Thc effect of light and phylohormonc on the belalaln synthesis was tested using the suspension culture of a rod(bclalaln produulng) cell line from Phytolacca esculenta V. Houtte. Betalain synthesis of rod-cell 1ine was strongly dependent on the irradiation of blue light, but induced by hormone, IAA and/or kinetin, in dark conditions. In a light condition, however, 2 mg/l of IAA increased the betalain content about 30% (per gram fresh weight), whereas more than 0.5mg/l of kinetin remarkably decreased. The hairy root derived from the same plant was also observed for the blue light-dependent pigmentation in the root-tips. When the hairy root grown in dark was transferred to the light condition, the accumulation of betalain was initiated after 12hours. Such pigmentation was completely inhabited by addition of a protein synthesis inhibitor.
Hyoscyamine and scopolamine are the pharmaceutically valuable anticholinergic drugs. The aim of our study is to increase the contents of both hyoscyamine and scopolamine by means of elicitation. Various biotic elicitors derived from 3 fungi and 1 yeast were inoculated to the hairy root cultures. When homogenate and supernatant of elicitors treated with hairy root cultures, that of yeast elicitor was only increased scopolamine production. However, all of the fungal elicitors did not influenced the productions of scopolamine and hyoscyamine. Our results will contribute to mass production of tropane alkaloids by hairy root cultures of Scopolia parviflora.
The hairy root was induced form potato tuber disc by infection of a. rhizogenes. The detection of the agropine and mannopine by paper electrophoresis confirmed that induced hairy root was transformed by A. rhizogenes. The activity of peroxidase was the highest at 5 weeks and isozyme pattern of peroxidase revealed 3 cathodic bands and 2 anodic bands and new C4 band(pI 4.6) was observed at 7 weeks after cultivation in hairy root was isoelectric focusing. To study the effect of Ca2+ on cell wall formation in hairy root, channel blocker of Ca2+ was treated. The activity of $\beta$-glucan synthetase II(GS II) related to cell wall synthesis was inhibited by about 50% in diltiazem and flunarizine treatment than that of control, but stimulated in CaCl2 treatment. Therefore these results showed that Ca2+ might be an effective factor in the cell wall formation. The activity of GS II by NaF treatment was increased by about 30%. This result suggested that the activity GS II is changed through phosphorylation process.
Hwang, Sung-Jin;Na, Myoung-Suk;Pyo, Byoung-Sik;Lee, Jong-Bin;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.8
no.3
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pp.250-258
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2000
Hairy root cultures of Rheum undulatum L. induced by a co-culture with Agrobacterium rhizogenes ATCC15834 were established and the production of tannin in hairy roots was investigated. The growth of hairy roots was maximized in WPM liquid medium supplemented with 2 mg/L IAA, and 3% sucrose (pH 5.7). The highest yields of tannin were obtained from WPM medium containing 0.5 mg/L ABA, and 5% sucrose (pH 5.5). The growth and tannin production in hairy root cultures were influenced by the addition of elicitors to the medium. The addition of 50 mg/L chitosan enhanced the production of tannin with about 1.7 fold.
Kim, Soo-Jung;Cha, Min-Seok;Lee, Eun-Ji;Kim, In-Hye;Kwon, Jung-Eun;Kang, Se-Chan;Park, Tae-Ho
Journal of Plant Biotechnology
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v.39
no.3
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pp.205-211
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2012
Pueraria lobata is a perennial legume plant, widely distributed in the countries of East Asia. It is a medicinally important leguminous plant and produces various isoflavones such as puerarin, daidzein etc which have potential for preventing several chronic diseases including osteoporosis, cardiovascular disease and cancer. In this study, we tried to induce hairy roots in vitro from Korean wild arrowroot P. lobata and investigated the effects of hormones and light conditions. Initially leaf and stem segments were infected with Agrobacterium rhizogenes and incubated in different conditions. Hairy roots were induced from only stem segments and the induction was best at dark condition and the presence of IBA during incubation. Secondary roots were also significantly much more induced at the dark condition than at the 16 hours light condition. Among plant growth regulators of auxin, IBA was best for secondary root formation while 2,4-D, IAA and NAA produced callus or less hairy roots. The presence of the foreign gene rolC transferred by A. rhizogenes that plays a major role in hairy root induction was confirmed by PCR. The accumulation of isoflavones such as puerarin and daidzin was also confirmed. These results will facilitate mass production of hairy root and can be used for the production of functional substances from wild arrowroots.
