The mycelium of Rhizopus nigricans was harvested at intervals during the sporulation periods, fractioned into various cell components and analyzed the con!eiits of various cell materials in order to clarify the optimum conditions of sporulation and some characteristics of the metabolism during tke sporulation periods. The changes in enzyme activities, such as amylase and protease, were also measured during the sporulation period,. 1. Mycelium in distilled water culture, as control, did not sporulate but mycelial mat cultured in Petridish without mutrient spourulated. Optimum temperature range for sporulation was $20{\sim}25^{\circ}C$. 2. During the sporulation and maturation periods, proteins, especially alkali-labile protein were decreased remarkably but free amino acid and ninhydrin reactive substances in acid soluble fraction were increased, compared with control. 3. Acid solable polyphosphate was decreased but acid insoluble polyphosphate was increased, during the sporulation. 4. Carbohydrate and hexosamine in acid soluble fraction were increased, while carbohydrate in alkali insoluble residual fraction was decreased during the sporulation periods. 5. Amounts of UV-absorbing material in deoxyribonucleic acid fraction was increased a little but those in ribonucleic acid fraction was decreased, compared with control. 6. Intracellular amylases and proteases activities insporulating mycelial mat were increased continuously during the sporulation and maturation periods.
Metastasis is one of the hallmarks of malignant neoplasms and is the leading cause of death in many cancer patients. A major challenge in cancer treatment is to find better ways to specifically target tumor metastasis. In this study, the anti-metastatic potential of the methanolic extract of Rhizophora apiculata (R.apiculata) was evaluated using the B16F-10 melanoma induced lung metastasis model in C57BL/6 mice. Metastasis was induced in C57BL/6 mice by injecting highly metastatic B16F-10 melanoma cells through the lateral tail vein. Simultaneous treatment with R.apiculata extract (10 mg/kg b.wt (intraperitoneal) significantly (p<0.01) inhibited pulmonary tumor nodule formation (41.1 %) and also increased the life span (survival rate) 107.3 % of metastatic tumor bearing animals. The administration of R.apiculata extract significantly (p<0.01) reduced biochemical parameters such as lung collagen hydroxyproline, hexosamine, uronic acid content, serum nitric oxide (NO), ${\gamma}$-glutamyl transpeptidase (GGT) and sialic acid levels when compared to metastasis controls. These results correlated with lung histopathology analysis of R.apiculata extract treated mice showing reduction in lung metastasis and tumor masses. Taken together, our findings support that R.apiculata extract could be used as a potential anti-metastasis agent against lung cancer.
Luteolin (LUT), a bioflavonoid has been used as a chemopreventive agent world-wide against chemically induced cancer. Hence we designed an experiment to assess chemopreventive action of LUT on lipid peroxidation (LPO) and glycoconjugates in azoxymethane (AOM)-induced colon carcinogenesis. Colon cancer was induced by 15 mg/body kg. body weight of AOM and administration of LUT (at the dose of 1.2 mg/kg. body weight) was till end of the study. Analysis of lipid peroxidative end products such as protein carbonyl (PC), malonadehyde (MDA) and conjucated dienes (CD) demonstrated significant increase in in AOM-induced animals with reduction by LUT (p<0.05). Increased levels of glycoconjugates such as hexose, hexosamine, sialic acid, fucose and mucoprotein were analyzed in serum and colon tissues examined histopathologically by periodic acid Schiff's (PAS) staining were also reversed by LUT l(p<0.05). The secondary marker of colon cancer mucin depleted foci (MDF) was assessed in control and experimental group of animals. A characteristic increase of MDF was observed in AOM-induced colon cancer animals. Treatment with LUT decreased the incidence of MDF. These results suggest that LUT alters the expression of glycoconjugates and suppress colon cancer. Hence, we speculate that LUT can be used as a chemopreventive agent to treat colon cancer.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.141-141
