Growth and DNA synthesis inhibitory effects of doenjang methanol extract and its solvent fractions on AGS human gastric adenocarcinoma cells, Hep 3B human hepatocellular carcinoma cells, HT-29 human colon cancer cells and MG-63 human osteosarcoma cells were studied. The treatment of doenjang methanol extract ($ 200{\mu}g/ml $) with the AGS, Hep 3B, HT-29 and MG-63 cancer cells after 6 days of incubation inhibited the growth of cancer cells by $32\%$, $51\%$, $84\%$ and $33\%$, respectively. To separate active compounds of doenjang, doenjang methanol extract was fractionated with dichloromethane, ethylacetate, and buthanol. Among the solvent fractions, the dichloromethane and ethylacetate fractions showed the highest growth inhibitory effects on various cancer cells. For example, the dichloromethane and ethylacetate fractions ($200a{\mu}g/ml$) sig-nificantly inhibited the growth of various cancer cells by $89\∼96\%$ and$62\∼86\%$, respectively. DNA synthesis of AGS and Hep 3B cancer cells was significantly inhibited by adding dichloromethane fraction ($200{\mu}g/ml$) up to $94\%$ and $80\%$, respectively. Similarly, the ethylacetate fraction ($ 200\mug/ml $) showed a $ 95\% $ inhibition rate of DNA synthesis in AGS cells. These results suggest that the dichloromethane and ethylacetate fractions have specific active compounds, which will explain this anticancer effect of doenjang.
Sodium butyrate (NaBt), a naturally occurring short chain fatty acid derived from carbohydrate metabolism in the gut, is known to exhibit strong anti-cancer potentials in various human cancer cells; however, its action mechanism is poorly understood. In the present study, we demonstrated that NaBt up-regulates levels of E-cadherin, a key cell adhesion molecule implicated as a tumor suppressor, in a cell type-specific manner. Although levels of p21, a potential activator for E-cadherin expression, were also up-regulated by treatment with NaBt in several types of cells, it does not seem to be associated with the activation of E-cadherin in the NaBt-treated cells. Instead, the data from promoter analysis suggest that NaBt up-regulates expression of E-cadherin at the transcription level by enhancing its promoter strength via a CCAAT-box. The elevated E-cadherin in the presence of NaBt was primarily localized at the cell-cell contacts, converting Hep3B cells into a more differentiated form.
Lee, Jun Young;Kim, Mi Kyeong;Ha, Jun Young;Kim, Yong Gyun;Hong, Chang Oh;Kim, So Young;Kim, Chung-Hwan;Kim, Keun Ki
Journal of Life Science
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v.24
no.3
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pp.242-251
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2014
The objective of this study was to isolate a photosensitizer from Pueraria thunbergiana leaves that induces apoptosis in SK-HEP-1 cells. Column chromatography and thin layer chromatography were used to isolate active compounds from extracts of P. thunbergiana leaves. The structures of the isolated compounds were determined by 1D-NMR, 2D-NMR, and FAB-mass spectroscopy. A substance, named M4-3, was purified from the leaves of P. thunbergiana using various chromatography methods, and the absorbance of the substance was measured. The absorbance was highest at 410 nm, suggesting that the M4-3 substance was a different compound from chlorophyll a and b, which absorb at 410, 502, 533, and 607 nm. Further analyses revealed that the M4-3 compound was a $13^2$-hydoxy pheophorbide, a methyl ester with a molecular weight of 662. M4-3 was identified as a derivative compound of pheophorbide, with a structure that magnesium comes away from the porphyrin ring. The results of the analysis of the cytotoxicity of the M4-3 substance against the SK-HEP-1 cells revealed that it inhibited rates of cell growth by 40% and 80% at a concentration of 0.04 ${\mu}M$ and 0.08 ${\mu}M$, respectively. The M4-3 compound was found to be a photosensitizer for cytotoxicity because it was appeared only in light condition as examining activity in different irradiation conditions (light condition and nonlight condition) under the same concentration. Analysis of morphological changes in the cells following cell death induced by exposure to the M4-3 substance reveled representative phenomena of apoptosis (nuclear condensation, vesicle formation, and fragmentation of DNA). The induction of apoptosis was attributed to the compound's photodynamic activity.
