Antigens of Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) strain F were immunoblotted to identify the most immunodominant one, and the localization of this antigen was then studied using immunoelectron microscopy. The 67.8 kDa antigen appeared to be the most immunodominant one in a mouse model, and it showed randomly scattered and partially clustered distribution on the surface of the virion. The localization study was performed using immunogold with polyclonal anti-HSV-1 sera produced from BALB/c mice, and immunofluorescence demonstrated that the viral products in the HSV-2 infected Vero cells were distributed throughout the infected host cell, however, mainly on the surface of the host membrane.
In order to explore the potential of ascorbic acid supplementation for the prevention and treatment of herpes simplex viral diseases, plaque reduction assays were performed. Ascorbic acid as well as copper chloride/ferric chloride were added to wells containing Vero cells infected with herpes simplex virus type 1 (HSV-1), and the infectivity of HSV-1 was determined. Since copper and iron are major transition metals in human plasma, near the normal human plasma concentrations of them were used for experiments. When Cu(II) and Fe(III) were applied, there were no significant differences between virus control and Cu(II)/Fe(III)-treated groups. But, when appropriate concentrations of ascorbic acid were added to wells, meaningful differences between control and ascorbate-treated groups were found. In the presence of Cu(II)/Fe(III) at $5.8/3.7\;{\mu}M$, 72-h treatment with ascorbate at $50\;{\mu}M$ reduced HSV-1 infections to $10.77%{\pm}4.25%$ (P < 0.001) and $500\;{\mu}M$ did to $3.06%{\pm}1.62%$ (P < 0.001). Moreover, the cytotoxicities for Vero cells at those concentrations were insignificant (P > 0.05). Current recommended dietary allowance (RDA) of ascorbic acid is 60 mg/day, and the oral intake of 60 mg/day of ascorbic acid yields plasma ascorbic acid at 45 to $58\;{\mu}M$ in a healthy adult man. Therefore, the results of this study suggest that the maintenance of appropriate level (more than $50\;{\mu}M$) of ascorbic acid in human plasma by appropriate amount (more than the RDA) of ascorbic acid supplementation may be helpful for the prevention and treatment of diseases caused by HSV -1 in an adult man. In addition, this study also suggests that ascorbic acid may be useful for the prophylaxis of fatal HSV-1 infections in neonates and the prevention of HSV-1 reactivation in immunocompromised hosts.
Infections by herpes simplex viruses have an immense impact on humans, ranging from self-limiting, benign illness to serious, life-threatening diseases. While nucleoside analog drugs are available, resistance has been increasing and currently no vaccine exists. Ginsenosides derived from Panax ginseng have been documented to inhibit several viruses and bolster immune defenses. This study evaluated 12 of the most relevant ginsenosides from P. ginseng for toxicities and inhibition of herpes simplex viruses types 1 and 2 in Vero cells. The effects of test compounds and virus infection were determined using a PrestoBlue cell viability assay. Time course studies were also conducted to better understand at what points the virus life cycle was affected. Non-toxic concentrations of the ginsenosides were determined and ranged from 12.5 μM to greater than 100 μM. Ginsenoside 20(S)-Rg3 demonstrated the greatest inhibitory effect and was active against both HSV-1 and HSV-2 with an IC50 of approximately 35 μM. The most dramatic inhibition-over 100% compared to controls-occurred when the virus was exposed to 20(S)-Rg3 for 4 h prior to being added to cells. 20(S)-Rg3 holds promise as a potential chemotherapeutic agent against herpes simplex viruses and, when used together with valacyclovir, may prevent increased resistance to drugs.
A monoclonal antibody (mAb) to the glucoprotein D (gD) of Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) was successfully generated by hybridoma technology and characterized. The mAb, SKS2v, recognized a gD antigen with an apparent molecular mass of 60kDa in a Western blot analysis. The isotype was determined by a sandwich ELISA to be IgG2a. HSV-2 exhibited major antigens of 36, 43, 46, 47, 60, 69, 81, 96, 109, 112, 159, and 227 kDa among 25 protein profiles in SDS-PAGE, and among these antigens, those of 60, 112, 125, and 227 kDa were immunodominant in a Western blot analysis using antisera, thereby indicating that they play a role in inducing neutralizing antibodies in HSV-2 infection. When reacted with Vero cells infected with HSV-1 and HSV-2 SKSv2 showed a reactivity to the surface of the infected cells, and a gD antigen of 60 kDa appeared to be expressed in both types of HSV.
In order to find antiviral effect against Human immunodeficiency virus(HIV), Herpes simplex virus type I(HSV-1) and II(HSV-2) from herb medicines, publicated 29 paters on anti-viral effect of herbal medicines and a convenient virus-induced cytopathic effect (CEP) inhibition assay was introduced. The major virus on experiment are HIV, Hepatitis B virus and HSV-1,2. Those of other studies showed inhibition of infected virus DNA replication and screening test of herbal medicines. More than 15 extractions were prepared by pure water boiling from herbal medicines, and their toxicity of infected cell and anti-viral activities were evaluated. Among them, the major part of herbal medicines showed cell stability compared with the contrast. Cytotoxic concentration (CC) of the $H_2O$ extracts of Padoo against HIV was <4.0, Hyungbangpaedoksan against HIV was 9.3, Whangyonhaedoktang against HIV-1 and HSV-2 was 15.3. These are high level cytotoxic concentration compared with the contrast. But antiviral effect was unable to figure out for selective $index(SI)=CC_{50}/EC_{50}$. The other herbal medicines were unable to showed potent anti-HIV and anti-HSV activity. The antiviral activation using herbs in this thesis have unlimited objects, to select research object will help to show the direction of antiviral drug development that have less side effect and more excellent efficiency.
