Salmonella gallinarum로 면역화된 산란계로부터 생산된 계란 난황 중에 들어 있는 anti-S, gallinarum specific IgY를 분리하여 IgY의 효능을 살펴보았다. 또한 면역화 여부, specific IgY 농도별 및 균수별에 따른 항균력을 현미경적 관찰 및 탁도 측정, pH 변화로 검토하였다. 전체 IgY 중 anti-S. gallinarum IgY의 특이항체의 비율은 23%로 나타났다. 또한 anti-S, gallinarum IgY와 Salmonella유사 균주의 항원에 대한 IgY의 선택성을 조사한 결과 생산된 IgY는 S, gallinarum 에만 선택성을 갖는 것으로 나타났다. S, gallinarum 배양액에 anti-S. gallinarum specific IgY 0.3%를 첨가한 처리구는 상등액과 침전물에서 S, gallinarum가 응집되는 현상을 보였다. 그러나 면역을 하지 않은 닭에서 생산된 계란으로부터 추출한 IgY와 대조구에서는 응집 반응이 일어나지 않았다. Anti-S, gallinarum IgY를 첨가한 처리구가 대조구보다 S. gallinarum균들이 응집되는 정도에 있어서 확실한 효과를 나타내었다. 현미경 관찰시 균체들의 응집현상은 IgY 0.2% 이상 첨가시에 나타났으며, pH와 탁도에 있어서는 IgY 0.1% 이상 첨가구에서 S. gallinarum 성장 억제의 탁월한 효과를 볼 수 있었다. $10^5CFU/mL$에 Anti-S, gallinarum IgY 0.3%를 첨가한 처리구는 $10^3CFU/mL$와 거의 동일한 탁도를 나타내어 IgY에 의한 성장 억제를 확인할 수 있었다. 현미경적 관찰에서 IgY 첨가량이 증가할수록 더 큰 균괴를 형성하는 것을 볼 수 있었다. 위의 결과들을 통해 S. gallinarum로 면역화된 닭으로부터 생산된 계란에서 추출된 IgY를 사용하면 가금티푸스를 예방하는데 이용될 수 있을 가능성을 보여주었다.
An experiment was conducted to establish a large scale production method of anti-serum against chicken IgM and to profile the developmental changes of serum IgM levels during the feeding period(from hatching to 7 weeks of age) in broiler chicks. Blood samples were taken from Hubbard chicken at the age of hatching, three days of age, and weekly thereafter till to 7 weeks of age. The pure IgM was isolated from ammonium sulfate treated chicken serum by both sephadex G-200 and sepharose CL-6B chromatography. The breaking-through peak containing IgM appeared from the fraction 26 to 28. These fractions consisted mainly of IgM when tested by anti-chicken IgM(Nordic, Netherlands). Immunized with the heavy chain of this purified IgM, the rabbit immune sera(anti-chicken IgM) were formed a reaction only with the purified chicken IgM. The quantitative assay of serum IgM were carried by RID method. The optimal time for diffusion was 14 hours and the coefficient of determination($R^{2}$) for regression equation of standard curve was 0.992. It was observed that IgM concentrations were the highest at hatching(3.23 mg /mL), after that decreased gradually. From 2 to 5 weeks of age the levels unchanged(2.0 ~ 2.3mg /mL), and gradually decreased to 7 weeks of age(1.3 mg /mL).
This study was performed to elucidate the distribution and correlation of immunoglobulin G subclasses with the degree of inflammation in the experimentally induced rat pulp and periapical pathoses. The pulp exposures were made in 108 mandibular 1st molars of 54 rats and the teeth were left open to the oral environment The animals were sacrified at 3, 7, 15, 30, 60 and 90 days after pulp exposure, and examined microscopically and radiographically Seventy one specimens were routinely sectioned at the thickness of 4 - $6{\mu}$ and stained with Hematoxylin - eosin for histologic examination, with toluidine blue for mast cells, and with the primary antibodies against rat IgG subclasses by using the Avidin - Biotin complex method. The following results were obtained: 1. As the degree of inflammation of rat pulp and periapeces intensified, the number of IgG subclass containing cells per unit area, especially IgG2a and IgG2c, decresased. 2. The IgG2c cells were most predominantly found in the lesions with slight inflammation, IgG1 cells in mild or severe inflammation, and IgG2a cells in moderate inflammation. 3. IgG subclass containg cells were more predominantly observed in the periapical granuloma than periapical abscess or cyst(p<0.01). 4. IgG2a containing cells were predominant in pulp inflammation, IgG1 containing cells in periapical granuloma, IgG2a cells and IgG1 cells in periapical abscess, and IgG2a cells were significantly predominant in periapical cyst. 5. The number of IgG subclass containing cells and mast cells in periapical tissue decreased with time lapse after pulp exposure. And correlation index between mast cells and IgG1, IgG2a, IgG2b was stastically high.
