In this study, we prepared CheonJeongKiBo-Dan(7 oriental medicinal plants, 7OMP: Astragalus Membranaceus root, Panax Ginseng root, Glycyrrhiza Glabra (licorice) root, Schizandra Chinensis fruit, Polygonatum Odoratum, Rehmannia Glutinosa root, Paeonia Albiflora root) by extracting them in one reactor and studied its efficacies on skin. UV irradiation has been suggested as a major cause of photoaging in skin. In order to investigate protective effects against UV-B induced cellular damage, 7OMP was extracted with 70% ethanol and dissolved in DMSO. The protective effect was detected by MTT assay, reactive oxygen species (ROS) generation, phosphorylation of ATR and p53 in human dermal fibroblast cell system after UV-B irradiation. 7OMP reduced UV-B-induced cellular damage in HDFs cells, and inhibited ROS generation. UV-B-induced toxicity accompanying ROS production and the resultant DNA damage are responsible for activation of ATR, p53 and Bad. In this study, 7OMP hampered phosphorylations of ATR and p53 in human dermal fibroblasts. Therefore, 7OMP may be protective against UV-induced skin photoaging.
Human periodontal ligament fibroblasts (hPDLF) are very important for curing the periodontal tissue because they can be differentiated into various cells. A tissue engineering approach using a cell-scaffold is essential for comprehending today's periodontal tissue regeneration procedure. This study examined the possibility of using an acellular dermal matrix as a scaffold for human periodontalligament fibroblast (hPDLF). The hPDLF was isolated from the middle third of the root of periodontally healthy teeth extracted for orthodontic reasons. The cells were cultured in a medium containing Dulbecco's modified Eagle medium supplemented with 10% fetal bovine serum at $37^{\circ}C$ in humidified air with 5% $CO_2$. The acellular dermal matrix(ADM) was provided by the US tissue banks(USA). Second passage cells were used in this study. The hPDLF cells were cultured with the acellular dermal matrix for 2 days, and the dermal matrix cultured by the hPDLF was transferred to a new petri dish and used as the experimental group. The control group was cultured without the acellular dermal matrix, The control and experimental cells were cultured for six weeks. The hPDLF cultured on the acellular dermal matrix was observed by Transmission Electron microscopy (TEM). Electron micrography shows that the hPDLF was proliferated on the acellular dermal matrix. This study suggests that the acellular dermal matrix can be used as a scaffold for hPDLF.
잎새버섯(Grifola frondosa HB0071)이 생산하는 세포외 다당체인 GF-glucan이 사람섬유아세포에서 자외선(UVA)조사 시 증가되는 MMP-1 발현에 미치는 영향을 조사하였다. 자외선으로부터 조사된 섬유아세포에 GF-glucan을 처리한 농도에 따라 MMP-1 발현이 억제되었으며, RT-PCR를 이용해 세포내 MMP-1 mRNA 발현 또한 감소하는 것으로 나타났다 즉, 최대 GF-glucan $0.5\%$를 처리했을 때 $54.4\%$의 MMP-1 발현을 억제하였다. 결과적으로, 잎새버섯 HB0071로부터 생산된 GF-glucan은 피부노화와 관련된 extracellular matrix (ECM) 조직에 손상을 주는 MMP-1의 활성을 억제하여 자외선으로부터 손상된 피부의 광노화로부터 보호해주는 것으로 밝혀졌다.
The radiation-induced apoptosis was studied for two human cancer cell lines (KB cells, RPMI 2650 cells) and the human gingival fibroblast cell line (HGF-1 cells). The single irradiation of 2, 10, 20Gy was done with 241.5 cGylmin dose rate using the /sup 137/Cs MK cell irradiator. The cells were stained with propidium iodide and examined under the fluoro-microscope and assayed with the flow cytometry a day after irradiation. Also, the LDH assay was done to determine the amount of necrotic cells. The obtained results were as follows: 1. On the fluoro-microscope, many fragmented nuclei were detected in the KB, RPMI 2650, and HGF-1 cells after irradiation. 2. On the DNA content histogram obtained from the flow cytometry, the percentages of the pre-Gl peak of the control and 2, 10 and 20Gy irradiation group were 4.5, 55.0, 52.3, and 66.6% on KB cells, 2.7, 3.3, 31.8, and 32.6% on RPMI 2650 cells and 2.8, 21.8, 30.4, and 40.2% on HGF-1 cells respectively. 3. The number of Gl-stage cells was abruptly decreased after 2Gy irradiation on KB cells and 10Gy irradiation on RPMI 2650 cells, But there was a slight decrease without regard to irradiation dose on HGF-1 cells. 4. There was no significantly different absorbance in extracellular LDH assay along the experimental cell lines.
