Endostatin, a proteolytic fragment of collagen XVIII, is a potent inhibitor of angiogenesis and the growth of several primary tumors. However, the opinions on the activity of endostatin derivatives deleted N- or C- terminal are still controversial. In this regard, we produced mouse endostatin and its derivatives in the prokaryotic system, and studied their anti-tumor activity. The [$^3H$]-thymidine incorporation assay demonstrated that N-terminal deleted mouse endostatin, and a C- and N-terminal deleted mutant, effectively inhibited the proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). The biological activity of endostatin was also shown by its in vivo anti-angiogenic ability on the chorioallantoic membrane (CAM) of a chick embryo. Treatment of $200\;{\mu}g$ of mouse endostatin, or N-terminal deleted mouse endostatin, inhibited capillary formation of CAM 45 to 71%, which is comparative to a 80% effect of positive control, $1\;{\mu}g$ of retinoic acid. An in vivo mouse tumor growth assay showed that N-terminal deleted mouse endostatin, and the N-/C-terminal deleted mutant, significantly repressed the growth of B16F10 melanoma cells in mice as did the full-length mouse endostatin. According to these results, N-and N-/C-terminal deleted mouse endostatins are the potent inhibitors of tumor growth and angiogenesis.
Hantaan vims production, using human immortalized retina cell (PER. C6), was investigated to develop an inactivated virus vaccine. To infect Hantaan virus into PER. C6, two infection methods (medium-to-cell and cell-to-cell) were tried, and IFA results showed that the cell-to-cell infection method was very useful for producing Hantaan virus-infected PER, C6. Hantaan virus production was significantly affected by the growth rate of PER. C6 and the content of FBS in medium. Higher specific growth rate of infected PER. C6 and lower FBS content induced higher production of Hantaan virus. The inactivated human cell-culture vaccines with various EIA titers were prepared, their antibody responses were compared with those of inactivated suckling mouse brain vaccines ($Hantavax^처리불가$). and the result showed their immunogenicities were slightly higher than those of inactivated suckling mouse vaccines. Therefore, this study shows the possibility of the development of Hantaan virus vaccine from a human cell culture.
Galectin-3 plays an important role in cell development, differentiation and cancer metastasis, including cell-cell/extracellular matrix (ECM) interactions and is supposed to have an effect of apoptosis on T-cells in thymic clonal selection. In this study, to know the effect of galectin-3 on thymocyte development, we used recombinant human galectin-3 (rHgal-3) from Escherichia coli, JM105, which was inserted with human gal-3 gene-transformed plasmid vector (prGal-3) to express human galectin-3. Expressed rHgal-3 was confirmed by western blot using the culture supernant of hybridoma (M3/38) producing monoclonal antibody to human galectin-3. Sepharose gel affinity chromatography was used to purify the expressed rHgal-3. Thymocytes and hepatocytes from 6-week-old male BALB/c mice were incubated with rHgal-3 and showed marked increase of apoptotic population on analysis using flow cytometry with 7-AAD in a dosedependent manner. However, rHgal-3 failed to induce apoptosis on hepatocytes. Interestingly, this apoptotic effect was not inhibited by lactose, a specific lectin domain inhibitor. From these results, we concluded that extrinsic -3 induces apoptosis on mouse thymocytes, and galectin-3 may have an apoptotic effect on T-cells in thymic clonal selection.
The mammalian ovary has a large number of primordial and preantral follicles, which are a potential source of oocytes for the in vitro mass production of embryos. Several in vitro culture systems have been developed to support the growth and development of oocytes from mouse preantral follicles. Under the appropriate condition, meiotically incompetent oocytes from preantral follicles can grow to final size and complete nuclear maturation in vitro. Furthermore, the successful production of live young from in vitro grown and matured oocytes demonstrates that oocytes from preantral follicles are able to acquire full developmental capacity in vitro. However, the efficiency of in vitro production of embryos from mouse preantral follicles is still low. In farm animals as well as human, the growth of oocyte from preantral follicle to the meiotic competence stage has yet to be demonstrate. Therefore, further studies to improve the culture condition or to develope new culture system should be needed in the future. In addition, the visible progress in the establishment of the in vitro culture system for preantral follicles of farm animals and human could help to enlarge the populations of valuable agricultural, phamaceutical product-producing, and endangered animals, and to rescue the oocytes of women about to undergo clinical procedures that jeopardize oocytes.