The cDNA sequence of the Japanese flounder (Paralychthys olivaceus) IgD has been previously reported (GenBank accession no. AB052658) and this was followed by the detection of IgD mRNA expression in some flounder organ tissues. However, it has not been determined whether the flounder IgD gene is virtually expressed into IgD protein. To characterize the flounder immunoglobulins utilized in elucidating the mechanism, evolution and diversity of the flounder immune system, antibodies specific to IgD and IgM were necessary. In the present study, partial flounder recombinant IgD (rIgD), IgM (rIgM) and the conserved regions of IgD and IgM (rCIg) were produced by cloning the cDNA sequence using isotype specific primers which were designed to produce unique fragments of IgD and IgM specific amino acid sequences. The production of recombinant Igs was ascertained by SDS-gel electrophoresis and immunoblot analysis using anti-T7$\cdot}$Taq antibody. The produced recombinant Igs were purified using affinity columns, and used as immunogens. Antibodies specific to the isotype of flounder Igs were generated by immunizing rabbits with rfIgs and the antibodies produced were identified by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunoblotting. Specificities of the generated antibodies were evaluated by testing cross-reactivity between recombinant IgM and IgD. By ELISA, rabbit antibodies against the rfIgD fragment (anti-rfIgD) failed to recognize any kind of flounder serum Igs, whereas respective antibodies against rfCIg (anti-rfCIg) and rfIgM fragments (anti-rfIgM) reacted with serum Igs. Likewise, in immunoblot assays, though anti-rfIgD did not, both anti-rfCIg and anti-rfIgM bound with the ~85 kd flounder IgM heavy chain. By flow cytometry analysis, anti-rfCIg, anti-rfIgD and anti-rfIgM reacted with 6%, 3% and 6.5% of cells, respectively, suggesting that flounder IgD is not secreted in serum but expressed on flounder B-like cell surfaces as in mammals. Antibodies produced against recombinant flounder Igs could be used to develop sandwich assay systems for detecting flounder Igs and for further investigating the flounder immune system.
Many previous studies have proved that human allergic disease resulted from the formation of antibodies belonging to a unique immunoglobulin isotype termed immunoglobulin E (IgE). Most of IgE-producing plasma cells are found in the lymphoid tissue associated with the gastrointestinal and respiratory tracts. IgE may be found free in the mucosal secretions of these tissues, bound to local mast cells, or distributed by the systemic circulation to mast cells and basophils throughout the body. Total serum IgE concentrations tend to be higher in allergic adults and children compared with non-allergic individuals, but the value of total serum IgE as a screening test for allergic disease is limited. Total serum IgE levels are related to the probability of an individual having detectable allergen-specific IgE. Allergen-specific IgE concentrations vary with a person's age, the degree and duration of the recent allergen or cross-reactive allergen exposure. The value of quantitative assays for allergen-specific IgE has been suggested in recent studies. Serum IgE increases in many non-allergic diseases, including infectious and parasitic diseases. The IgE changes appear to be specific to the infectious agents, whereas non-specific in other diseases. The increased serum IgE in some of these conditions probably results from alterations in immune function. This review summarizes the clinical significance of total and allergen-specific IgE examinations in allergic diseases.