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1993
말징버섯 Calvatia craniformis의 culture broth 40 liter를 여과하여 얻은 균사채를 열수 추출하여 진한 갈색 건조분말(Fr. A) 13.1g을 분리하였다. Fr. A에 대하여 DEAE-cellulose ion chromatography를 시행하여 중성분획인 흰색 분말 (Fr. B) 2.50g을, 산성분획인 갈색 분말 (Fr. C) 3.50g을 각각 분리하였다. Fr. B 500mg에 대하여 Sepharose CL-4B gel filtration chromatography를 시행하여 흰색분말 Fr. D(Calvatan) 350mg을 분리하였다. Calvatan 350mg에 대하여 Con A-Sepharose 4B affinity chromatography를 적용하여 미흡착 분획인 Fr. F($\alpha$-form)와 흡착 분획인 Fr. E ($\beta$-form)로 정제하였다. 항암작용의 기전을 구명하고자 마우스에 대하여 면역학적 실험을 시행하였다. macrophage의 활성에 대한 영향을 조사하였던 바, 투여군의 활성화된 macrophage에 의해 유리되는 superoxide anion의 양은 대조군에 비해 1.4배 증가하였고 Calvatan 투여군의 용혈반 형성세포(PFC)는 대조군에 비해 3.1배 증가하였다. 화학 분석에 의해, Calvatan은 다당체 87.2%, 단백질 1.8% 및 hexosamine 1.3%로 구성되어 있었다. 따라서 항암성 분획들은 protein-bound polysaccharide임을 알 수 있었다. 또한 각 분획의 다당체를 구성하고 있는 단당류는 glucose, galactose, mannose 및 xylose 였으며 단백질 부분은 16종의 아미노산으로 구성되어 있었다. IR 스펙트럼은 3300-3400 $cm^{-1}$에서 0-H stretching frequency, 2900 $cm^{-1}$ 에서 C-H stretching frequency, 1630 $cm^{-1}$ 에서 C-0 stretching frequency. 1000-1100 $cm^{-1}$에서 C-H 및 C-0 bending frequency를 나타내는 다당체의 전형적인 특성을 보여주었다.을 보여주었다.
To find pharmacologically active components of Agrocybe cylin(Iracea, its basidiocarps were extracted with water. The extracts were separated by DEAE cellulose column chromatography, Sepharose CL-4B gel filtration, and Concanavalin A-Sepharose 4B affinity chromatography. Among the obtained fractions from A, cylinclracea, fraction IN which was the neutral proteinbound-polysaccharide fraction exhibited a marked antitumor activity and it was tentatively named "Cylindan". It showed about 70% of tumor inhibition against the solid form of sarcoma 180 when a dose of 30 mg/kg/day was intraperitoneally injected into ICR mice. When each fraction was examined by chemical analysis, Cylindan consisted of 85% polysaccharide, 3% protein and 1% hexosamine. Its polysaccharide moiety contained glucose, mannose, fucose and galactose and its protein moiety contained the comparatively large amounts of aspartic acid and glycine, and other 11 amino acids.
Ethanolic extract (50% v/v) and alkaloid fraction of Tylophora indica leaves were examined for lysosomal enzyme inhibitory activity in adjuvant-induced arthritic rats. The alkaloid fraction showed statistically significant inhibition of arthritic lesions (p < 0.05) from day 18, (p < 0.025) from day 20 and (p < 0.001) from day 21 onwards in the adjuvant-induced arthritis, which was comparable to the response of standard drug Indomethacin. The ethanolic extract was less significant than the alkaloidal fraction in inhibition of arthritis. Alkaloid fraction showed significant (p < 0.001) inhibitory effect on the lysosomal enzyme activities in adjuvantinduced arthritic rats. It also significantly prevented decrease in collagen levels and synovial damage observed during arthritis and also inhibited increase in urinary excretion levels of collagen degradation products like hydroxyproline, hexosamine, hexuronic acid, etc. Both ethanolic extract as well as the alkaloid fraction, however, did not show any significant activity in normal nonarthritic rats. The ethanolic extract and the alkaloid fraction may thus be able to inhibit the progress of inflammation and inhibit the destructive activity of lysosomal enzymes on structural macromolecules like collagen etc. in the synovial capsule in joints during arthritic states. They may thus prevent synovial damage observed during arthritis.
