This study was carried out to find the preventive medical and therapeutic effects of Sarcodon asparatus on adult disease by employing several biological and biochemical assays. Nitrate scavenging ability(NSA) of Sarcodan asparatus extracts was displayed up to 99.9% at pH 1.2 in a dose-dependent manner. They also had 90.4% electron donating ability(EDA) at the concentration of 0.1 mg/mL. Extracts of Sarcodon asparatus were also able to function as a powerful antioxidant at all concentrations(0.01∼l.0 mg/mL). Furthermore, we observed that 1 mg/mL concentration of the extracts was more powerful than BHT, With respect to fibrolytic activity, Sarcodon asparatus showed 1,843.8 unit/g, which was higher than streptokinase(1,189 unit/g). The inhibitory effects of the extracts on angiotensin converting enzyme, measured by the normal and pretreatment methods, were 53 and 58%, respectively. We also performed cytotoxicity effect of Sarcodon asparatus extracts on a various cancer cell lines. The growth inhibitory effects of the extracts(5.0 mg/mL) on A549, HeLa, AGS, and SK-Hep-1 cells were 78.9, 55.3, 69.0, and 42.5 %, respectively. Interestingly, Sarcodon asparatusextracts induced mutation on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 when Ames test was done.
Cu/Zn superoxide dismutase (SOD1) is a protective enzyme responsible for the dismutat ion of superoxide radicals within the cell by converting superoxide radicals to oxygen and hydrogen peroxide, which is in turn changed to oxygen and water by catalase. Previously, we reported that the panaxadiol (PD) and its ginsenoside $Rb_2$ induced the expression of SOD1 gene through AP2 binding site and its induction. Here, we examined the effect of subfractions of panaxadiol ginsenosides, which were extracted from different parts of ginseng root that possess various ratios of panaxadiol to panaxatriol, on the induction of SOD1 gene expression. To explore this possibility, the upstream regulatory region of SOD1 was linked to the chloramphenicol acetyl transferase (CAT) structural gene and introduced into human hepatoma HepG2 cells. We observed that the transcriptional activation of SOD1 was proportional to the contents ratio of panaxadiol ginsensides. Consistent with this results, the total extract portion prepared from the finely-hairy root, which contains the higher ratio of panaxadiol to panaxatriol about 2.6, increased the SODl transcription about 3 fold. This results suggest that the panaxadiol fraction could induce the SOD1 and total extract of the ginseng finely-hairy root would be a useful material as a functional food for the SOD1 inducer.
The objective of this study was to investigate the antioxidative capacity of ethanol extracts from Rumex crispus L. The concentration of R. crispus L. extract at which DPPH radical scavenging activity was inhibited by 50% was 2.15 mg/mL, which was lower than that of ${\alpha}$-tocopherol (0.43 mg/mL), as compared to 100% by pyrogallol as a reference. Total antioxidant status was examined by total antioxidant capacity against ABTS radical reactions. Total antioxidant capacities of R. crispus L. extract at concentrations of 0.1 and 1 mg/mL were 0.47 and 2.33 mM Trolox equivalents, respectively, which were higher than those of ${\alpha}$-tocopherol. Superoxide scavenging activities of R. crispus L. extract at concentrations of 0.1 and 1 mg/mL were 21.5 and 78.9%, respectively, which were not significantly (p>0.05) different from those of catechin. Oxygen radical absorbance capacities of R. crispus L. extract at concentrations of 20 and 100 ${\mu}g/mL$ were 62.5 and 156.4 ${\mu}M$ Trolox equivalents, respectively, which were lower than those of ascorbic acid. Cupric reducing antioxidant capacities of R. crispus L. extract at concentrations of 0.1 and 1 mg/mL were 0.28 and 1.88 mM Trolox equivalents, which were similar or significantly (p<0.05) higher than those of ${\alpha}$-tocopherol, respectively. R. crispus L. extract prevented supercoiled DNA strand breakage induced by hydroxyl radical and peroxyl radical. Total phenolic contents of R. crispus L. extract at concentrations of 0.5 and 5 mg/mL were 0.58 and 3.85 mM gallic acid equivalents, respectively. R. crispus L. extract at concentration of 0.1 and 0.5 mg/mL inhibited 0.2 mM tert-butyl hydroperoxide-induced cytotoxicity by 38.5 and 63.5%, respectively, in HepG2 cell culture system. Thus, strong antioxidant and cytotoxicity-inhibiting effects of R. crispus L. extract seem to be due to, at least in part, the prevention from free radicals-induced oxidation as well as high levels in total phenolic contents.