Toxoplasmosis has been well known as an important human infection to consider especially in pregnant women. Although many serologic methods are available, the diagnosis of toxoplasmosis can be extremely difficult. The presence of increased levels of Toxoplasma-specific IgG antibodies indicates an infection, but it does not differentiate between a recent and past infection. The purpose of our study was to compare the performance of the ELISA T. gondii IgG/IgM test, a widely used enzyme-linked immunosorbent assay, to the ELISA IgG avidity method. One hundred and four serum samples (from 38 males and 66 females) were tested and evaluated from symptomatic patients (chorioretinitis, lymphadenopathy), and from women in their first trimester of pregnancy who were suspected of having toxoplasmosis, The high IgG avidity and ELISA IgG antibody levels were in agreement for 51 of the specimens (49.0%). Thirty-eight discrepant (borderline) results from the IgG avidity method were positive for IgM (3 specimens) and IgG (37 specimens). Interestingly, out of the eight serum samples that were positive for both IgG and IgM antibodies, two samples were low IgG avidity, and three samples were borderline. There was no statistically significant relation observed between the results of the IgG avidity method and the ELISA IgG test, and the IgG avidity method and ELISA IgM test (X$^2$=1.987; p=0.370 and X$^2$=2.152; p=0.341, respectively). The IgG avidity method was considered easy to perform and an acceptable approach for the differentiation of discrepant results (recent/chronic) and for the current detection of T. gondii antibodies. We concluded that the determination of IgG avidity is a helpful tool for the diagnosis of the ocular form of toxoplasmosis and it is a safe method for screening this disease in the first trimester of pregnancy.
원발성 면역 결핍증에는 항체형성에 영향을 주는 질환이 가장 흔하고 그중 선택적으로 분비성 IgA 결핍이 많으나 IgG 농도가 정상 혹은 증가되어 있는 어떤 환자에서는 4가지의 IgG 아형 중에서 한 두 개 이상의 결핍이 발견된다. 대부분의 환자, 특히 IgG4 결핍증 환자에서 폐구균, 포도구균, 헤모필루스균 등에 의한 부비동염, 중이염, 폐렴 등이 반복된다. 상기 10세 여아는 평소에 잦은 상기도 감염을 앓아 왔고, 결핵성 림프절염으로 약물요법을 시행한 병력이 있으며, 매년 2~3차례 폐렴으로 입원치료를 받아왔다. 키와 몸무게가 모두 3백분위수 미만으로 성장부전(growth failure)가 지속되었다. 2003년 9월 심한 폐렴으로 입원 치료 중에 면역결핍 검사를 시행하였다. IgG, IgM level은 정상이었으나 IgG subclass 2, 3, 4에서 모두 감소된 수치를 보여 IgG 아형 결핍을 보였다. 저자들은 반복적인 호흡기 질환을 앓는 환아에서 성장부전이 동반된 IgG 아형 결핍 1례를 보고하는 바이다.
Edwardsiella tarda로 면역한 닭의 난황항체 (IgY) 정제 방법을 비교하였다. Anti-E. tarda IgY의 정제는 PEG법, chloroform-PEG법, ammonium sulfate법과 정제 kit를 사용한 4가지 다른 방법으로 실시하였다. 정제된 IgY는 64 kDa의 heavy chain과 27 kDa의 light chain을 나타내었다. E. tarda로 면역된 IgY는 면역되지 않은 대조 IgY 보다 높은 ELISA가와 응집항체가를 나타내었으며, 정제된 IgY는 western blotting에서 anti-E. tarda 토끼혈청과 유사한 E.tarda 단백질을 인식하였다. PEG법과 ammonium sulfate법에 의해 정제된 IgY는 응집항체가가 1:512, chloroform-PEG법과 정제 kit에 의해 정제된 IgY는 1:128을 나타내었으며, PEG법이 IgY를 정제하기 위한 가장 빠른 방법이었다. 이 연구의 결과로 PEG법이 IgY의 생물학적 활성을 유지함과 더불어 신속하고 효과적인 정제방법임을 알 수 있었다.
