• 제목/요약/키워드: HeLa S3 cells

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삼해주와 시판 곡주의 생리 기능성 및 세포 독성 효과 (Physiological Functionality and Cytotoxic Effect of Korean Traditional Noble Wine, Samhaeju, and Commercial Rice Wine on Various Tumor Cell Lines)

  • 임채란;손희진;조인영;김계원;최수진;김인선;한기영;최진영;노봉수
    • 한국식품과학회지
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    • 제41권6호
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    • pp.687-693
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    • 2009
  • 잊혀져가고 있는 전통주의 우수함을 알리고자 한국의 전통 반가주인 삼해주를 제조하고 시판되고 있는 곡주와 비교 실험하며, 생리활성 및 세포독성에 관한 연구를 진행하였다. 기존의 문헌에 소개된 방법을 변형하여 3가지 종류의 삼해주를 제조하였으며, 시중에서 곡주 5종을 구입하여 실험하였다. DPPH 라디칼 제거능과 아질산염 소거능은 곡주 G가 가장 뛰어났으며, ABTS 라디칼 제거능은 삼해주가 가장 우수하였다. 삼해주 중에서는 C 시료가 DPPH 라디칼 제거능, 아질산염 소거능, ABTS 라디칼 소거능이 가장 뛰어났다. 혈전용해능의 경우 삼해주 A-C가 13-17U로 다른 곡주에 비해 그 활성이 높게 나타났다. 각 시료에 대하여 10-160배까지 단계적으로 희석하여 HeLa, A549, L-132 세포에 처리하였을 때, 인체유래 자궁암 세포주인 HeLa 세포의 경우 10배 희석액에서 삼해주가 강한 세포 독성을 보였고, A549 세포의 경우 10배 희석액에서 삼해주의 세포독성 효과가 크나 시료에 따라 그 편차가 심하였다. L-132의 경우 10배 희석액에서 삼해주의 세포독성 효과가 다른 시료에 비해 강하였으나, 다른 암세포에 비해 약한 것을 알 수 있다. 본 연구의 결과에 의하면 삼해주에 존재하는 미지의 약리 성분이 생리 활성 및 암세포의 성장에 영향을 미치는 것으로 판단되었다. 이는 삼해주 제조 시 사용된 누룩과 오랜 발효 기간에 의한 영향으로 생각되며, 누룩에 대한 연구가 더 진행되어야 할 것으로 여겨진다.

Interaction between Parasitophorous Vacuolar Membrane-associated GRA3 and Calcium Modulating Ligand of Host Cell Endoplasmic Reticulum in the Parasitism of Toxoplasma gondii

  • Kim, Ji-Yeon;Ahn, Hye-Jin;Ryu, Kyung-Ju;Nam, Ho-Woo
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제46권4호
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    • pp.209-216
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    • 2008
  • A monoclonal antibody against Toxoplasma gondii of Tg556 clone (Tg556) blotted a 29 kDa protein, which was localized in the dense granules of tachyzoites and secreted into the parasitophorous vacuolar membrane (PVM) after infection to host cells. A cDNA fragment encoding the protein was obtained by screening a T. gondii cDNA expression library with Tg556, and the full-length was completed by 5'-RACE of 2,086 bp containing an open reading frame (ORF) of 669 bp. The ORF encoded a polypeptide of 222 amino acids homologous to the revised GRA3 but not to the first reported one. The polypeptide has 3 hydrophobic moieties of an N-terminal stop transfer sequence and 2 transmembrane domains (TMD) in posterior half of the sequence, a cytoplasmic localization motif after the second TMD and an endoplasmic reticulum (ER) retrival motif in the C-terminal end, which suggests GRA3 as a type III transmembrane protein. With the ORF of GRA3, yeast two-hybrid assay was performed in HeLa cDNA expression library, which resulted in the interaction of GRA3 with calcium modulating ligand (CAMLG), a type II transmembrane protein of ER. The specific binding of GRA3 and CAMLG was confirmed by glutathione S-transferase (GST) pull-down and immunoprecipitation assays. The localities of fluorescence transfectionally expressed from GRA3 and CAMLG plasmids were overlapped completely in HeLa cell cytoplasm. In immunofluorescence assay, GRA3 and CAMLG were shown to be co-localized in the PVM of host cells. Structural binding of PVM-inserted GRA3 to CAMLG of ER suggested the receptor-ligand of ER recruitment to PVM during the parasitism of T. gondii.