Background : Chlamydia pneumoniae is one of common causes in upper and lower respiratory infections. Isolating C. pneumoniae from clinical specimens is very difficult due to the characteristics of the organism. Recently, we succeeded in isolating C. pneumoniae from a Korean patient, who suffered from acute pharyngitis. This is the first isolate from a clinical specimen in Korea. Methods : We attained a nasopharyngeal swab from a 22-year-old female patient, and inoculated it on a monolayer of the Hep-2 cell line. After 8 passages, we found the inclusion bodies of C. pneumoniae by an immunofluorescence(IF) test. The species-specific monoclonal antibody IF staining and species-specific PCR were done to confirm the species of the isolate, and electron microscopy was used to characterize the morphology. Results : The isolated was confirmed to be C. pneumoniae by species-specific IF and PCR, and the strain was named LKK-1. The shape of the elementary body was round and with a narrow periplasmic space, as shown by electron microscopy, which is similar to the Japanese strain, but not the Western strain. Conclusion : We succeeded in isolating C. pneumoniae from a 22-year-old patient with acute pharyngitis, which is the first isolate in Korea. In the future, this Korean strain will be useful to the study of C. pneumoniae.
Background: Continuous exposure to high temperatures can lead to heat stress. This stress response alters the expression of multiple genes and can contribute to the onset of various diseases. In particular, heat stress induces oxidative stress by increasing the production of reactive oxygen species. The liver is an essential organ that plays a variety of roles, such as detoxification and protein synthesis. Therefore, it is important to protect the liver from oxidative stress caused by heat stress. Korean ginseng has a variety of beneficial biological properties, and our previous studies showed that it provides an effective defense against heat stress. Methods: We investigated the ability of Korean Red Ginseng and Korean black ginseng extracts (JP5 and BG1) to protect against heat stress using a rat model. We then confirmed the active ingredients and mechanism of action using a cell-based model. Results: Heat stress significantly increased gene and protein expression of oxidative stress-related factors such as catalase and SOD2, but treatment with JP5 (Korean Red Ginseng extract) and BG1 (Korean black ginseng extract) abolished this response in both liver tissue and HepG2 cells. In addition, JP5 and BG1 inhibited the expression of inflammatory proteins such as p-NF-κB and tumor necrosis factor alpha-α. In particular, JP5 and BG1 decreased the expression of components of the NLRP3 inflammasome, a key inflammatory signaling factor. Thus, JP5 and BG1 inhibited both oxidative stress and inflammation. Conclusions: JP5 and BG1 protect against oxidative stress and inflammation induced by heat stress and help maintain liver function by preventing liver damage.
Fu, Zhicheng;Yun, So Yoon;Won, Jong Hoon;Back, Moon Jung;Jang, Ji Min;Ha, Hae Chan;Lee, Hae Kyung;Shin, In Chul;Kim, Ju Yeun;Kim, Hee Soo;Kim, Dae Kyong
Biomolecules & Therapeutics
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v.27
no.2
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pp.193-200
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2019
Ceramide metabolism is known to be an essential etiology for various diseases, such as atopic dermatitis and Gaucher disease. Glucosylceramide synthase (GCS) is a key enzyme for the synthesis of glucosylceramide (GlcCer), which is a main ceramide metabolism pathway in mammalian cells. In this article, we developed a liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method to determine GCS activity using synthetic non-natural sphingolipid C8-ceramide as a substrate. The reaction products, C8-GlcCer for GCS, could be separated on a C18 column by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). Quantification was conducted using the multiple reaction monitoring (MRM) mode to monitor the precursor-to-product ion transitions of m/z $588.6{\rightarrow}264.4$ for C8-GlcCer at positive ionization mode. The calibration curve was established over the range of 0.625-160 ng/mL, and the correlation coefficient was larger than 0.999. This method was successfully applied to detect GCS in the human hepatocellular carcinoma cell line (HepG2 cells) and mouse peripheral blood mononuclear cells. We also evaluated the inhibition degree of a known GCS inhibitor 1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol (PDMP) on GCS enzymatic activity and proved that this method could be successfully applied to GCS inhibitor screening of preventive and therapeutic drugs for ceramide metabolism diseases, such as atopic dermatitis and Gaucher disease.
