flow. These genetic data are concordant with the dispersal of an overwintering winterform morph outside the non-pear habitat in the fall.
Bovine leukemia virus (BLV) is an etiological agent of chronic diseases in cows worldwide. The BLV is one of retroviruses that contain a multi-functional enzyme, reverse transcriptase produced from the pol gene in its genome. We have sequenced some regions in the pol gene of BLV proviruses found in the Southern province of Korea from samples that turned out to be BL V positives by a PCR analysis. On the 5' side of the BLV pol gene (polymerase region), it was found that there were four leucines located at every 7 amino acids. They can form a leucine zipper motif that was not same as the pol gene of Japanese BLV isolate. The sequencing result of the proviral pol gene in Korean-type BLV also revealed some mutations leading to amino acid changes such as $CCT(Pro){\to}CTC(Leu)$, $AAT(Asn){\to}AAA(Lys)$, and non-sensible variations i.e., $TCT(Ser){\to}TCC(Ser)$, $ATT(Ile){\to}ATC(I1e)$ and $ACG(Thr){\to}ACA(Thr)$. On the 3' side of the pol gene (integrase region), some nucleotide sequences were mutated and led to amino acid changes. Among them, a mutation, $GAA(Glu){\to}GAC(Asp)$ occurred in many Korean-type BLV proviruses was very interesting because the amino acid was regarded as one of the most conserved amino acids in the retroviral integrase. It was also notable that the mutation on any leucine residue did not occur, in spite of its frequent appearance.
New treatment approaches are needed to improve the effectiveness of oral cancer treatment, since surgical resection of the tumor in oral region causes various oral dysfunctions. The molecular biology of oral cancer has been progressively delineated. Concurrently, gene therapy techniques have been developed that allow targeting or replacement of dysfunctional genes in cancer cells, offering the potential to treat a wide range of cancer. Oral carcinoma is attractive target for gene therapy because of its accessibility. In this article, we review the current status of gene therapy as applied to oral carcinoma.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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