Taxol-Induced Apoptosis and Nuclear Translocation of Mitogen-Activated Protein (MAP) Kinase in HeLa Cells

  • Kim, Sung-Su;Kim, Yoon-Suk;Jung, Yon-Woo;Choi, Hyun-Il;Shim, Moon-Jeong;Kim, Tae-Ue
    • BMB Reports
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    • 제32권4호
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    • pp.379-384
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    • 1999
  • Taxol, a natural product with significant anti-tumor activity, stabilizes microtubules and arrests cells in the G2/M phase of the cell cycle. It has been reported that taxol has additional effects on the cell such as an increase in tyrosine phosphorylation of proteins and activation of mitogen-activated protein (MAP) kinase. This phosphorylated kinase translocates into the nucleus and phosphorylates its substrate c-jun, c-fos, ATF2, and ATF3. The MAP kinase family is comprised of key regulatory proteins that control the cellular response to both proliferation and stress signals. First examination was cytotoxicity and apoptosis-induced concentration with paclitaxel in HeLa cell. A half-maximal inhibition of cell proliferation ($IC_{50}$) occurred at 13 nM paclitaxel. When DNA fragmentation was analyzed by agarose gel electrophoresis, a nucleosomal ladder became evident 24 h after a taxol (50 nM) addition to the cells. In addition, an apoptotic body was detected by electron microscopy. Taxol-treated cells were arrested at the S phase at 10 nM. Treatment of 50 nM taxol activated the extracellular signal-regulated protein kinase (ERK1), and a fraction of the activated MAP kinases entered the nucleus. It was also discovered that nucleus substrates c-jun was phosphorylated and activated in the cell. The activated ERK1 could subsequently translocate into the nucleus and phosphorylate its substrate c-jun as well. This study suggests that taxol-induced apoptosis might be related with signal transduction via MAP kinases.

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해양심층수 및 다시마 분말을 첨가하여 제조한 간장의 생리활성 효과 (Biological Activities of Soybean Sauce (Kanjang) Supplemented with Deep Sea Water and Sea Tangle)

  • 함승시;김수현;유수정;오현택;최현진;정미자
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제15권2호
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    • pp.274-279
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    • 2008
  • 해양심층수 간장 및 일반간장을 제조하여 항돌연변이원성과 세포독성을 측정하였으며 sarcoma-180 cell을 이용하여 in vivo에서 항암효과를 살펴보았다. S. typhimurium TA98과TA100 균주를 이용한 실험에서 모든 시료에서 돌연변이원성이 없었으며, 항돌연변이원성 실험에서는 직접변이원인 MNNG($0.4{\mu}g$/plate)의 경우 TA100 균주에서 해양심층수간장의 시료농도 $200{\mu}g$/plate에서 90.9%의 높은 억제효과를 나타내었으며 4NQO($0.15{\mu}g$/plate)에 대해서는 같은 시료농도에서 62.0%의 억제효과를 나타내었다. 그리고 4NQO의 경우 TA98 균주에 대해서 해양심층수 간장은 61.7%의 억제효과를 나타내었으며 모든 시료는 농도 의존적으로 억제하는 것으로 나타났다. 세포독성 효과를 알아보기 위하여 HeLa, Hep3B, AGS, A549와 MCF-7을 사용하였다. 각 시료 추출물의 암세포 성장효과를 조사한 결과, 해양심층수 간장이 1 mg/mL의 농도에서 각각 69.4%, 70.5%, 55.6%, 82.1% 및 73.2%의 억제율을 나타내었다. 그리고 해양심층수 간장은 고형암 성장 억제 실험에서 대조군에 비해서 40.9%의 고형암 성장 억제효과를 나타내었다.