For screening of the antiviral agent from soil, about 520 strains of microorganisms were evaluated for their antiviral activity, About 6.9% of strains showed more than 95% antiviral activity against Herpes Simples Virus (HSV)-1. Two strains among 30 strains active against HSV-1 virus showed a quite strong activity against human immunodeficiency virus.
단순포진 바이러스 감염을 유발하는Herpes simplex2형 바이러스의 감염에 관여하는 항원들과 중화항체 생산을 유발하는 주요 항원들의 위치를 확인하였다. Vero cell에 감염하였을 때 48시간 동안 31, 43, 59, 69 kDa 바이러스 항원들이 지속적으로 발현되었으며, 감염된 쥐에서 생산한 항체와의 반응에서는 51 kDa 항원이 가장 강한 반응을 보였다. 면역전자현미경으로 위치를 확인한 결과 colloidal gold가 바이러스 표면에 발견되는 것으로 보아 이 항원이 바이러스 표면에 존재하고 있는 것으로 확인되었다. 형광현미경 분석은 이 항원들이 감염된 세포 내에서 전반적으로 발견되었고 특히 세포 표면에서 많이 발현되고 있었다.
Herpes simplex virus types 1 and 2 (HSV-1 and HSV-2) are the most common cause of genital ulceration in humans worldwide. Typically, HSV-1 and 2 infections via mucosal route result in a lifelong latent infection after peripheral replication in mucosal tissues, thereby providing potential transmission to neighbor hosts in response to reactivation. To break the transmission cycle, immunoprophylactics and therapeutic strategies must be focused on prevention of infection or reduction of infectivity at mucosal sites. Currently, our understanding of the immune responses against mucosal infection of HSV remains intricate and involves a balance between innate signaling pathways and the adaptive immune responses. Numerous studies have demonstrated that HSV mucosal infection induces type I interferons (IFN) via recognition of Toll-like receptors (TLRs) and activates multiple immune cell populations, including NK cells, conventional dendritic cells (DCs), and plasmacytoid DCs. This innate immune response is required not only for the early control of viral replication at mucosal sites, but also for establishing adaptive immune responses against HSV antigens. Although the contribution of humoral immune response is controversial, $CD4^+$ Th1 T cells producing IFN-${\gamma}$ are believed to play an important role in eradicating virus from the hosts. In addition, the recent experimental successes of immunoprophylactic and therapeutic compounds that enhance resistance and/or reduce viral burden at mucosal sites have accumulated. This review focuses on attempts to modulate innate and adaptive immunity against HSV mucosal infection for the development of prophylactic and therapeutic strategies. Notably, cells involved in innate immune regulations appear to shape adaptive immune responses. Thus, we summarized the current evidence of various immune mediators in response to mucosal HSV infection, focusing on the importance of innate immune responses.
Flavonoids, a group of low molecular weight phenylbenzopyrones, have various pharmacological properties including antioxidant, anticancer, bactericidal, and anti-inflammatory. We carried out anti-herpetic assays on 18 flavonoids in five classes and a virus-induced cytopathic effect (CPE) inhibitory assay, plaque reduction assay, and yield reduction assay were performed. When flavonoids were applied at various concentrations to Vero cells infected by HSV-1 and 2, most of the f1avonoids showed inhibitory effects on virus-induced CPE. Among the flavonoids, EC, ECG (flavanols), genistein (isoflavone), naringenin (flavanone), and quercetin (flavonol) showed a high level of CPE inhibitory activity. The antiviral activity of flavonoids were also examined by a plaque reduction assay. EC, ECG, galangin, and kaempferol showed a strong antiviral activity, and catechin, EGC, EGCG, naringenin, chrysin, baicalin, fisetin, myricetin, quercetin, and genistein showed moderate inhibitory effects against HSV-1. In these experiments, flavanols and flavonols appeared to be more active than flavones. Furthermore, treatment of Vero cells with ECG and galangin (which previously showed strong antiviral activities) before virus adsorption led to a slight enhancement of inhibition as determined by a yield reduction assay, indicating that an intracellular effect may also be involved.
A 59-year old man was admitted for drowsiness and stiff neck. CSF examination showed lymphocytic pleocytosis and PCR for herpes simplex virus (HSV)-1 was positive in CSF. Brain MRI revealed enhanced lesions in left temporal lobe. His symptom improved with acyclovir. Follow-up studies showed red blood cells in CSF and a hematoma in the left temporal lobe. There was no additional symptom related to the hematoma. He was discharged after conservative care. Although rare, hematoma can develop in HSV-1 meningoencephalitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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