Different detection characteristics of fluorescence immunochromatography method and high performance liquid chromatography (HPLC) method for the analysis of cyanobacterial toxins were studied. In particular, low and high limits of detection, detection time and reproducibility and detectable microcystin species were compared when fluorescence immunochromatography method and high performance liquid chromatography method were applied for the detection of microcystin (MC), a cyclic peptide toxin of the freshwater cyanobacterium Microcystis aeruginosa. A Fluorescence immunochromatography assay system has the unique advantages of short detection time and low detection limit, and high performance liquid chromatography detection method has the strong advantage of individual quantifications of several species of microcystins.
Three major curcuminoids in turmeric (Curcuma longa), curcumin, demethoxycurcumin, and bisdemethoxycurcumin, were efficiently extracted by optimizing extraction condition and simultaneously analyzed and identified using reverse phase high-performance liquid chromatography, thin-layer chromatography, and liquid chromatography-mass spectrometry method. The highest yield of extraction amount 0.279 g, 9.30% was obtained by dipping method with extraction time of 7 h.
Park, Sang-Bum;Oh, Chung-Hun;Kim, Jong-Wan;Jang, Won-Cheoul
Analytical Science and Technology
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v.15
no.3
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pp.190-195
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2002
We analysed mutation of ${\beta}_2$-adrenergic receptor gene that controls bronchial asthma by denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC) according to ion-pair reversed-phase high performance liquid chromatography (IP-RP-HPLC). We extracted genomic DNA from 50 asthma patients, amplified DNA using PCR, and analysed PCR product by DHPLC. As a result, we obtained that mutation frequency was 15 (30%) among 50 cases. Consequently DHPLC mutation detection was confirmed that the result of direct sequencing was coincide exactly.
Various concentrations of malonaldehyde (MA) produced upon hydrolysis of 1, 1, 3,3-tetraethoxypropane (TEP) were reacted with 2-thiobarbituric acid (TBA)and th e contents of MA-TBA complex were measured both with spectrophotometer and high performance liquid chromatography (HPLC). As the concentrations of MA-TBA increased, their absorbances and the corresponding HPLC peak areas increased. The correlation coefficient between absorbances and HPLC peak areas of MA-TBA peaks from the other compounds and butanol extraction of the complex increased its recovery its recovery by 29.4% . Measurement of the content of MA-TBA complex for monitoring the development of lipid oxidation was proven to be successful with the use of high performance liquid chromatography.
IgY (Immunoglobulin Yolk) in egg yolk corresponds to IgG (Immunoglobulin G) in animal serum and plays an important role as immunological proteins in intestines. Carrageenan and Arabic gum were used as pretreatment agents to purify IgY from fresh egg yolk. DEAE (Diethylaminoethyl) Sepharose column in FPLC (Fast Protein Liquid chromatography) was an ion exchange tool to remove contaminants as well as to elute IgY from the column. GF HPLC (Gel Filtration High Performance Liquid Chromatography) enables to measure the molecular weights of IgY and to identify the purified IgY by comparing the molecular weight of standard IgY with the purified one. IgY is a heterogeneous group of different molecular weight and ionic properties, which was investigated with various IE HPLC (Ion Exchange High Performance Liquid Chromatography) columns such as AX, CX and SCX. Three peaks of IgY were separated in the AX column under the conditions of 0.5 M NaCl and pH=8. The SCX column also gave the three peaks of IgY at 0.5 M NaCl and pH=5.
High-performance countercurrent chromatography (HPCCC) coupled with reversed-phase highperformance liquid chromatography (RP-HPLC) method was developed to isolate dihydrophaseic acid 3'-O-${\beta}$-D-glucopyranoside (DHPAG) from the extract of Nelumbo nucifera seeds. Enriched DHPAG sample (2.3 g) was separated by HPCCC using ethyl acetate/n-butanol/water system (6:4:10, v/v/v, normal-phase mode, flow rate: 4.0 mL/min) to give 23.1 mg of DHPAG with purity of 88.7%. Further preparative RP-HPLC experiment gave pure DHPAG (16.3 mg, purity > 98%). The current study demonstrates that utilization of CCC method maximizes the isolation efficiency compared with that of solid-based conventional column chromatography.