유전독성시험에 의한 녹용약침의 안전성 연구 (Safety study on Genetic Toxicity of Cervi Pantotrichum Cornu Herbal acupuncture Solution(CPCHA))

  • 서부일;변부형
    • 대한본초학회지
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    • 제20권2호
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    • pp.1-6
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    • 2005
  • Objectives : The purpose of this study is to investigate genetic toxicity of Cervi pantotrichum Cornu herbal acupuncture solution(CPCHA). Methods : In this study, a series of investigation have been carried out to analyze the effects of Cervi pantotrichum Cornu herball acupuncture solution(CPCHA) on colony forming ability of NIH3T3cells, Hela cells and adrenorectal coloncell for genetic toxicity test. Results and Conclusions : From the above results, it is suggested that Cervi pantotrichum Cornu herball acupuncture solution(CPCHA) was limited 0.5-10ug/ml by test. Cervi pantotrichum Cornu herball acupuncture solution(CPCHA) did not exert the protective role to the genetic toxicity in kinds of cell lines used in this study. From these results, Cervi pantotrichum Cornu herbal aqua-acupuncture solution needs further study to prove it's function in cell culture system.

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Cytotoxic Effect of Bee (A. mellifera) Venom on Cancer Cell Lines

  • Borojeni, Sima Khalilifard;Zolfagharian, Hossein;Babaie, Mahdi;Javadi, Iraj
    • 대한약침학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.212-219
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    • 2020
  • Objectives: Nowadays cancer treatment is an important challenge in the medical world that needs better therapies. Many active secretions produced by insects such as honey bees used to discover new anticancer drugs. Bee venom (BV) has a potent anti inflammatory, anti cancer and tumor effects. The aim of present study is evaluation of anticancer effects induced by Apis mellifera venom (AmV) on cell Lines. Methods: AmV was selected for study on cancer cell lines. Total protein, molecular weight and LD50 of crude venom were determined. Then, cells were grown in Dulbecco's Modified Eagle medium supplemented with 10% fetal bovine serum and 1% antibiotics. The A549, HeLa and MDA-MB-231 cell Lines were exposed by different concentration of AmV. The morphology of cells was determined and cell viability was studed by MTT assay. Evaluation of cell death was determined by and DNA fragmentation. Results: The results from MTT assay showed that 3.125 ㎍/mL of A549, 12.5 for HeLa and 6.25 ㎍/mL of MDA-MB-231 killed 50% of cells (p < 0.05). Morphological analysis and the results from hoescht staining and DNA fragmentation indicated that cell death induced by AmV was significantly apoptosis. Conclusion: The data showed that using lower dosage of AmV during treatment period cause inhibition of proliferation in time and dose dependant manner. Findings indicated that some ingredients of AmV have anticancer effects and with further investigation it can be used in production of anticancer drugs.

다섯 가지 해조류 에탄올 추출물의 항돌연변이 활성 및 암세포 성장억제 효과 (Antimutagenic and Cytotoxic Effects of Ethanol Extracts from Five Kinds of Seaweeds)