Objectives : Sparganii Rhizoma is frequently used in traditional herbal medicine for treatment of blood stasis, amenorrhea and functional dyspepsia and has been reported to exhibit anti-oxidant, anti-proliferation and anti-angiogenesis peoperties. In this study, we investigated the cytoprotective effect and underlying mechanism of Sparganii Rhizoma water extract (SRE) against oxidative stress-induced mitochondrial dysfunction and apoptosis in hepatocyte. Methods : To determine the effects of SRE on oxidative stress, we induced synergistic cytotoxicity by co-treatment of arachidonic acid (AA) and iron in the HepG2 cell, a human derived hepatocyte cell line. Results : Treatment of SRE increased relative cell viability and altered the expression levels of apoptosis-related proteins such as Bcl-xL, Bcl-2 and procaspase-3. And SRE also inhibited the mitochondrial dysfunction and excessive reactive oxygen species production induced by AA+iron. In addition, SRE activated of AMP-activated protein kinase (AMPK), a potential target for cytoprotection, by increasing the phosphorylation of AMPKα at Thr-172. Morever, SRE increased phosphorylation of acetyl-CoA carboxylase, a direct downstream target of AMPK. Conclusion : These results indicated that SRE has the ability to protect against oxidative stress-induced hepatocyte damage, which may be mediated with AMPK pathway.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.12
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pp.1672-1678
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2009
This study was carried out to investigate the total polyphenol, total flavonoid content, antioxidant activity, angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activity, $\alpha$-glucosidase inhibitory activity, and antiproliferation activity of the citron seed. The citron seed were separated to hull and embryo, and extracted with n-hexane and 70% ethanol. Antioxidant activity of ethanol extract was higher than that of n-hexane extract. IC50 value for DPPH radical scavenging activity of ethanol extract of hull (CSE1) and embryo (CSE2) were 3.18 and 8.43 mg/mL, and those of total antioxidant activity were 19.96 and 11.28 mg AA eq/g, respectively. ACE inhibitory activity and $\alpha$-glucosidase inhibitory activity on CSE1 showed the highest values of 31.61 and 45.17%, respectively. Antiproliferation effects on the MCF7, HepG2, H460, HCT-116, and PC3 cell line showed the highest values of 14.09, 19.12, 12.29, 9.78, and 9.12% in extract concentration of 5 mg/mL, respectively. These results suggested that citron seed can be used for development of functional food material which have biological activities.
Objectives : It has long been known about the osteogenic effect of CTF-HAS on bone tissues. However, it has not been determined the effect of CTF-HAS on cancer cells. The purpose of this study is to screen the CTF-HAS mediated differentially expressed genes in cancer cells such as SNU484 gastric cancer cell lines. Oligonucleotide microarray approach were employed to screen the differential expression genes. Methods : CTF-HAS was prepared by boiling and stored at $-70^{\circ}C$ until use. Cells were treated with various concentrations of CTF-HAS(0.1, 0.5, 1.5, 10, 20mg/ml) for 24 h. Cytotoxicity was tested by MTT assay. To screen the differentially expressed genes in cancer cells, cells were treated with 1.5mg/ml of CTF-HAS. For oligonucleotide microarry assay, total RNA was used for gene expression analysis using oligonucleotide genechip (Human genome U133 Plus 2.0., Affimatrix Co.). Results : It has no cytotoxic effects on HepG2 cells in all concentration (0.1, 0.5, 1.5, 10,20mg/ml). More than twofold up-regulated genes were 5 genes. The number of more than twofold down-regulated genes was 10. Discussion : This study showed the screening of CTF-HAS mediated differentially regulated genes using combined approaches of oligonucleotide microarray. The screened genes will be used for the better understanding in therapeutic effect of CTF-HAS on cancer field.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.38
no.8
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pp.1008-1015
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2009
The goal of this study was to evaluate the anticancer effect of Rosmarinus officinalis L. In this study induction of apoptosis by methanol extract of rosemary and their fractions were investigated in vitro. In examining the effect of rosemary methanol extract on the inhibition of growth of Hela, HepG2, A549, AGS cells and HT-29 cell, it was found that the methanol extract of rosemary and their fractions demonstrated a cytotoxic effect in a dose-dependent manner; in addition, hexane and chloroform fractions showed a particularly high cytotoxic effect on Hela and AGS cells. The results showed that the hexane and chloroform fractions of rosemary have cytotoxic effect which are related to the activity of the essential oil in the rosemary. Apoptosis in Hela and AGS cells mediated by the hexane and chloroform fractions was associated with the increase of cleaved caspase-3 levels and cleaved PARP. Therefore, with more researches on identification and action mechanism of active compound, the hexane and chloroform fractions are expected to be natural sources for the developments of functional food and medical agents to prevent gastric cancer and uterus cancer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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