Many successive liquid-liquid extractions occur enabling purification of the crude material to occur. In high performance counter-current chromatography (HPCCC), crude material is partitioned between two immiscible layers of solvent phases. The stationary phase (SP) is retained by hydrodynamic force field effect and the mobile phase (MP) is pumped through the column. Purification occurs because of the different solubility of the components in the liquid mobile and stationary phases. There are many key benefits of liquid stationary phases such as high mass and volume injection loadings, total sample recovery, and easy scale-up. Many researchers showed that predictable scale-up from simple test is feasible with knowledge of the stationary phase retention for the planned process scale run. In this review we review the recent advances in HPCCC research and also describe the key applications such as natural products and synthetics (small or large molecules).
This research was attempted to determine the composition of flavone glycosides (luteolin 7-O-glucoside, luteolin 7-O-glucuronide, linarin) in addition to luteolin simultaneously in aerial part of Youngia japonica (Compositae) by high-performance liquid chromatography. The MeOH extract was further fractionated into the three parts, $CHCl_3$ fraction, EtOAc fraction and BuOH fraction, to investigate the contents of the four flavones in the three fractions. The content of luteolin 7-O-glucuronide (10.07 mg/g) was highest in the MeOH extract among those of the flavones. These four compounds were observed to be less than 1.0 mg/g in $CHCl_3$- and EtOAc fractions but relatively high in BuOH fraction.
Ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, Rf and Rg1 were effectively isolated from ginseng root by preparative liquid chromatography (LC) on two PrepPAK-500/c18 cartridges in series and semipreparative LC on a .mu. Bondapak cabohydrate analysis column, a .mu.Bondapak C18 column or a .mu. Porasil column. The identities of the isolated ginsenosides were confirmed by analytical high-performance liquid chromatography (HPLC) and infrared spectrophotometry. By this method large scale isolation of pure ginsenosides was efficiently accomplished.
kim, Choon Sung;Roh, Jae Hoon;Bae, Mun Joo;Kim, Chi Nyon;Lim, Nam Gu;Won, Jong Uk
Journal of Korean Society of Occupational and Environmental Hygiene
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v.7
no.1
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pp.49-59
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1997
This study was performed to analyze the purity of technical grade ${\alpha}$-naphthylamine, to establish optimal analytical condition of ${\alpha}$-naphthylamine in urine and to determine the urine sample of workers exposed to ${\alpha}$-naphthylamine. The purity of technical grade ${\alpha}$-naphthylamine were $96.5{\pm}2.38%$, $94.1{\pm}0.97%$, $97.0{\pm}0.02%$ by gas chromatography-mass selective detector. To analyze ${\alpha}$-naphthylamine in urine, high performance liquid chromatography-electrochemical detector and gas chromatography-electron capture detector operating conditions have been optimized by preliminary expriment. In high performance liquid chromatography-electrochemical detector, the mobile phase was consisted of acetonitrile(35%) and water(65%), and the flow rate was maintained at 1.0ml per minute. Optimal detective condition was 9.0V(10nA/V) of electrochemical detector. The recovery of sep-pak treatment method was highly estimated as pretreatment of ${\alpha}$-naphthylamine in urine. The free amine was isolated by gas chromatography-electron capture detector after basic hydrosis, sep-pak treatment, toluene elution and HFBA(heptafluoro-butyric anhydride) derivatization of urine. The recovery of ${\alpha}$-naphthylamine in urine was $98.73{\pm}3.29%$ by gas chromatography-electron capture detector. The sensitivity was more higher than that of high performance liquid chromatography-electrochemical detector. Urinary ${\alpha}$-naphthylamine was detected in only one worker among nine workers. The level of ${\alpha}$-naphthylamine in urine was 6.42 ng/ml.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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