  • 김성애;김진;우미경;곽충실;이미숙
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.451-459
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    • 2005
  • 한국과 일본을 비롯한 극동아시아 지역에서 널리 사용되고 항암효과가 있는 것으로 알려진 톳, 다시마, 미역, 파래, 김을 대상으로 각 해조류 에탄을 추출물을 Ames test를 이용하여 돌연변이 유발 억제능을 검색하고, MTT assay를 이용하여 HeLa cell, MCF-7 cell과 SNU-638 cell에 대한 암세포 성장억제 효과를 비교한 결과는 다음과 같다. 5종의 해조류 에탄올 추출물의 2-anthramine에 대한 간접작용 돌연변이능 억제효과를 S. Typhimurium TA 98에서 측정한 결과, 톳$(100\%)$, 다시마$(94.2\%)$가 3.5 mg/plate에서, 파래 $(68.5\%)$가 4.5 mg/plate에서 효과적인 돌연변이 억제능을 나타냈고, S. Typhimurium TA 100에서는 파래$(100\%)$, 톳$(100\%)$, 다시마$(94.1\%)$가 각각 1.5 mg/plate, 2.5 mg/plate, 4.5 mg/plate의 농도에서 최대 돌연변이 억제 효과를 보였다. 반면 미역과 김은 간접작용 돌연변이 억제 효과가 없는 것으로 나타났다. 직접 작용 항돌연변이능을 S. Typhimurium TA 98로 측정한 결과, 톳, 미역과 파래 모두 4.5 mg/plate의 농도에서 각각 $83\%,\;73\%,\;73\%$의 저해율을 보여 2-nitro-flouorene의 돌연변이능에 대한 저해율이 비교적 높은 것으로 나타났다. 또한 S. Typhimurium TA 100에서 sodium azide의 돌연변이능에 대한 저해효과가 가장 큰 해조류는 톳, 다시마와 파래로 세 가지 해조류 모두 3.5 mg/plate의 농도에서 $100\%$ 저해율을 보였다. 반면, S. Typhimurium TA 98에서 미역과 김은 4.5 mg/plate의 농도에서 각각 $73\%,\;50%$ 정도의 저해율을 나타냈고, S. Typhimurium TA 100에서는 $0\%$ 저해율을 보여 직접작용돌연변이에 대한 저해 능력이 적은 것으로 나타났다. MTT assay를 이용하여 HeLa cell과 MCF-7 cell, SNU-638 cell에 대한 암세포 성장억제 효과를 관찰한 결과, 5종 해조류의 에탄을 추출물 모두 암세포 증식을 억제하였다. HeLa cell의 성장을 $90\%$ 이상 저해한 해조류는 톳, 다시마, 미역, 파래였고, 그 효과를 건조무게로 비교하면 파래, 미역, 다시마, 톳의 순이었다. 김은 $56\%$ 저해율을 나타냈다. MCF-7 cell에 대한 세포 성장억제 효과 역시 $90\%$ 이상 저해율을 나타낸 해조류는 파래, 미역, 다시마, 톳의 순이었고, 김은 $50\%$의 저해율을 나타냈다. SNU-638 cell에 대한 세포 성장억제 정도는 HeLa cell이나 MCF-7 cell에 대한 세포성장 억제 효과보다는 다소 낮았다. 저해율이 $70\%$ 이상인 해조류는 파래, 미역, 다시마, 톳이었고, 김은 $68\%$로 나타나 해조류 간에 차이는 적었다. 이상에서 Ames test와 MTT assay를 통해 해조류 에탄올 추출물의 항돌연변이 효과와 암세포 성장억제 효과를 검색한 결과, 톳, 파래와 다시마는 항돌연변이 효과 및 암세포 성장억제 효과가 우수한 것으로 나타났고, 암세포에 대한 항암 효과는 각 시료마다 정도의 차이는 있으나 5종의 해조류 모두 암세포 증식을 억제하는 것으로 나타났다. 이 결과는 해조류가 개발 가능한 고부가가치의 기능성식품 소재임을 확인한 것으로서, 이를 위해서는 갈조류, 녹조류, 홍조류 등의 해조류에 함유된 암예방 또는 항암작용을 가진 새로운 생리활성물질을 탐색할 필요가 있다.