CALLA 항원에 대한 단일클론 항체는 백혈병의 진단이나 치료에 대한 활용가능성을 잠재하고 있기 때문에 구미, 일본 등지에서는 이에 대한 연구가 활발하다. 이 점에 유의하여 본 연구자들은 CALLA에대한 새로운 단일클론항체 KP-22를 개발하고, 이 단일클론항체를 이용 CALLA의 분포를 여러 세포주에 대하여 조사한 결과 common ALL, Burkitt's lymphoma, T-ALL 세포주는 현저한 CALLA양성 반응을 보였으나 사람의 섬유아세포 계역을 제외한 모든 비백혈병성 암세포주 및 myelocytic leukemia 세포주들은 음성이었다. 막 단백질을 125I 방사능 표지한 후 KP-22를 이용, 면역 침전법으로 백혈병세포주와 사람의 정상 섬유아세포에서 CALLA를 정제하여 전기영동한 결과 각각 분자량이 약 95Kd 및 100Kd인 단일 band로 확인되었으나 이들의 peptide mapping 양상은 같았으므로 분자량에서의 미세한 차이는 posttranslational modification 과정에서 첨가되는 sialic acid에 기인 하는 것으로 사료된다.
The periodontal ligament (PDL) is the connective tissue between tooth root and alveolar bone containing mesenchymal stem cells (MSC). It has been suggested that human periodontal ligament stem cells (hPDLSCs) differentiate into osteo/cementoblast and ligament progenitor cells. The periodontitis is a representative oral disease where the PDL tissue is collapsed, and regeneration of this tissue is important in periodontitis therapy. Fibroblast growth factor-2 (FGF-2) stimulates proliferation and differentiation of fibroblastic MSCs into various cell lineages. We evaluated the dose efficacy of FGF-2 for cytodifferentiation of hPDLSCs into ligament progenitor. The fibrous morphology was highly stimulated even at low FGF-2 concentrations, and the expression of teno/ligamentogenic markers, scleraxis and tenomodulin in hPDLSCs increased in a dose dependent manner of FGF-2. In contrast, expression of the osteo/cementogenic markers decreased, suggesting that FGF-2 might induce and maintain the ligamentogenic potential of hPDLSCs. Although the stimulation of tenocytic maturation by $TGF-{\beta}1$ was diminished by FGF-2, the inhibition of the expression of early ligamentogenic marker by $TGF-{\beta}1$ was redeemed by FGF-2 treatment. The stimulating effect of BMPs on osteo/cementogenesis was apparently suppressed by FGF-2. These results indicate that FGF-2 predominantly differentiates the hPDLSCs into teno/ligamentogenesis, and has an antagonistic effect on the hard tissue differentiation induced by BMP-2 and BMP-4.
Jo, Wol Soon;Yang, Kwang Mo;Park, Hee Sung;Kim, Gi Yong;Nam, Byung Hyouk;Jeong, Min Ho;Choi, Yoo Jin
Toxicological Research
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제28권4호
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pp.241-248
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2012
Exposure of cells to ultraviolet B (UVB) radiation can induce production of free radicals and reactive oxygen species (ROS), which damage cellular components. In addition, these agents can stimulate the expression of matrix metalloproteinase (MMP) and decrease collagen synthesis in human skin cells. In this study, we examined the anti-photoaging effects of extracts of Tetraselmis suecica (W-TS). W-TS showed the strongest scavenging activity against 2,2-difenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and peroxyl radicals, followed by superoxide anions from the xanthine/xanthine oxidase system. We observed that the levels of both intracellular ROS and lipid peroxidation significantly increased in UVB-irradiated human skin fibroblast cells. Furthermore, the activities of enzymatic antioxidants (e.g., superoxide dismutase) and the levels of non-enzymatic antioxidants (e.g., glutathione) significantly decreased in cells. However, W-TS pretreatment, at the maximum tested concentration, significantly decreased intracellular ROS and malondialdehyde (MDA) levels, and increased superoxide dismutase and glutathione levels in the cells. At this same concentration, W-TS did not show cytotoxicity. Type 1 procollagen and MMP-1 released were quantified using RT-PCR techniques. The results showed that W-TS protected type 1 procollagen against UVB-induced depletion in fibroblast cells in a dose-dependent manner via inhibition of UVB-induced MMP-1. Taken together, the results of the study suggest that W-TS effectively inhibits UVB-induced photoaging in skin fibroblasts by its strong anti-oxidant ability.
