Recently, the gene expression data, product of high-throughput technology, appeared in earnest and the studies related with it (so-called bioinformatics) occupied an important position in the field of biological and medical research. The microarray is a revolutionary technology which enables us to monitor several thousands of genes simultaneously and thus to gain an insight into the phenomena in the human body (e.g. the mechanism of cancer progression) at the molecular level. To obtain useful information from such gene expression measurements, it is essential to analyze the data with appropriate techniques. However the high-dimensionality of the data can bring about some problems such as curse of dimensionality and singularity problem of matrix computation, and hence makes it difficult to apply conventional data analysis methods. Therefore, the development of method which can effectively treat the data becomes a challenging issue in the field of computational biology. This research focuses on the gene selection and classification for cancer subtype discrimination based on gene expression (microarray) data.
The maintenance of peripheral immune tolerance and prevention of chronic inflammation and autoimmune disease require $CD4^{+}CD25^{+}$ T cells (regulatory T cells). The transcription factor Foxp3 is essential for the development of functional, regulatory T cells, which plays a prominent role in self-tolerance. Retroviral vectors can confer high level of gene transfer and transgene expression in a variety of cell types. Here we observed that following retroviral vector-mediated gene transfer of Foxp3, transductional Foxp3 expression was increased in the liver, lung, brain, heart, muscle, spinal cord, kidney and spleen. One day after vector administration, high levels of transgene and gene expression were observed in liver and lung. At 2 days after injection, transductional Foxp3 expression level was increased in brain, heart, muscle and spinal cord, but kidney and spleen exhibited a consistent low level. This finding was inconsistent with the increase in both $CD4^{+}CD25^{+}$ T cell and $CD4^{+}Foxp3^{+}$ T cell frequencies observed in peripheral immune cells by fluorescence-activated cell-sorting (FACS) analysis. Retroviral vector-mediated gene transfer of Foxp3 did not lead to increased numbers of $CD4^{+}CD25^{+}$ T cell and $CD4^{+}Foxp3^{+}$ T cell. These results demonstrate the level and duration of transductional Foxp3 gene expression in various tissues. A better understanding of Foxp3 regulation can be useful in dissecting the cause of regulatory T cells dysfunction in several autoimmune diseases and raise the possibility of enhancing suppressive functions of regulatory T cells for therapeutic purposes.
Fat mass and obesity associated gene (FTO) plays an important role in appetite control and energy consumption in human and mice. In order to examine FTO expression influence on fat deposition in Suzhong pigs, FTO mRNA expression was detected in 16 tissues by RT-PCR, FTO protein expression was detected in 5 tissues by western blot, and association of FTO polymorphism with meat quality traits was analyzed in Suzhong populations with 714 records. RT-PCR results revealed that FTO mRNA was expressed in all sixteen tissues with significant differences (p<0.05), expression in backfat was significantly higher than that of any other tissue (p<0.05), and expression in longissimus dorsi muscle had the second highest significance level (p<0.05). Western blot results demonstrated that FTO protein was highly expressed in backfat and longissimus dorsi muscle. Furthermore, FTO mRNA and protein expression in tissues of high-fat pigs was significantly higher than that of low-fat pigs (p<0.05), suggesting FTO expression had advantageous effects on fat deposition. FTO polymorphism results evidenced that at A227G locus, G allele seemed to have advantageous effects on fat deposition, indicating it could be a significant candidate gene for improving pork quality in Suzhong pigs.
Ding, Yin-Lu;Wang, Qi-San;Zhao, Wei-Min;Xiang, Lei
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제13권8호
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pp.4001-4005
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2012
Backgrouds: The hedgehog (Hh) signaling pathway is composed of patched (PTCH) and smoothened (SMO), two transmembrane proteins, and downstream glioma-associated oncogene homolog (Gli) transcription factors. Hh signaling plays a pathological role in the occurrence and development of various cancers. Methods: To investigate the expression of SMO protein in colon cancer and its association with clinicopathological parameters and postoperative liver metastasis, immunohistochemistry was performed with paraffin-embedded specimens of 96 cases. Relationships between SMO protein expression and clinicopathological parameters, postoperative liver metastasis were analyzed. Results: IHC examination showed that SMO protein expression was significantly increased in colon cancer tissues compared to normal colon tissues (P = 0.042), positively related to lymph node metastases (P = 0.018) and higher T stages (P = 0.026). Postoperative live metastasis-free survival was significantly longer in the low SMO expression group than in those with high SMO expression ($48.7{\pm}8.02$ months vs $28.0{\pm}6.86$ months, P=0.036). Multivariate analysis showed SMO expression level to be an independent prognostic factor for postoperative live metastasis-free survival (95% confidence interval [CI] =1.46-2.82, P = 0.008). Conclusions: Our results suggest that in patients with colon cancer, the SMO expression level is an independent biomarker for postoperative liver metastasis, and SMO might play an important role in colon cancer progression.
