The role of $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ in modulating the IgE receptor-mediated histamine secretion in the streptolysin-o-permeabilized human cultured mast cell was investigated. The expression of $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ proteins were regulated during human cultured mast cell differentiation, and a significant correlation was observed between the levels of expression of $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ proteins and IgE receptor-mediated histamine secretion capability in human cultured mast cells. Antibodies against $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ effectively inhibited the IgE receptor-induced histamine release, and the concentration of anti-$G{\alpha}12$ antibody used to inhibit histamine secretion was shown to also inhibit the IgE receptor-mediated elevation of intracellular $Ca^2+$. Therefore, the results suggest that $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ play roles in modulating IgE receptor-activated $Ca^2+$ influx, thereby regulating histamine release in cultured human mast cells. This is the first report to show that $G{\alpha}12\;and\;G{\alpha}13$ are involved in the regulation of $Ca^2+$ mediated exocytosis in human cultured mast cells.
This study investigated the effects of mycelia of Lentinus edodes mushroom-cultured Glycyrrihiza radix(LMG) on cancer cell lines and sarcoma 180(S-180), as well as on human mast cells. In an anti-cancer tests using Hep3B(hepatic cancer cell), MCF-7(breast cancer), and HeLa(uterine cancer) cells, LMG extract exhibited greater anti-proliferation effects than Glycyrrihiza glabra(GG) extract. LMG extract multiplication restraining effects were 60% that of ethanol at 3 mg/mL extract also displayed tumor suppressive effects in mice injected with S-180 cells. The growth-inhibition rates against tumor cells were 56% for LMG and 37% for GG. When LMG was added to human mast cells, the Intensity of RT-PCR products using primers($FC{\varepsilon}RI\;c-kit$) decreased. significantly compared with that of control. These results suggest that Lentinus edodes Mushroom-Cultured Glycyrrhiza glabra has an anti-proliferation effects against cancer cell lines(Hep3B, MCF-7 and HeLa) and S-180 tumors and will be also beneficial in treating allergic reactions.
Ji-Jang-Soo (JJS) is known to have a detoxification effect. However, it is still unclear how JJS has these effects in experimental models. In this study, we investigated the effect of JJS on the viability of cells and production of cytokines in human T-cell line, MOLT-4 cells, and human mast cell line, HMC-1 cells. The MOLT-4 cells were cultured for 24 h in the presence or absence of JJS. As the result, JJS (1/100 dilution) significantly increased the cell viability about 78% (P < 0.05) and also increased the interleukin (IL)-2, and interferon $(IFN)-{\gamma}$ production compared with media control at 24 h. But had no effect on IL-4 production. Hypoxia mimic compound, desferroxamine (DFX) decreased the immune cell viability. Cell viability decreased by DFX was increased by JJS. In conclusion, these data indicate that JJS may have an immune-enhancing effect.
Activating and inhibitory cell surface receptors play important roles in regulation of immune responses. Recent progress has demonstrated that many inhibitory receptors pair with activating, as well as inhibitory, isoforms, both of whose genes are located in small clusters on a chromosome. We and others identified paired activating and inhibitory immunoglobulin-like receptors, designated myeloid-associated immunoglobulin-like receptors (MAIR) (CD300). MAIR is a multigene family consisting of nine genes on a small segment of mouse chromosome 11. MAIR family receptors are preferentially expressed on myeloid cells, including macrophages, dendritic cells, granulocytes, and bone-marrow-derived cultured mast cells, and a subset of B cells and regulate activation of these cells. Thus, MAIR plays an important role in innate immunity mediated by myeloid cells.