본 연구는 면역화된 산란계로부터 생산된 계란 난황중에 들어있는 S. mutans균주의 specific IgY를 분리하여 면역화 여부, Specific IgY 농도별 및 균수별에 따른 항균력을 현미경적 및 탁도측정에 의한 IgY의 항균력 효과를 검토하고자 실시하였다. 면역화 여부에 따른 탁도시험 결과 면역처리된 처리구에 crude IgY를 10%와 20% 첨가에 의해 항균 효과가 있었다. 면역을 하지 않은 닭에서 생산된 계란으로부터 추출한 IgY를 10% 첨가구와 대조구에서는 응집반응을 나타내지 않았다. 그러나 S. mutans로 면역화된 닭에서 생산된 계란에서 추출한 IgY의 10%첨가구는 상등액과 침전물에서는 균들이 응집되는 현상을 보였다. 면역화된 조난황 specific IgY를 첨가한 처리구가 대조구 보다 S. mutans균들이 응집되는 정도에 있어서 확실한 효과를 나타내었다. 조 난황 specific IgY의 농도별 시험에서는 5%이상 첨가구 들에서는 전반적으로 균체들의 응집현상이 나타났으며 IgY를 2.5% 이하로 첨가한 처리구와는 확연한 차이를 보였다. 탁도에 있어서도 조 난황 specific IgY 농도별 시험에서는 첨가농도에 따라 차이가 있었지만 10% 이상 첨가구에서는 탁월한 효과를 나타내었다. 응집된 균괴의 크기는 IgY첨가량이 증가할수록 점점 더 커져가는 현상을 나타내었다. 균수별에서는 $10^5\;cfu/mL$ 이상 접종구에서는 균체들이 응집되는 현상을 보였으며 균수가 많을수록 더욱 응집되는 현상을 나타내었다. Plaque 형성력은 감소하는 경향을 보였으며 IgY 농도 15%에서는 plaque 형성이 약 75%가 저해되었다. 따라서 면역화된 닭으로 부터 생산된 계란에서 추출된 crude IgY를 사용하여 S. mutans균으로부터 발생된 충치를 예방할 수 있을 것으로 사료되었다.
목 적 : 가와사끼병은 주로 5세 이하의 소아에서 많이 볼 수 있는 고열을 주소로 하는 신체내 어느 장기에나 혈관염을 일으키는 질환으로, 원인은 아직 밝혀지지 않았지만 어떤 감염원에 의하거나, 또는 감염균에 의해 생성된 항원에 의한 인체내 면역반응의 이상으로 생긴 자가 면역질환의 하나일 가능성이 제시되고 있어, 이에 저자들은 환아의 혈청내 면역 글로부린중 IgG 아형항체가를 급성기 고열시기에 측정하여 정상치와 비교하여 봄으로써 이 병의 면역학적 변화를 관찰하고, 아울러 진단과 치료에 도움이 되고자 본 연구를 시행하였다. 방 법 : 1995년 1월부터 1996년 12월까지 본원 소아과에 입원한 급성기 고열이 있던 가와 사끼병 환아 35명을 대상으로 혈청을 채취하여 Enzyme Immuno Assay(EIA) 법을 이용하여 총 IgG, IgM, IgA, IgE를 측정하였고, Single Radial Immuno Diffusion(SRID)법을 이용 하여 IgG 아형항체가를 측정하여 연령별 정상치와 비교하여 보았다. 결 과 : 1) 남여 비는 1.5:1.0으로 남아에서 많았다. 2) 총 IgG, IgM, IgA, IgE 는 대부분 연령에 따른 정상치 범위내에있었다. 3) 모든 환아에서 CRP, ESR, C3 등이 증가하는 급성기 염증반응을 볼 수 있었고 백혈구 증다증을 보인 경우가 많았다. 4) IgG 아형항체 중 IgG1, IgG2, IgG3는 연령별 정상치 범위내에 있었으나, IgG4는 모든 환아에서 현저하게 감소되어 있었다. 결 론 : 현재까지 알려진 바로는 원인과 병리기전이 정확히 밝혀지지는 않았지만, 가와사끼병이 감염원에의한 면역 반응의 이상으로 생긴 자가 면역질환의 일종일 가능성이 제시되고 있으므로 낮은 IgG4 치가 면역반응에 영향을 주어 이 병의 이환율과 합병증 발생의 위험성을 높일 수 있다고 생각되나, 각 보고자마다 결과가 서로 달라 좀 더 많은 시간과 예를 모아 연구 할 필요가 있다고 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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