Kim, Eun Ji;Kim, Guen Tae;Kim, Bo Min;Lim, Eun Gyeong;Ha, Sung Ho;Kim, Sang-Yong;Kim, Young Min
Journal of Life Science
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v.26
no.7
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pp.764-771
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2016
Extracts from Artemisia annua Linné (AAE) have been known to possess various functions, including anti-bacterial, anti-virus, and anti-oxidant effects. However, the mechanism of those effects of AAE is not well-known. The aim of this study was to analyze the inhibitory effects of AAE on cell proliferation of the human hepatoma cell line (Hep3B) and to examine its effects on apoptosis. Activation by phosphorylation of Akt is cell proliferation through the phosphorylation of TSC2, mTOR, and GSK-3β. We suggested that AAE may exert cancer cell apoptosis through Akt/mTOR/GSK-3β signal pathways and mitochondria-mediated apoptotic proteins. For this, we examined the effects of extracts of AAE on cell proliferation according to treatment concentration. Treatment with AAE not only reduced cell viability, but also resulted in the induced release of lactate dehydrogenase (LDH). These results were determined with a 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and a lactate dehydrogenase (LDH) assay. Furthermore, we determined the effects of apoptosis through Hoechst 33342 staining, annexinⅤ-propidium iodide (PI) staining, 5,5′, 6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide (JC-1) staining, and Western blotting. Our study showed that the treatment of liver cancer cells with AAE resulted in the inhibition of Akt, TSC2, GSK-3β-phosphorylated, Bcl-2, and pro-caspase 3 and the activation of Bim, Bax, Bak, and cleaved PARP expressions. These results indicate that AAE induced apoptosis by means of a mitochondrial event through the regulate of Akt/mTOR/GSK-3β signaling pathways.
In order to investingate the effects of Jukyeopseokgotanggagambang Extract on antitumor effects after human cell lines(A549, hep3B, Caki-1, Ehrlich) transplantation into the peritoneal cavity or right groin in mice induced by RPMI 1640 and GIBCO etc., the extracts of its herbal medicines were orally administered for 10 or 12days. Experimental studies were performed for measurance of antitumor effect of MMC(Mitomycin C) and lysosomal enzyme's activities using colony forming efficiency, SRB assay which were regarded as a valuable method for antitumor effects of unknown compound on tumor cell lines. The results obtained in this studies were as follows: 1. According to the change of colony-forming efficiency and SRB assay of Caki-1 cell, hep3B and A549 cells after exposure to the extract of Jukyeopseokgotanggagambang extract, that extract depressed the growth of tumor cells depending on its concentration. 2. Antitumor activities of the ethanol extract from Jukyeopseokgotanggagambang extract and MMC on ascites form of Ehrlich carcinoma in mice is a little improved. Especially mean survival times of the group of Jukyeopseokgotanggagambang extract 200mg/kg and MMC 0.1mg/kg is improved over 30%. 3. When Jukyeopseokgotanggagambang extract and MMC are administerated together, the weight of tumor is more decreased than MMC alone. 4. The effects of the Jukyeopseokgotanggagambang extract and MMC on the lysosomal enzymes in Ehrlich ascites carcinoma cell are more significantly improved than MMC alone. 5. Jukyeopseokgotanggagambang extract also increased the uptake of MMC into Ehrlich carcinoma cells. According to the above results, it could be suggested that Jukyeopseokgotanggagambang extract has indirect autitumor effects by strengthening the effects of MMC on tumor cells.
Three different oriental natural plants (Angelicae Dahuricae Radix, Sanguisorba Officinalis L, Euonymus alatus) were extracted with 70% methanol under refluxing for 4 hr in order to investigate their inhibitory effect on Matrix Metalloproteinase-9 (MMP-9) by a modified gelatin zymography, where only euonymus alatus showed the inhibitory effect on the activity of Matrix MMP-9. The fraction was collected by using the mixture of ethyl acetate and hexane on silica gel column. Seven portions were obtained and three fractions of them (first, third and forth) showed inhibitory effect on the zymography. To verify the effect of these substances on cells, human hepatoma, Hep3B cells as a cancer model, and Chang liver cells as a normal model were selected. In order to examine the cell viability, $1{\mu}g/mL$ of each extract was treated on cells. Most of the methanol soluble fractions showed negligible toxicity on human liver cell line.
Kim, Sung Min;Jang, Eu Jean;Hong, Jong Won;Song, Sung Ho;Pak, Chun Ho
Horticultural Science & Technology
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v.34
no.2
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pp.331-341
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2016
We analyzed the functional fragrant components of three species of Cymbidium oriental orchids using gas chromatography-mass spectrometry (GC/MS). For the comparative analysis, C. goeringii 'Minchunran', 'Jugeumhwa', C. forrestii 'Chwigae', 'Songmae', 'Yongja', and C. faberi 'Choemae', 'Namyangmae', 'Hwaja' were investigated. Major fragrant components detected by GC/MS were selected on the basis of more than 3% value according to the analysis of peak area (%). We found that ${\alpha}$-bergamotene, which has a cytotoxic effect on breast cancer, cervical cancer, and glioblastoma, and nerolidol, which induces apoptosis of human hepatoma cells (HepG2), inhibits the growth of Streptococcus mutans and babesiosis, and has antibacterial properties, are common substances produced by C. goeringii L. Nerolidol and ${\beta}$-bisabolene, which is cytotoxic and suppresses the growth of malignant melanoma cells (B16-F10), HepG2, and leukemia cells (HL-60, K562), are major substances in C. forrestii R. Furthermore, ${\alpha}$-pinene, which inhibits the growth of gliobastoma cells (SF-767) and inhibits the anti-inflammatory action of hepatoma cells (BEL-7402); 1,8-cineole, which is a potential therapeutic agent for the treatment of gastric ulcers; and 1,3,7-octatriene, which functions as a pheromone, are the most common substances in C. faveri R. Thus, substances identified as major fragrant components in oriental orchid species have multiple beneficial applications in human health. This research forms the basis for further studies of the roles of major fragrant components in oriental orchids.