본 연구에서는 비타민 C, silicon, 철분을 농도별로 피부섬유아 세포에 처리 후 콜라겐 합성 효소인 PH, LH의 mRNA와 protein 발현 및 분해 효소인 MMP-1와 저해제인 TIMP-1의 mRNA, protein 발현의 변화를 대조군과 비교 분석하였으며 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) 피부 섬유아세포에서 비타민 C의 처리는 콜라겐 합성 효소인 PH의 mRNA 발현을 대조군에 비해 현저하게 증가시켰고 이와 병행하여, PH의 protein 발현도 대조군에 비해 유의적으로 증가하였다. 그러나 다른 콜라겐 합성 효소인 LH의 mRNA 발현에는 영향을 미치지 않았으나 protein의 발현을 증가시켰다. 또한, 콜라겐 분해 효소인 MMP-1의 mRNA 발현은 대조군에 비해 유의적으로 증가시켰으나 protein 발현에서는 대조군과 차이가 없었다. 2) 피부 섬유아세포에서 silicon의 혈중 내 농도 처리는 LH의 mRNA 발현의 현저한 증가와 더불어 protein 발현에도 긍정적인 영향을 미치는 것으로 나타났다. 콜라겐 분해 효소인 MMP-1과 저해제인 TIMP-1의 단백질 발현을 대조군에 비해 증가시켰다. 3) 피부 섬유아세포에서 철분의 혈중 내 농도 처리는 콜라겐 합성 및 분해 관련 효소의 mRNA 및 protein 발현에 영향을 미치지 않았다. 결론적으로, 피부섬유아세포에서 비타민 C 및 silicon의 처리는 콜라겐의 posttranslational modification 관련 효소의 mRNA의 발현 및 단백질의 발현을 증가시켜 궁극적으로 콜라겐 합성에 긍정적인 영향을 나타내었다.
목적: 이 연구의 목적은 표고 버섯 추출물의 치주 병원체에 대한 항균 활성과 인간 치은 섬유아세포에 대한 세포 독성을 조사하는 것입니다. 연구 재료 및 방법: 표고버섯을 물과 아세톤에 닮근 후, 상등액을 건조하여 추출물을 채취하였다. 추출물에 대한 치주 병원체의 감수성을 조사하였다. 인간 치은 섬유아세포에 추출물을 처리하고 CCK-8 용액을 이용하여 세포 생존율을 측정하였다. 결과: 표고버섯 물추출물은 2.5 mg/ml에서 치주병원체의 증식을 유의하게 감소시켰다(P < 0.05). 아세톤 추출물은 0.32 mg/ml에서 Porphyromonas gingivalis와 Tannerella forsythia의 성장을 유의하게 억제하였고, 0.64 mg/ml에서 Treponema denticola의 성장을 유의하게 억제하였다(P < 0.05). 추출물의 세포독성은 2.5 mg/ml의 농도에서 나타났으며, 1.25 mg/ml 농도의 추출물이 4시간 후부터 세포 생존률을 감소시키는 것으로 나타났다. 결론: 표고버섯 추출물은 치주염 유발 세균에 대한 항균 활성과 염증 완화 효과를 보였다. 따라서 추출물은 치주질환 예방 및 치료에 대한 후보물질이 될 수 있다.
It has been established that a graft of fibroblasts is able to improve wound healing. However, there has been no research on the effect of a graft of bone marrow stromal cells on wound healing. The wound healing process requires cell proliferation and production of extracellular matrix and various growth factors. The purpose of this study was to compare the abilities of human fibroblasts and bone marrow stromal cells, which contains mesenchymal stem cells, to proliferate and to produce collagen. Human bone marrow stromal cells and fibroblasts were isolated from bone marrow and dermis of the same patients and grown in culture respectively. Cell proliferation and production of type I collagen by human bone marrow stromal cells and dermal fibroblasts were examined by MTT method and by ELISA of cell culture media on day 1, 3, and 5 days post-incubating. The human bone marrow stromal cells showed 11-17% higher cell proliferation than fibroblasts at each time interval. The levels of type I collagen in the human bone marrow stromal cell group was also significantly higher than those in the fibroblast group. The results indicate that the grafts of human bone marrow stromal cells can show more promising effect than that of fibroblasts for healing of chronic wounds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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