Hairy root clones of Panax ginseng were established by selection of some hairy roots formed on the leaf, stem and root segments transformed with Agrobacterium rhizogenes strain $A_4$. The transformed roots grew well in MS medium under the dark condition. To confirm the transformation with Ri-T-DNA, dot blot hybridization and opine analysis were Performed. Among four hairy roots induced from different part of ginseng, the HB3 hairy roots were examined for selection of high-saponin-producing clones. Four clones isolated from HB3 hairy root cultures displayed various phenotypes characterized by growth and total saponin content. Maximum growth was obtained for cultures of HB3-10 clone and the content of total saponin was 0.55 wt%. However, higher amount of total saponin was obtained with HB3-2 clone cultures(0.74 wt%) in spite of lower growth. Dot blot hybridization confirmed the introduction of Ri-T-DNA in the plant genome. In the opine test, agropine and mannopine were detected from all hairy root clones.
In, Jun-Gyo;Park, Dong-Sik;Lee, Bum-Soo;Lee, Tae-Hoo;Kim, Se-Young;Rho, Yeong-Deok;Cho, Dong-Ha;Kim, Seong-Mu;Yang, Deok-Chun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.14
no.6
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pp.371-375
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2006
To investigate effects on the growth and ginsenosides accumulation in ginseng hairy root, potassium phosphate was supplemented with 1.25, 2.5, and 5.0 mM concentration in 1/2 MS medium, respectively. Potassium phosphate supplement was increased the biomass and ginsenosides accumulation when it was dose at the concentration of 1.25 mM. And the growth rate of hairy root in the light condition was higher than in dark condition. The highest contents and productivity of ginsenosides were observed at the supplement of 1.25 mM potassium phosphate at the 7th day after the culture onset. Ginseng hairy root cultured in 20 L bioreactor supplemented with 1.25 mM KH$_2$PO$_4$ was increased the growth with 1,609 g (F${\cdot}$W) and ginsenosides content with 11.09 mg than those in control.
This study was conducted to select rhizobia from hairy vetch (Vicia villosa Roth) with nodulation and excellent nitrogen-fixing ability. Hairy vetch root was collected from 7 of cultivation region of all over the country, rhizobia were isolated from the root nodules. Isolates were re-inoculated into a hairy vetch separately and studied nodulation and nitrogen-fixing ability. As a result, total of 52 Rhizobium isolates were isolated from the hairy vetch root nodules, among these, 16 isolates were Rhizobium which show good growth at more than 0.5% NaCl concentration. These 16 isolates were re-inoculated separately, 8 weeks after, good root nodule formation was observed from Rhizobium sp. RH1, RH3, RH81, RH82, RH84, and RH93 strain treated samples. Six isolates were positive for nitrogen fixing ability, the highest acetylene reduction activity was shown by Rhizobium sp. RH84. Results suggest that the Rhizobium sp. RH84 could be used as the possibility of its application as a green manure crop of hairy vetches in nonuniform salt distribution reclaimed land.
Panax ginseng C.A. Meyer is a well-known Korean traditional medicine. Until now, even though major research of ginseng has been focused on the pharmacological effect, clinical application and chemical analysis of extracted secondary metabolite for several years, the physiology and gene functions of ginseng were not well known. In this research, we have developed the protein extraction methods of ginseng root and hairy root for proteome analysis in order to elucidate the gene(s) function of ginseng. Using the liquid nitrogen (equation omitted) TCA method as protein extraction method, about 660 protein spots were detected on the 2-DE gel of hairy root. Additionally, comparative analysis result of 2-DEs of ginseng root (equation omitted) hairy root suggested that proteomes of same organism could be changeable according to the culture condition, growth stages and other stimulus.
Kyung-Hee JUNG;Sang-Soo KWAK;Cha Yong Choi;Jang R. LIU
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.22
no.4
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pp.183-187
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1995
The relationship between the intracellular phosphate level and catharanthine production in hairy root cultures of Catharanthus roseus was investigated The growth of hairy root increased in proportion to the phosphate concentration in the growth medium. When hairy roots were cultured in a phosphate-free medium, the catharanthine content was increased to the highest level As the phosphate concentration in the medium was enhanced, the catharanthine content decreased proportionally. Hairy root cultures with elevated intracellular phosphate concentrations indicated that growth was proportional to the level of intracellular phosphate. Catharanthine production increased abruptly below an intracellular phosphate level of $100\;\mumoles/g$ dry wt. The intracellular phosphate level may play a key role in the regulation of growth and secondary metabolite production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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