Advancements in the field of proteomics have provided great opportunities for the development of diagnostic and therapeutic tools against human diseases. In this study, we analyzed haptoglobin and amyloid A protein levels of vivax malaria patients with combinations of depletion of the abundant plasma proteins, 2-dimensional gel electrophoresis (2-DE), image analysis, and mass spectrometry in the plasma between normal healthy donors and vivax malaria patients. The results showed that the expression level of haptoglobin had become significantly lower or undetectable in the plasma of vivax malaria patients due to proteolytic cleavage when compared to healthy donors on 2-DE gels. Meanwhile, serum amyloid A protein was significantly increased in vivax malaria patient's plasma with high statistical values. These 2 proteins are common acute phase reactants and further large scale evaluation with a larger number of patient's will be necessary to establish the possible clinical meaning of the existential changes of these proteins in vivax malaria patients. However, our proteomic analysis suggests the feasible values of some plasma proteins, such as haptoglobin and serum amyloid A, as associating factor candidates for vivax malaria.
Many reports have stated that some of the pathogenic bacteria can obtain iron from ferroproteins, such as cytochrome C, ferritin, hemin, hemoglobin, and myoglobin. These reports prompted us to determine if an opportunistic pathogenic fungus, Candida albicans, can utilize ferroproteins to circumvent the iron-regulatory effect of transferrin. The following assays were carried out to measure in vitro growth stimulation by the ferroproteins: as an initial step, C. albicans was cultured in iron-free (pretreated with apotransferrin for 24h) culture medium. Once Candida albicans yeast cell growth reached stasis from iron starvation, individual ferroproteins were added to the culture media. Results showed that hemin, hemoglobin, and myoglobin supported a partial growth recovery. Additional studies with haptoglobin, a serum protein that interacts with the globin moiety of certain ferroproteins, established that C. albicans could obtain iron from the haptoglobin-ferroprotein complexes. These data indicate that the heme part of the ferroproteins is the source of iron. This implies that heme oxygenase, CaHMX1 might be involved in bringing about dissociation of heme-containing protein for iron-acquisition. In addition, anticandidal activity of transferrin takes place not only by the process of iron regulation, but also by direct interaction with the yeast cells.
Kim, Myung-Jick;Chung, Ho-Young;Cho, Kyu-Ho;Jeon, Gi-Jun;Kim, Jin-Hyung
Journal of Embryo Transfer
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v.23
no.3
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pp.197-201
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2008
In order to provide information of genetic variants for Haptoglobin (Hp) gene, which may be related to weight traits in pig, a total of 235 animals from National Institute of Animal Science (NIAS) were screened with 3 primers. The primer sequences were selected using the porcine cDNA sequences based on NM_214000, and the exon boundaries were estimated. Genetic variants were observed using direct sequencing analysis, and there were 9 SNPs detected at nucleotide positions 503 (A/G), 509 (A/G), 709 (C/T), 734 (C/A), 742 (G/A), 769 (A/G), 840 (C/T), 876 (C/T) and 882 (C/A). All the SNPs were located in coding regions, and mutations caused amino acid changes at nucleotide positions 503, 509, 734, 742 and 769. Allele frequencies of SNPs were estimated for all segments. The SNPs at nucleotide position 509 (p<0.0001) and 734 (p<0.05) were significantly associated with average daily gain, but no significance was observed with other SNPs. From the results, the identified SNPs may be a useful candidate marker for the porcine weight gain traits.
Genetic polymorphism of transferrin $(T_f)$ subtypes in Jeju population was studied by isoelectric focusing of human sera on polyacrylamide gels under high voltage, and haptolobin (Hp) polymorphism in Seoul and Jeju population was studied by polyacrylamide gel electrophoresis. Among 946 normal samples, three common types of transferrin, $T_{f}C_{1}, T_{f}C_{1}-C_{2} and T_{f}C_{2}$ were observed with some variants migrating slower than $T_{f}C$ subtypes, while among 139 patient (hepatitis) samples, only three common types were found. The gene frequencies were calculated as follows; in normal population, $T_{f}C^{1}$ was 0.7220; $T_{f}C^{2}, 0.2743; T_{f}D^{Jeju}, 0.0037$, and in patient population, $T_{f}C^{1} was 0.7194; T_{f}C^{2}, 0.2806$ respectively. Among 460 samples in Seoul and 502 in Jeju population, three types of haptoglobin, Hp 1-1, Hp 2-1 and Hp 2-2 were observed. The gene frequency of $Hp^1$ was 0.304, $Hp^2$, 0.696 in Seoul and in Jeju, $Hp^1$ was 0.269 and $Hp^2$, 0.731, respectively. The frequencies of the genes and the polymorphic phenotypes were discussed comparatively with the other populations.