An, Ren-Bo;Kim, Hyun-Chul;Tian, Yu-Hua;Kim, Youn-Chul
Archives of Pharmacal Research
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v.28
no.5
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pp.529-533
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2005
In the course of searching for hepatoprotective agents from natural products, six compounds were isolated from the MeOH extract of the leaves of Juglans sinensis, as guid ed by their DPPH free radical scavenging activity. The structures were determined as juglanoside B (1), quercetin 3-O-${\alpha}$-L-arabinofuranoside (avicularin, 2), quercetin 3-O-${\alpha}$-L-arabinopyranoside (guaijaverin,3), quercetin 3-O-${\alpha}$-L-rhamnopyranoside (quercitrin,4), (+)-catechin (5) and quercetin 3-O-${\beta}$- D-galactopyranoside (hyperin,6). Compounds 2-6 showed significant DPPH free radical scavenging effects. An evaluation for the hepatoprotective activity of the isolated compounds on drug-induced cytotoxicity was conducted, and compounds 1, 2, and 5 showed protective effects against nitrofurantoin-induced cytotoxicity, and compound 5 also exhibited a moderate protective effect on amiodarone-induced cytotoxicity in Hep G2 cells.
It has been known that Linum usitatissimum and Perilla frutescens are dietary sources of possible chemopreventive compounds such as lignans and $\alpha$-linolenic acid. Here, we investigated and compared the inhibitory effects of methanol extracts from Linum usitatissimum and Perilla frutescens on mutagenicity using the Ames test, and growth of human cancer cells (AGS human gastric adenocarcinoma, HT-29 human colon cancer, Hep 3B hepatocellular carcinoma cells). In the Ames test system using Salmonella typhimurium TA100, aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$)-induced mutagenicity was significantly inhibited by treatment with the methanol extract from either Linum usitatissimum or Perilla frutescens (p<0.05) in a dose dependent manner. As for N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguamidine (MNNG)-induced mutagenicity, the methanol extracts (5 mg/assay) from Linum usitatissimum and Perilla frutescens showed 63% and 78% inhibitory rates, respectively, indicating that Perilla frutescens possessed stronger antimutagenic activity than did Linum usitatissimum. Inhibitory effects of methanol extracts from Linum usitatissimum and Perilla frutescens on the growth of human cancer cells (AGS, HT-29 and Hep 3B) appeared to increase dose dependently, and the inhibition was more effective against AGS and HT-29 compared to Hep 3B cells. Our results suggested that the methanol extract from Perilla frutescens showed stronger antimutagenic activity than that from Linum usitatissimumas assayed by the Ames mutagenic test, whereas the methanol extract from Linum usitatissimum was more effective than its counterpart for growth inhibition of human cancer cells. It is concluded that intake of Linum usitatissimum and Perilla frutescens as sources of omega-3 fatty acids will be beneficial for preventing cancer.
Self-organized nanogels were prepared from pullulan/biotin conjugates (PU/Bio) for the development of an effective anticancer drug delivery system. The degree of biotin substitution was 11, 19, and 24 biotin groups per 100 anhydroglucose units of pullulan. The physicochemical properties of the nanogels (PU/Bio1, 2 and 3) in aqueous media were characterized by dynamic light scattering, transmission electron microscopy, and fluorescence spectroscopy. The mean diameter of all the samples was less than 300 nm with a unimodal size distribution. The critical aggregation concentrations (CACs) of the nanoparticles in distilled water were $2.8{\times}10^{-2},\;1.6{\times}10^{-2}$, and $0.7{\times}10^{-2}mg/ml$ for the PU/Bio1, 2, and 3, respectively. The aggregation behavior of the nanogels indicated that biotin can perform as a hydrophobic moiety. To observe the specific interaction with a hepatic carcinoma cell line (HepG2), the conjugates were labeled with rhodamine B isothiocyanate (RITC) and their intensities measured using a fluorescence microplate reader. The HepG2 cells treated with the fluorescence-labeled PU/Bio nanoparticles were strongly luminated compared with the control (pullulan). Confocal laser microscopy also confirmed internalization of the PU/Bio nanogels into the cancer cells. Such results demonstrated that the biotin in the conjugate acted as both a hydrophobic moiety for self-assembly and a tumor-targeting moiety for specific interaction with tumor cells. Consequently, PU/Bio nanogels would appear to be a useful drug carrier for the treatment of liver cancer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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