KANG MOONKYUNG;KIM SEON-YOUNG;LEE SUKYUNG;LEE YOUNG-KWAN;LEE JAEHO;SHIN HYUN-SEOCK;KIM YEON-SOO
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권3호
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pp.544-550
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2005
To develop a highly efficient mammalian expression vector, a series of vectors were constructed based on the murine cytomegalovirus (MCMV) immediate-early (IE) promoter and human ${\beta}$-globin second intron. The resulting MCMV promoter was several-fold stronger than the HCMV promoter in various mammalian cell lines, such as the NIH3T3, Neuro-2a, 293T, and HT1080 cell lines, and was only slightly weaker than the HCMV promoter in HeLa and CHO cells. The inclusion of the human ${\beta}$-globin second intron behind the MCMV promoter or HCMV promoter markedly enhanced the promoter activity in various mammalian cell lines, and the resultant MCMV/Glo-I expression system was stronger than the HCMV promoter from 4.7- to 11.2-fold in every cell line tested. Also, the MCMV/Glo-I promoter induced a higher level of the VSV-G protein in a transiently transfected 293T cell line, which is useful for the production of recombinant retrovirus and lentivirus vectors.
Purpose: Puromycin aminonucleoside (PAN) specifically injures podocytes, leading to foot process effacement, actin cytoskeleton disorganization, and abnormal distribution of slit diaphragm proteins. p130Cas is a docking protein connecting F-actin fibers to the glomerular basement membrane (GBM) and adapter proteins in glomerular epithelial cells (GEpCs; podocytes). We investigated the changes in the p130Cas expression level in the PAN-induced pathological changes of podocytes in vitro. Methods: We observed changes in the p130Cas expression in cultured rat GEpCs and mouse podocytes treated with various concentrations of PAN and antioxidants, including probucol, epigallocatechin gallate (EGCG), and vitamin C. The changes in the p130Cas expression level were analyzed using confocal immunofluorescence imaging, Western blotting, and polymerase chain reaction. Results: In the immunofluorescence study, p130Cas showed a diffuse cytoplasmic distribution with accumulation at distinct sites visible as short stripes and colocalized with P-cadherin. The fluorescences of the p130Cas protein were internalized and became granular by PAN administration in a dose-dependent manner, which had been restored by antioxidants, EGCG and vitamin C. PAN also decreased the protein and mRNA expression levels of p130Cas at high doses and in a longer exposed duration, which had been also reversed by antioxidants. Conclusion: These findings suggest that PAN modulates the quantitative and distributional changes of podocyte p130Cas through oxidative stress resulting in podocyte dysfunction.
Park, Hye-Jin;Lee, Kwang-Sik;Cho, Eun-Sook;Yun, Eun-Young;Kang, Seok-Woo;Kim, Keun-Young;Sohn, Hung-Dae;Jin, Byung-Rae
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제1권1호
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pp.29-33
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2000
We cloned and characterized a very late expression factor 1 gene, vlf-1, which regulates the level of very late gene transcripts, from Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) K1 strain. The 1,140 bp vlf-1 has an open reading frame of 379 amino acid and a MW of 44 kDa. The vlf-1 nucleotide sequence of BmNPV-Kl showed high homology with Autographa californica nuclear polyhedrosis virus and BmNPV T3 strain so far known, and its deduced amino acid residues were identical to those of BmNPV T3. The location of vlf-1 in the BmNPV-Kl genome was confirmed by Southern blot analysis and its expression patterns at the transcriptional level were confirmed by Northern hybridization analysis.
Recent studies revealed that histone proteins are involved in innate immune responses during pathogen invasion as well as DNA packing. This study characterized the histone genes (H2A.V) of sevenband groupers and analyzed gene expression in NNV-infected sevenband groupers. The open reading frame (ORF) of H2A.V is 387 bp which encoded 128 amino acid residues. The deduced amino acid sequence of H2A.V harbor a highly conserved domain for H2A/H2B/H3 and H2A_C binding domain. Quantitative real-time PCR analysis showed that H2A.V had a high gene expression level in the brain and blood after being NNV-infected. An increase in extracellular histone protein in the blood has been identified as a biomarker for vascular function in humans. More research is required to understand histone's immune response at the protein level or in aquatic animals.
Both glycerol-phosphate acyltransferase (GPAT) and 7.2 kb mRNAs were present at the highest level in liver. Glycerol-phosphate acyltransferase and 7.2 kb mRNA levels increased dramatically when fasted mice were refed a high carbohydrate diet. In mature 3T3-L1 adipocytes, insulin increased both glycerol-phosphate acyltransferase and 7.2kb mRNA levels 2.6 to 3-fold while dibutyryl cAMP decreased mRNA levels by 50% and 80%, respectively. These results indicate positive regulation by insulin and negative regulation by dibutyryl cAMP of both glycerol-phosphate acyltransferase and 7.2 kb mRNA.
An integrated structural design system can define and process complex design information that occurs in each of the design stages for flexible cooperation. It can also reduce human error on sequential design steps: preliminary design, analysis and detailed design. Therefore, it's very important to have consistent semantic expression and procedure for structural design information that has complex relationships. In this study, we introduce the object-oriented concepts and object-oriented database thechnique that provides high level semantic expression in order to develop an integrated structural design system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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