Anticancer activity of subfractions containing pure compounds of Chaga mushroom (Inonotus obliquus) extract in human cancer cells and in Balbc/c mice bearing Sarcoma-180 cells

  • Chung, Mi-Ja;Chung, Cha-Kwon;Jeong, Yoon-Hwa;Ham, Seung-Shi
    • Nutrition Research and Practice
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    • 제4권3호
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    • pp.177-182
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    • 2010
  • The Chaga mushroom (Inonotus obliquus) has been used in folk medicine to treat cancers. However, limited information exists on the underlying anticancer effects of the major component of I. obliquus in vivo. We hypothesize that the pure compounds ($3{\beta}$-hydroxy-lanosta-8,24-dien-21-al, inotodiol and lanosterol, respectively) separated from I. obliquus would inhibit tumor growth in Balbc/c mice bearing Sarcoma-180 cells (S-180) in vivo and growth of human carcinoma cells in vitro. To test this hypothesis, the growth inhibition of each subfraction isolated from I. obliquus on human carcinoma cell lines (lung carcinoma A-549 cells, stomach adenocarcinoma AGS cells, breast adenocarcinoma MCF-7 cells, and cervical adenocarcinoma HeLa cells) was tested in vitro. Then, after S-180 implantation, the mice were fed a normal chow supplemented with 0, 0.1 or 0.2 mg of subfraction 1, 2 or 3 per mouse per day. All of the subfractions isolated from I. obliquus showed significant cytotoxic activity against the selected cancer cell lines in vitro. Subfraction 1 was more active than subfraction 2 and subfraction 3 against the A549, AGS and MCF-7 cancer cell lines in vitro. In in vivo results, subfraction 1 isolated from I. obliquus at concentrations of 0.1 and 0.2 mg/mouse per day significantly decreased tumor volume by 23.96% and 33.71%, respectively, as compared with the control. Subfractions 2 and 3 also significantly inhibited tumor growth in mice bearing S-180 as compared with the control mouse tumor. Subfraction 1 isolated from I. obliquus showed greater inhibition of tumor growth than subfractions 2 and 3, which agrees well with the in vitro results. The results suggest that I. obliquus and its compounds in these subfractions isolated from I. obliquus could be used as natural anticancer ingredients in the food and/or pharmaceutical industry.

메탄올로 추출한 여주 분획성분의 항균 및 항발암 효과 (The Effects on Antimicrobial and Anticarcinogenic Activity of Momordica Charantia L.)

  • 배송자
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제35권8호
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    • pp.880-885
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    • 2002
  • 중국에서 약용 및 음용식물로 사용되고 있는 여주 (Mo-mordica charantia L.)를 이용하여 추출, 분획한 후 항균, 항암 및 암예방 효과를 살펴보았다 여주의 MCU층을 제외한 모든 층에서 항균력을 보였으며 특히 Staphylococru aureus의 MCMEE층에서 가장 높은 항균활성을 나타내었다 실험에 사용한 각균에 대한 여주 분획물의 암세포 증식 억제 효과를 MTT assay로 실험한 결과, 3종의 인체 암세포 HepG2, HeLa 및 MCF극에서 모두 여주의 ethyleth-er 분획층인 MCMEE와 ethylacetate 분획층인 MCMEA 층에서 아주 높은 암세포 증식억제 효과를 나타내었다. HepG2세포를 이용하여 암예방 QR 유도 활성을 측정한 결과, 다른 분회층에 비해 비극성 용매층인 hexane 분획층 MCMH에서 아주 높은 QR 유도를 활성시키는 것으로 나타났다. 본 실험 결과, 여주에는 식품 보존과 항균제로서의 개발가능성이 보이며. 항발암 효과를 보기위한 암세포 증식 억제 효과는 ethylether층 MCMEE과 ethylacetate층 MCMEA층에서 월등하였고, 비극성 용매층인 hexane 분획층에는 암발생을 예방하는 quinone reductase inducer가 있는 것으로 사료되며. 나아가 단계적인 생리활성 연구의 분리 동정이 계속 이루어져야 할 것으로 사료된다.