HP(2-20) (AKKVFKRLEKLEKLFSKIQNDK) derived from the N-terminus of Helicobacter pylori Ribosomal Protein L1 shows potent antimicrobial activity against bacterial, fungi and cancer cells without cytotoxic effect. In order to investigate the relationships between antimicrobial activity and the structures, several analogues have been designed and synthesized. The structures of these peptides in SDS micelles have been investigated using NMR spectroscopy and they revealed that analogue 3 has the longest, well-defined alpha-helix from Val5 to Trp19. NOESY experiments performed on HP and its analogues in nondeuterated SDS micelles show that protons in the indole ring of Trp16 are in close contact with methylene protons of SDS micelles. In order to probe the position of HP and its analogues relative to the SDS micelles, spin-labeled stearate was added. Large effects are observed for the chemical shifts and the intensities of Phe5, Glu9, Phe12, and Trp16 within the helix region by 16-doxylstearate. This result implies that 16-doxylstearate is located in the center of the micelles and the hydrophobic phase of the amphiphilic ${\alpha}$-helix is located in contact with the acyl chains of the micelles. Also, Lys3 and Lys4 at N-terminus and Lys20 at C-terminus may produce an optimal arrangement for electrostatic interactions between the sulfate head groups of the SDS and the positively charged lysyl N$\sub$3/$\^$+/. Interactions between the indole ring of Trp and the membrane, as well as the amphiphilic ${\alpha}$-helical structure of HP induced by Trp at the C-terminus may allow HP to span the lipid bilayer. These structural features are crucial for their potent antibiotic activities.
It is very important to differentiate of DNA derived from live or dead bacteria within mixed microbial communities in aquatic environments. Ethidium monoazide (EMA) is a DNA intercalating agent and the treatment of EMA with strong visible light cleaves the genomic DNA of bacteria. In dead bacterial cells, EMA intercalates into the genomic DNA, induces the cleavage of DNA, and inhibits the PCR amplification. In this study, we developed the EMA-PCR and EMA real-time PCR to detect the DNA derived from viable Escherichia coli (E.coli) in mixed cultures of live and dead E.coli. The treatment of EMA, $50{\mu}g/mL$, and 650 W visible halogen light exposure for 2 minutes cleaved the genomic DNA derived from heat killed E.coli but did not those of live E.coli. EMA-PCR could detect the DNA from live E.coli in mixed culture samples of live and dead E.coli at various ratio and there was no DNA amplification in only dead E.coli cultures. Similar results were observed in EMA real-time PCR. Further studies are needed to develop various EMA-PCR methods to detect viable waterborne pathogens such as Helicobacter pylori, Giardia lamblia, and so on.
Primary gastric lymphoma (PGL) is derived from mucosa-associated lymphoid tissue (MALT) and it differs from nodal lymphoma in histologic features and biologic behavior. Recent studies have showed that Helicobacter pylori (H.pylori ) infection is closely related to the development of low grade gastric lymphoma, and eradication of the infection induces regression of the tumor. H. pylori infection is known to be important to the development of gastric MALT lymphoma. The aim of this study was to elucidate the histopathological behavior of PGL according to the concept of MALT and to compare the predictive value of tests frequently used for diagnosis of H. pylori. The histological features of gastric lymphoma arising from MALT are the replacement of glands by uniform dense infiltration of centrocyte-like cells in the lamina propria and lymphoidepithelial lesion. H. pylori-associated histologic changes of neutrophilic infiltration, lymphoid follicle or aggregates formation and intestinal metaplasia, and H. pylori immunoreactivity were analyzed. Detection of H. pylori in chronic active gastritis and peptic ulcer suggests a possible role of H. pylori in the pathogenesis. Giemsa, Toluidine blue and Long H&E stains were used in H. pylori detection. Histopathological examination of gastric biopsy specimens revealed lymphoepithelial lesions pathognomonic of MALT lymphoma, and immunohistochemical staining for CD20 was diffusely positive. CD3 was positive in reactive T cells. PAX-5 was negative except the follicle. Bcl-2, cytokeratin, Ki-67, and c-myc were positive. The findings may indicate a predictable transition of low grade to high grade, and c-myc may be used as a valuable marker before molecular pathology diagnosis.