The acute phase serum protein response is a well-known general indicator of inflammation, trauma or other pathological conditions and its relevance for the monitoring of the health status of domestic animals is being increasingly realized. The changes in serum protein composition which occur after tissue damage represent a part of the systemic response of the injured animals which is mediated by pro-inflammatory cytokines such as TNF-$\alpha$, IL-6 and IL-1. These responses play a vital role in containing the tissue damage and enhancing the processes of repair and resolution. From a clinical perspective, the assay of acute phase proteins can provide a method for detecting inflammation. In animals, the most sensitive acute phase proteins are haptoglogin, serum amyloid A and at-acid glycoprotein in response to inflammatory condition. The aim of this study was to assess the diagnostic value of the concentrations of serum amyloid A(SAA) and haptoglobin(HP) in serum of pigs infected with Aujeszky's disease virus(ADV). Fifty pigs infected with ADV and 5 normal pigs were used in this experiment. The mean serum concentration of Shh of pigs infected with ADV was 96.8 $\pm$ 7.1 $\mu\textrm{g}$/㎖(range, 36.0∼187.5 $\mu\textrm{g}$/㎖) and that of normal pigs was 42.9$\pm$3.3 $\mu\textrm{g}$/㎖(range, 17.3∼127.8 $\mu\textrm{g}$/㎖). The mean serum concentration of HP of pigs infected with ADV was 1,164.4 $\pm$ 96.9 $\mu\textrm{g}$/㎖ (range, 790.2∼l,769.2 $\mu\textrm{g}$/㎖) and that of normal pigs was 675.4 $\pm$ 56.3 $\mu\textrm{g}$/㎖ (range, 650.0-690.4 $\mu\textrm{g}$/㎖). The mean concentrations of SAA and HP in serum of pigs infected with ADV compared with those of normal pigs showed approximately a two-fold. It was concluded that the concentrations of Shh and HP in serum may proved to be diagnostic marker of Aujeszky's disease.
This study was performed to investigate the effect of sodium intake on blood pressure and blood parameters. 20 young adult women were fed the diets containing 290.5 mEq (high-Na diet) and 51.3 mEq (low-Na diet) Na for 6 days, respectively. BMI, DBP, and MBP were significantly lower in low-Na diet than those in high-Na diet. 20 subjects were divided into 3 groups according to the salt-sensitivity. In salt-sensitive group, decreases in SBP, DBP, and MBP by low-Na diet were shown. And there were not significant difference in blood pressure of salt-resistant group between high- and low-Na diet. In count-reactive group, MBP in low-Na diet was significantly higher than that in high-Na diet. Hemoglobin, creatinine, uric acid, and haptoglobin levels in serum were significantly higher in low-Na diet than those in high-Na diet. Among groups with different salt-sensitivity, increments of haptoglobin by low-Na diet were shown in salt-sensitive and counter-reactive groups. Actually, low sodium diet affects not only the blood pressure, but other biochemical parameters which in turn affect an individual overall health. Also salt-sensitivity should be considered as an important determinant. Therefore, for the patients who need restricted Na diet, it would be suggested that various biochemical changes and individual salt-sensitivity should be carefully considered along with dietary Na manipulation.
Haptoglobin (Hp) is a glycoprotein that is produced by hepatic cells and secreted into the circulation. While studying the physiologic functions of Hp, we found that Hp synthesized in THP-1 monocytic cells was largely retained within cells, although Hp is considered a secretory protein. To investigate the molecular mechanism on Hp secretion in THP-1 cells, in the present study, we examined the effect of protein kinase C (PKC) on Hp secretion. When several inhibitors of PKC isoforms were tested, only Rottlerin, a specific inhibitor of PKC-$\delta$, completely blocked Hp secretion from cells to culture medium. To confirm the role of PKC-$\delta$ in Hp secretion, Hp-overexpressing COS7 cells were transiently transfected with a wild-type or a dominantnegative mutant of the PKC-$\delta$ gene. Mutant PKC-$\delta$ significantly inhibited Hp secretion, whereas the wild-type gene slightly increased Hp secretion. These results demonstrate that the PKC-$\delta$ signal is involved in Hp secretion.
Quartz crystal microbalance immunosensor has a capacity to perform a label-free and real time detection of a trace amount of analyte through the specific interaction between antibody and antigen. However, immobilization of antibody molecules on the sensor surface is a troublesome procedure for researchers who are not experienced in chemistry. Protein G has a specific affinity to antibody and would serve as a capturing agent for antibody when immobilized on the sensor surface. In this work, we prepared a protein G sensor chip by immobilizing protein G on the surface of quartz crystal microbalance and examined its capability to detect human haptoglobin or human transferrin with unpurified corresponding antiserum. Specific and dose dependent response was observed when the protein G chip was used for detection of antigens after saturated with antiserum. We also verified several advantageous aspects of the protein G chip such as improved flexibility and sensitivity.
Mature haptoglobin (Hp) is a plasma glycoprotein and acts as an antioxidant by scavenging cell-free hemoglobin (Hb). Prohaptoglobin (proHp) is an unprocessed Hp precursor which is present a little in circulation. However, the biological function of proHp remains unknown. To investigate the structural and functional differences between proHp and Hp, we prepared recombinant proHp isoforms and compared their sialic acid content and Hb-binding capacity with those of mature isoforms. When proHp samples were analyzed by Western blot under non-reducing conditions, proHp1 was detected as one band of approximately 130 kDa and proHp2 as multiple bands >200 kDa, in the manner of mature Hp1-1 and Hp2-2, respectively. On the native polyacrylamide gel under non-reducing and non-denaturing conditions, both proHp isoforms migrated more slowly than their mature Hp counterparts. In addition, the lectin-based ELISA assay demonstrated that the content of sialic acid in proHp1 and proHp2 was much less than in Hp1-1 and Hp2-2. The Hb-binding capacity of proHp was also lower than those of mature Hp. These findings indicate that proHp and Hp are similar in the size and polymerization pattern, but different in sialic acid content and Hb-binding activity. It suggests precursor proHp may exert different functions in circulation than does mature Hp.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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