Kim, Jin;Ryu, Bokyeong;Kim, Ukjin;Kim, Chang-Hwan;Hur, Gyeung-Haeng;Kim, C-Yoon;Park, Jae-Hak
BMB Reports
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제53권9호
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pp.466-471
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2020
Several humanized mouse models are being used to study humanspecific immune responses and diseases. However, the pivotal needs of fetal tissues for the humanized mice model have been huddled because of the demand for ethical and medical approval. Thus, we have verified the hematopoietic and immunomodulatory function of HepaRG and developed a new and easy humanized mouse model to replace the use of fetal liver tissue. HepaRG co-transplanted Hu-NSG mice significantly increased CD45+ lymphocytes and CD19+ B cells and CD3+ T cells than normal Hu-NSG, suggesting enhanced reconstitution of the human immune system. These results have improved the applicability of humanized mice by developing new models easily accessible.
Park, Jeong-A;Kim, Young-Eun;Seok, Hyun-Jeong;Park, Woo-Youn;Kwon, Hyung-Joo;Lee, Young-Hee
BMB Reports
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제44권3호
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pp.176-181
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2011
Inhibiting histone deacetylase (HDAC) activity modulates the epigenetic status of cells, resulting in an alteration of gene expression and cellular function. Here, we investigated the effects of HDAC inhibitors on mouse embryonic stem (ES) cells. The HDAC inhibitors trichostatin A, suberoylanilide hydroxamic acid, sodium butyrate, and valproic acid induced early differentiation of mouse ES cells and triggered induction of heat-shock protein (HSP)70. In contrast, class III HDAC inhibitors failed to induce differentiation or HSP70 expression. Transcriptional upregulation of HSP70 was confirmed by mRNA expression analysis, an inhibitor study, and chromatin immunoprecipitation. HSP70 induction was dependent on the SAPK/JNK, p38, and PI3K/Akt pathways. Differentiation and induction of HSP70 by a subset of HDAC inhibitors was also examined in human ES cells, which suggests that the phenomenon generally occurs in ES cells. A better understanding of the effects of HDAC inhibitors may give more insight into their application in stem cell biology.
Praecoxin A, an ellagitannin, purified from Alnus hirsuta var.microphlla was evaluated on the antitumor activity. Praecoxin A had the significant cytotoxicity to s ix tumor cell lines: human chronic myelogenous leukemia K-562, human promyelocytic leukemia HL-60, mouse leukemia P388, mouse lymphocytic leukemia L-1210, sarcoma-l8O, mouse lymphoma L5178Y except L-1210. And the most sensitive cell line was K-562 ($ED_{50}=2.43{\mu}g/ml$). The $ED_{50} of praecoxin A against HL-60, P388, L-1210, sarcoma7l8O and L5178Y were 6.28, 8.66, 10.00, 7.01, $9.32{\mu}g/ml$, respectively. Praecoxin A showed the increasing effect in life span by 36.8% on the 1st day after treatment of 10mg/kg in mice bearing sarcoma-180 tumor cells (ascitic form) via NCI (National Cancer Institute, U.S.A.) protocol in vivo assay. As a result, praecoxin A is considered to show the antitumor activity.
Water extracts obtained from cultured mountain ginseng (CMG) were evaluated for their ability to stimulate immune cells and inhibit cancer cell proliferation. The lymphocyte subpopulation in mouse splenocytes in vivo was significantly increased by the administration of the CMG extract (27.4 mg/mouse). Interleukin-2 and ${\gamma}$-interferon in the mice serum increased up to 30% in CMG extract-treated mice. At a concentration of 1.37 mg/mL, nitric oxide increased up to 400% in the macrophage cell line treated with CMG extract. The CMG extract significantly retarded the proliferation of human acute promyelocytic (HL60), human histiocytic (U937), and mouse lymphocytic (L1210) leukemia cell lines in vitro at concentrations over 2.74-13.7 mg/mL. In addition, CMG extract treatments (1.37 mg/mL and 2.74 mg/mL) lead to the increased expression of the p53 gene and protein in cultured U937 leukemia cell lines. These results indicate that water extracts of CMG are capable of both immune cell stimulation and cancer cell growth inhibition.