Kim, Sunju;O, Heungchan;Kim, Jeong Ah;Lee, Seung Ho;Lee, Sangkyu
Mass Spectrometry Letters
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제5권3호
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pp.84-88
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2014
Licoricidin isolated from Glycyrrhiza uralensis is known to have anticancer, anti-nephritic, anti-Helicobacter pylori, and antibacterial effects. In this study, a cocktail probe assay and liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) were used to investigate the modulating effect of licoricidin on cytochrome P450 (CYP) enzymes in human liver microsomes. When licoricidin was incubated at $0-25{\mu}m$ with CYP probes for 60 min at $37^{\circ}C$, it showed potent inhibitory effects on CYP2B6-catalyzed bupropion hydroxylation and CYP2C9-catalyzed diclofenac 4'-hydroxylation with half maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) values of 3.4 and $4.0{\mu}m$, respectively. The inhibition mode of licoricidin was revealed as competitive, dose-dependent, and non-time-dependent, and following the pattern of Lineweaver-Burk plots. The inhibitory effect of licoricidin has been confirmed in human recombinant cDNA-expressed CYP2B6 and 2C9 with $IC_{50}$ values of 4.5 and $0.73{\mu}m$, respectively. In conclusion, this study has shown the potent inhibitory effect of licoricidin on CYP2B6 and CYP2C9 activity could be important for predicting potential herb-drug interactions with substrates that mainly undergo CYP2B- and CYP2C9-mediated metabolism.
Osawa, Hiroyuki;Miura, Yoshimasa;Takezawa, Takahito;Ino, Yuji;Khurelbaatar, Tsevelnorov;Sagara, Yuichi;Lefor, Alan Kawarai;Yamamoto, Hironori
Clinical Endoscopy
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제51권6호
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pp.513-526
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2018
White light imaging (WLI) may not reveal early upper gastrointestinal cancers. Linked color imaging (LCI) produces bright images in the distant view and is performed for the same screening indications as WLI. LCI and blue laser imaging (BLI) provide excellent visibility of gastric cancers in high color contrast with respect to the surrounding tissue. The characteristic purple and green color of metaplasias on LCI and BLI, respectively, serve to increase the contrast while visualizing gastric cancers regardless of a history of Helicobacter pylori eradication. LCI facilitates color-based recognition of early gastric cancers of all morphological types, including flat lesions or those in an H. pylori-negative normal background mucosa as well as the diagnosis of inflamed mucosae including erosions. LCI reveals changes in mucosal color before the appearance of morphological changes in various gastric lesions. BLI is superior to LCI in the detection of early esophageal cancers and abnormal findings of microstructure and microvasculature in close-up views of upper gastrointestinal cancers. Excellent images can also be obtained with transnasal endoscopy. Using a combination of these modalities allows one to obtain images useful for establishing a diagnosis. It is important to observe esophageal cancers (brown) using BLI and gastric cancers (orange) surrounded by intestinal metaplasia (purple) and duodenal cancers (orange) by LCI.
Shah, Shailja C.;Nakata, Chiaki;Polydorides, Alexandros D.;Peek, Richard M. Jr;Itzkowitz, Steven H.
Journal of Preventive Medicine and Public Health
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제52권3호
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pp.179-187
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2019
Objectives: In the USA, certain races and ethnicities have a disproportionately higher gastric cancer burden. Selective screening might allow for earlier detection and curative resection. Among a USA-based multiracial and ethnic cohort diagnosed with non-cardia gastric cancer (NCGC), we aimed to identify factors associated with curable stage disease at diagnosis. Methods: We retrospectively identified endoscopically diagnosed and histologically confirmed cases of NCGC at Mount Sinai Hospital in New York City. Demographic, clinical, endoscopic and histologic factors, as well as grade/stage of NCGC at diagnosis were documented. The primary outcome was the frequency of curable-stage NCGC (stage 0-1a) at diagnosis in patients with versus without an endoscopy negative for malignancy prior to their index exam diagnosing NCGC. Additional factors associated with curable-stage disease at diagnosis were determined. Results: A total of 103 racially and ethnically diverse patients were included. Nearly 38% of NCGC were stage 0-Ia, 34% stage Ib-III, and 20.3% stage IV at diagnosis. A significantly higher frequency of NCGC was diagnosed in curable stages among patients who had undergone an endoscopy that was negative for malignancy prior to their index endoscopy that diagnosed NCGC, compared to patients without a negative endoscopy prior to their index exam (69.6% vs. 28.6%, p=0.003). A prior negative endoscopy was associated with 94.0% higher likelihood of diagnosing curable-stage NCGC (p=0.003). No other factors analyzed were associated with curablestage NCGC at diagnosis. Conclusions: Endoscopic screening and surveillance in select high-risk populations might increase diagnoses of curable-stage NCGC. These findings warrant confirmation in larger, prospective studies.