Kim, Byong-Kak;Cho, Hye-Youn;Kim, Jin-Sook;Kim, Ha-Won;Choi, Eung-Chil
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.24
no.3
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pp.203-212
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1993
To find antitumor components in the hot water extract of the cultured mycelia of Ganoderma lucidum, protein-bound polysaccharides were purified and fractionated (Fr. I-V) by DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Sepbarose CL-4B gel filtration. When a dose of 20 mg/kg/day of each was, i.p., injected into ICR mice, the inhibition ratios against the solid form of sarcoma 180 were $64.2{\sim}75.8%$. The antitumor component was examined for immunological activity. It increased the amount of superoxide anion released by induced macrophages in peritoneal cavity to 1.8 times and the count of hemolytic plaque-forming cells (PFC) was increased to 4.4 times as compared with those of the control group. It contained 68.6% polysaccharide which consisted of mannose, glucose, galactose, fucose and xylose and 5.1% protein consisting of 17 amino acids. The contents of hexosamine were 0.78%. The molecular weight of Fr. V that showed the highest antitumor activity was $5.8{\times}10^4$ dalton by Sepharose CL-4B gel filtration. It was named lucidan.
Lee, Sena;Kim, Myung-Gyou;Ko, Sung Kwon;Kim, Hye Kyung;Leem, Kang Hyun;Kim, Youn-Jung
Journal of Ginseng Research
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v.38
no.2
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pp.89-96
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2014
The protective effect of ginsenoside Re, isolated from ginseng berry, against acute gastric mucosal lesions was examined in rats with a single intraperitoneal injection of compound 48/80 (C48/80). Ginsenoside Re (20 mg/kg or 100 mg/kg) was orally administered 0.5 h prior to C48/80 treatment. Ginsenoside Re dose-dependently prevented gastric mucosal lesion development 3 h after C48/80 treatment. Increases in the activities of myeloperoxidase (MPO; an index of neutrophil infiltration) and xanthine oxidase (XO) and the content of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS; an index of lipid peroxidation) and decreases in the contents of hexosamine (a marker of gastric mucus) and adherent mucus, which occurred in gastric mucosal tissues after C48/80 treatment, were significantly attenuated by ginsenoside Re. The elevation of Bax expression and the decrease in Bcl2 expression after C48/80 treatment were also attenuated by ginsenoside Re. Ginsenoside Re significantly attenuated all these changes 3 h after C48/80 treatment. These results indicate that orally administered ginsenoside Re protects against C48/80-induced acute gastric mucosal lesions in rats, possibly through its stimulatory action on gastric mucus synthesis and secretion, its inhibitory action on neutrophil infiltration, and enhanced lipid peroxidation in the gastric mucosal tissue.
This study was conducted to investigate the characteristics and biological activities of the substance extracted from the fruit body of Formitopsis rosea. The substance was extracted by hot water and then it was separated high and low molecular weight fraction by ethanol precipitation, The high molecular weight fraction was found to be a proteoglycan composed of glucose, mannose, galactose, xylose, fructose, ribose and amino acids. The amino acids of proteoglycan were mainly threonine, isoleucine, glycine, aspartic acid. Anticomplementary activity of the high molecular weight fraction was higher than that of the low molecular weight fraction. And also, the high molecular weight fraction enhanced phagocytic activity and nitric oxide production of macrophage. In enzymatic lipid peroxidation reaction with $ADP-FeCl_3-NADPH$, the lipid peroxidation was inhibited 82.4% and 86.6% by high and low molecular weight fractions, in nonenzymatic lipid peroxidation reaction, it was 83.0% and 84.6%, respectively.
Kim, Do-Hyung;Seok, Young-Mi;Kim, In-Kyeom;Lee, In-Kyu;Jeong, Seong-Yun;Jeoung, Nam-Ho
BMB Reports
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v.44
no.6
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pp.415-420
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2011
Diabetes is a well-known independent risk factor for vascular disease. However, its underlying mechanism remains unclear. It has been reported that increased influx of the hexosamine biosynthesis pathway (HBP) induces O-GlcNAcylation of proteins, leading to insulin resistance. In this study, we determined whether or not O-GlcNAc modification of proteins could increase vessel contraction. Using an endothelium-denuded aortic ring, we observed that glucosamine induced OGlcNAcylation of proteins and augmented vessel contraction stimulated by U46619, a thromboxane $A_2$ agonist, via augmentation of the phosphorylation of MLC20$MLC_{20}$, MYPT1(Thr855), and CPI17, but not phenylephrine. Pretreatment with OGT inhibitor significantly ameliorated glucosamine-induced vessel constriction. Glucosamine treatment also increased RhoA activity, which was also attenuated by OGT inhibitor. In conclusion, glucosamine, a product of glucose influx via the HBP in a diabetic state, increases vascular contraction, at least in part, through activation of the RhoA/Rho kinase pathway, which may be due to O-GlcNAcylation.
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