목적 : 본 연구는 핵자기공명 분광기를 개조한 미세영상 기법을 이용하여, 동물실험에 주류를 이루는 mouse를 대상으로, 0.1 mm 이내의 초고해상도 자기공명영상을 5분 정도 시간 안에 획득할 수 있는 방법을 개발하고자 하였다. 대상 및 방법 : 사용된 mouse는 C57BL/6로서 무게 50 그램 이내의 mouse를 사용하였다. 본 연구에 활용된 초전도 자석은 구경 89 mm, 4.7 T의 자기장 세기를 가진 수직형 자석이며, 사용된 샘플 코일의 직경은 30 mm 이고, 사용된 펄스시퀀스는 fast spin echo (FSE) 및 gradient echo (GE) 기법들이다. 결과 : 최적의 자기공명영상 파라미터를 확보하면서 2차원 영상으로서 수소밀도 및 T2 강조 영상을 획득하였다. 영상으로부터 mouse 뇌의 미세부분까지 상세히 해부학적 구조를 확인할 수 있었고, 또한 입체적인 정보를 획득하기 위하여 3D 영상도 부가적으로 획득하였다. 조영제를 이용한 dynamic contrast 연구에 3D 영상이 매우 유용하였다. 결론 : 본 연구를 통하여 mouse 뇌에 대한 고해상도 자기공명영상 획득을 위한 최적의 파라미터를 확보할 수 있었고, 또한 성공적인 자기공명영상도 획득하였다. 즉, 사람이나 다른 소동물뇌의 경우와 같이 mouse 뇌 조직의 다양한 부위의 미세부분을 확인할 수 있는 충분한 고해상도의 영상을 획득하였다. 최근 국내에서 mouse를 이용한 자기공명영상 연구가 시작되었으나 아직 초기단계라고 평가할 수 있고, mouse는 다른 동물에 비하여 취급/관리하기 쉬우므로 향후 mouse를 이용한 뇌 연구가 활성화 될 것으로 사료된다.
본 연구에서는 교통사고나 뇌졸중 등에 의해 상지의 장애를 가지는 장애인을 대상으로 하여, 인터넷의 브라우저와 같은 소프트웨어를 사용 할 수 있도록 하는 컴퓨터 인터페이스를 구현하는 것을 목적으로 한다. 이 인터페이스는 커서를 제어하기 위해 머리 움직임의 정보를 이용한다. 실제 시스템은 머리의 수평, 수직 각속도를 검출하여 컴퓨터로 전송하는 하드웨어부분과, 전송 받은 신호를 처리하여 마우스의 움직임과 클릭신호로 변환하는 소프트웨어 부분으로 구성하였다. 클릭신호는 순간적인 끄덕임으로 정의하였으며 특히, 인공신경망이 각 사용자별 클릭 패턴을 학습하여 사용자 친화적인 인터페이스를 제공하도록 하였다. 구현된 시스템의 성능을 클릭의 인식률, 커서의 이동제어오차, 이동출현하는 목표박스의 단위시간당 클릭율의 세가지 항목으로 평가하였다. 또한. 일반적으로 사용되는 광마우스와 본 연구에서 개발한 자이로마우스를 각각 이 실험에 사용하여, 양자간의 차이를 비교하였다. 개발된 자이로마우스에서 클릭의 인식률은 평균 93%였고, 커서의 수평수직 이동 제어오차는 광마우스의 1.4∼1.5배였다. 랜덤위치에 출현하는 50픽셀의 목표박스의 클릭률은 광마우스의 40% (30 클릭/분)의 성능을 보였으며, 시행횟수에 따라 증가하여 l회차의 35%에서 3회차에는 44%로 단조증가하는 경향을 보였다. 제안된 시스템은, 장애인에게 사회와 의사소통 할 수 있는 새로운 가능성을 제시할 것이 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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