Kim, Hyeri;Cho, Jin Ho;Song, Minho;Cho, Jae Hyoung;Kim, Sheena;Kim, Eun Sol;Keum, Gi Beom;Kim, Hyeun Bum;Lee, Ju-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권12호
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pp.1701-1708
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2021
Food safety is the most important global health issue due to foodborne pathogens after consumption of contaminated food. Foodborne bacteria such as Escherichia coli, Salmonella enterica, Staphylococcus aureus, Campylobacter spp., Bacillus cereus, Vibrio spp., Yersinia enterocolitica and Clostridium perfringens are leading causes of the majority of foodborne illnesses and deaths. These foodborne pathogens often come from the livestock feces, thus, we analyzed fecal microbial communities of three different livestock species to investigate the prevalence of foodborne pathogens in livestock feces using metagenomics analysis. Our data showed that alpha diversities of microbial communities were different according to livestock species. The microbial diversity of cattle feces was higher than that of chicken or pig feces. Moreover, microbial communities were significantly different among these three livestock species (cattle, chicken, and pig). At the genus level, Staphylococcus and Clostridium were found in all livestock feces, with chicken feces having higher relative abundances of Staphylococcus and Clostridium than cattle and pig feces. Genera Bacillus, Campylobacter, and Vibrio were detected in cattle feces. Chicken samples contained Bacillus, Listeria, and Salmonella with low relative abundance. Other genera such as Corynebacterium, Streptococcus, Neisseria, Helicobacter, Enterobacter, Klebsiella, and Pseudomonas known to be opportunistic pathogens were also detected in cattle, chicken, and pig feces. Results of this study might be useful for controlling the spread of foodborne pathogens in farm environments known to provide natural sources of these microorganisms.
2'-Fucosyllactose (2'-FL), the most abundant fucosylated oligosaccharide in human milk, has multiple beneficial effects on human health. However, its biosynthesis by metabolically engineered Escherichia coli is often hampered owing to the insolubility and instability of α-1,2-fucosyltransferase (the rate-limiting enzyme). In this study, we aimed to enhance 2'-FL production by increasing the expression of soluble α-1,2-fucosyltransferase from Helicobacter pylori (FucT2). Because structural information regarding FucT2 has not been unveiled, we decided to improve the expression of soluble FucT2 in E. coli via directed evolution using a protein solubility biosensor that links protein solubility to antimicrobial resistance. For such a system to be viable, the activity of kanamycin resistance protein (KanR) should be dependent on FucT2 solubility. KanR was fused to the C-terminus of mutant libraries of FucT2, which were generated using a combination of error-prone PCR and DNA shuffling. Notably, one round of the directed evolution process, which consisted of mutant library generation and selection based on kanamycin resistance, resulted in a significant increase in the expression level of soluble FucT2. As a result, a batch fermentation with the ΔL M15 pBCGW strain, expressing the FucT2 mutant (F#1-5) isolated from the first round of the directed evolution process, resulted in the production of 0.31 g/l 2'-FL with a yield of 0.22 g 2'-FL/g lactose, showing 1.72- and 1.51-fold increase in the titer and yield, respectively, compared to those of the control strain. The simple and powerful method developed in this study could be applied to enhance the solubility of other unstable enzymes.
Jong-Min Park;Young-Min Han;Migyeong Jeong;Eun Jin Go;Napapan Kangwan;Woo Sung Kim;Ki Baik Hahm
Journal of Digestive Cancer Research
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제4권1호
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pp.1-9
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2016
The abundance of multi-drug resistance ATPase binding cassette and deranged self-renewal pathways shown in cancer stem cells (CSCs) played a crucial role in tumorigenesis, tumor resistance, tumor recurrence, and tumor metastasis. Therefore, elucidation of CSCs biology can improve diagnosis, enable targeted treatment, and guide the follow up of GI cancer patients. In order to achieve chemoquiescence, seizing cancer through complete ablation of CSCs, CSCs are rational targets for the design of interventions that will enhance responsiveness to traditional therapeutic strategies and contribute in the prevention of local recurrence as well as metastasis. However, current cancer treatment strategies fail to either detect or differentiate the CSCs from their non-tumorigenic progenies mostly due to the absence of specific biomarkers and potent agents to kill CSCs. Recent advances in knowledge of CSCs enable to produce several candidates to ablate CSCs in gastrointestinal (GI) cancers, especially cancers originated from inflammation-driven mutagenesis such as Barrett's esophagus (BE), Helicobacter pylori-associated gastric cancer, and colitis-associated cancer (CAC). Our research teams elucidated through revisiting old drugs that proton pump inhibitor (PPI) and potassium competitive acid blocker (p-CAB) beyond authentic acid suppression, chloroquine for autophage inhibition, sonic hedgehog (SHH) inhibitors, and Wnt/β-catenin/NOTCH inhibitor can ablate CSCs specifically and efficiently. Furthermore, nanoformulations of these molecules could provide an additional advantage for more selective targeting of the pathways existing in CSCs just like current molecular targeted therapeutics and sustained action, while normal stem cells intact. In this review article, the novel approach specifically to ablate CSCs existing in GI cancers will be introduced with the introduction of explored mode of action.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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