Mast cells and basophils perform important functions as pivotal effector cells in IgE-mediated allergic reactions. KU812F cells, a human basophilic cell line isolated originally from chronic myelocytic leukemia, express a high affinity receptor of IgE, $Fc{\varepsilon}RI$. Kaempferol was extracted and isolated from a methanolic extract of flavonoid-rich Nelumbo nucifera stamens. In the present study, the inhibitory effects of kaempferol on $Fc{\varepsilon}RI$ expression in human basophilic KU812F cells was examined. Flow cytometric analysis revealed that $Fc{\varepsilon}RI$ expression on the cell surface was suppressed in a concentration-dependent manner when the cells were cultured with kaempferol. Moreover, RT-PCR analysis showed that the mRNA levels for $Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}-\;and\;{\gamma}$-chains were reduced as the result of kaempferol treatment in a concentration-dependent manner. Kaempferol showed its suppressive effects on intracellular $Ca^{2+}$ concentration and histamine release from anti-$Fc{\varepsilon}RI$${\alpha}$-chain antibody-stimulated cells in a concentration-dependent manner. These observations indicate that kaempferol may exert antiallergic effect via down regulation of $Fc{\varepsilon}RI$ expression and degranulation.
Bibimbab (mixed rice) is a traditional Korean one-dish meal. This study was carried out to investigate the anti-inflammatory and antioxidative effects of raw and seasoned ingredients used in Bibimbab (Cucurbita moschata P., Platycodon grandiflorum A., Vigna radiata L., Porphyra yezonensis udea, Allium ampeloprasum L., Pterdium aguilinum, Raphanus sativus). Human mast cells (HMC-1) were pretreated with 70% ethanol extracts of Bibimbab and further cultured for an appropriate time after the addition of phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and calcium ionophore A23187. Cell viability was determined by an MTT assay. None of the ingredients showed cytotoxic effects at a concentration of 1.0 ${\mu}g/ml$. Anti-inflammatory effects were analyzed at 0.01, 0.1, and 1.0 mg/ml concentrations of the raw, seasoned ingredients of PMA. A23187 stimulated HMC-1. Among the various ingredients, seasoned A. ampeloprasum L. extract showed the highest inhibition of TNF-${\alpha}$ and IL-6 secretion (90% and 93%, respectively) at a concentration of 1.0 mg/ml. The R. sativus extract showed the highest inhibition (85%) of IL-8 secretion. DPPH analysis of the antioxidation properties of the ingredients showed that raw and seasoned A. ampeloprasum extracts exhibited the highest DPPH free radical scavenging activity (67.50 and 73.65%, respectively). These results suggest that seasoned ingredients used in Bibimbab have lower anti-inflammatory effects in relation to TNF-${\alpha}$ and IL-6 secretion than raw ingredients in PMA- and A23187-treated HMC-1. In addition, the seasoned ingredients showed a tendency to increase antioxidative activity. Therefore, the ingredients used in Bibimbab have potential as anti-inflammatory and antioxidation agents.
Sin, Sang-Min;Cha, Jae-Young;Ha, Se-Eun;Sim, Sun-Mi;Kim, Hyoung-Do;Lee, Jung-Sup;Park, Jong-Kun
Journal of Life Science
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v.19
no.1
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pp.101-110
/
2009
The regulation of gene expression plays an important role in cell cycle controls. In this study, a novel $mas2^+$ (mitosis associated protein) gene, a homolog of human SMARCAD1 was isolated and characterized from a fission yeast Schizosaccharomyces pombe (S. pombe) using gene-specific polymerase chain reaction. The isolated gene contained a complete open reading frame capable of encoding 922 amino acid residues with a typical promoter, as judged by nucleotide sequence analysis. It was also found that an SNF2 domain is located, which is involved in the chromosome remodeling. The quantitative analysis of the $mas2^+$ transcript against $adh1^+$ showed that the expression level of $mas2^+$ is high before septum formation in S. pombe. When $mas2^+$ null mutant cells were grown at 27 and $35^{\circ}C$, the cytokinesis of $mas2^+$ null mutant was greatly delayed and a large number of multi-septate and mis-segregated cells were produced. In addition, the number of multi-septate cells significantly increased. When cells were cultured in YES rich medium to increase proliferation, the abnormal phenotypes $mas2^+$ null mutant dramatically increased. These phenotypes could be rescued by an over-expression of the mast gene. The Mas2 protein localized in the nuclei of S. pombe, as evidenced by Mas2-EGFP signals. These results suggest that the $mas2^+$ is homologous to human SMARCAD1 gene and involved in septum formation and chromosome remodeling control.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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