Reiterated normal-phase column chromatography lead to the isolation and purification of six known compounds but for the first time from the whole plant of Sasa borealis (Hack.) Makino (Gramineae): tricin 4'-O-(erythro-${\beta}$-guaia-cylglyceryl) ether (1), tricin 4'-O-(threo-${\beta}$-guaiacylglyceryl) ether (2), tricin 4'-O-[erythro-${\beta}$-guaiacyl-(9'-O-acetyl)-glyceryl] ether (3), tricin 4'-O-[threo-${\beta}$-guaiacyl-(9'-O-acetyl)-glyceryl] ether (4), (-)-pinoresinol (5), and vanillin (6). The structures of the compounds (1-6) were established based on interpretation of high resolution NMR (COSY, HSQC, HMBC, and NOESY) spectral data. In particular, compounds 1 and 3 were diastereomers of compounds 2 and 4, respectively. These two sets of diastereomers were able to be simultaneously identified and quantified by a gradient reversed-phase HPLC method with UV photodiode array, This sensitive HPLC method is noteworthy as a simultaneous separation and identification method to test the extract of the family Gramineae which contains these compounds.
석유제품 내의 식별제를 정성 정량분석하기 위해 HPLC의 적용가능성을 연구하였다. 등유와 자동차용 경유에 함유된 식별제의 정성분석을 위해 HPLC에서 최적의 분석조건(이동상 용매의 비율, 유속 등)을 선정하고, 이를 바탕으로 식별제의 정량분석을 위한 검량곡선을 작성하였다. 특히, 일정 농도 범위에서의 등유는 4.75분에서, 그리고 자동차용 경유는 4.17분의 머무름시간(retention time)을 나타내었고, 등유와 자동차용 경유의 검량곡선 상관계수($R^2$)가 0.999 이상을 나타내어 정량분석에 적용 가능할 것으로 나타났다. 현행 식별제의 분석방법인 UV/Vis 분광광도계를 이용한 분석결과와 비교분석을 실시하였고, 등유의경우 약 7 %의 낮은 편차를 보였으며, 자동차용 경유의 경우 약 20 %의 다소 큰 편차를 확인하였다.
최근 새로 개발중인 항AIDS치료제 KR-V 시리즈를 대상으로 HPLC-UV 검출법을 이용해 랫드 혈장중에서 분석법을 검토하였다. 분석컬럼은 $C_{18}$($5{\mu}m$, $250{\times}2.0mm$ I.D.)을 이용하였으며 이동상은 물과 ACN의 혼합액(40/60, v/v)으로 하였다. 이상의 조건에서 모든 KR-V 물질들은 용출시간 4-12분에 비교적 신속하게 잘 분리되었으며 정량한계는 15-30 ng/ml, 혈장중 회수율은 KR-V 2, 7 및 15를 제외하고는 85%(C.V. <10%) 이상으로 나타내었다. Ester 구조를 포함하고 있는 KR-V 2, 7 및 15는 혈장중에서 극히 불안정하여 유도체 개발의 분자설계상 제외시키는 것이 좋을 것으로 사료되었다. 결론적으로 본 HPLC-UV 검출법온 KR-V 시리즈 물질들의 약물동태연구를 위한 약물 분석법의 유효한 방법으로 검토되었다.
A high performance liquid chromatographic method was developed for the determination of glycyrrhetinic acid contained in licorice powder. Glycyrrhetinic acid which is hydrolysate of glycyrrhizin extracted from licorice powder, was determined with good result by HPLC using 2-bromoacetyltriphenylene labeling reagent. The glycyrrhetinic acids were labeled with 2-bromoacetyltriphenylene in acetonitrile using 18-crown-6-ether and KOH as a catalyst. Derivatized glycyrrhetinic acids were separated from the extracted licorice powder on a reversed-phase column (chemopak $C_{18}$) using 100% acetonitrile as a mobile phase and monitored by an UV-detector at 268nm. Linearity of calibration curve was obtained between 5 ng and 20 ng, and the lower limit of detection was 2 ng. The recovery of glycyrrhetinic acid to licorice powder was about 99.3%. This method was sensitive, reliable and useful for, determination of glycyrrhetinic acid.
영국약전(BP 2013), 미국약전(USP 39) 그리고 대한민국약전 (KP XI)에 디오스민 원료의 정량법으로 HPLC법이 수재되어 있다. 그러나 위의 외국약전들에는 디오스민 제제의 정량법이 수재되어 있지 않으며 대한민국약전 (KP XI)에는 디오스민 캡슐의 정량법으로 HPLC법보다 덜 특이적인 자외가시부흡 광도측정법이 수재되어 있다. 이 실험에서는 최근의 추세에 따라 원료의 정량법과 같고 특이성이 좋은 HPLC 분석법으로 디오스민 캡슐의 정량법을 개발하였고 이를 검증하였다. HPLC분석법의 검증을 위해 직선성, 정밀성, 정확성, 시스템 적합성, 실험실내 정밀성과 완건성 실험을 실행하였다. 직선성은 결정계수($r^2$)가 0.999 이상으로 우수하였다. 일내 정밀도는 상대표준편차 0.15~0.29%, 일간 정밀도는 1.05~1.74%로, 회수율은 101.2~103.2%로 나타났다. 시스템적합성에서는 머무름시간 상대표준편차(RSD %) 0.37 %, 피크면적 상대표준편차(RSD%) 0.06%, 이론단수 평균값 3591.293 그리고 비대칭계수 평균값 1.35을 나타내었다. 개발한 시험법을 이용하여 시중 유통 중인 디오스민 캡슐 중 디오스민의 함량측정에 응용하였다. 개발된 시험법은 대한민국약전의 개정에 기여할 것이다.
Oxolinic Acid는 양식어류에 흠히 쓰이고 있는 항균성물질이나 국내에서는 잔류허용 기준과 공정분석법이 설정되어 있지 않은 실정이다. 해외의 경우 이 물질을 분석할 수 있는 여러 방법이 고안되어 소개되어 있으나 검출감도가 낮거나 분석 방법이 복잡하여 단시간내에 다량의 시료를 처리하는데는 어려움이 있다. 본 연구에서는 보리새우 중에 잔류하는 Oxolinic Acid를 ethylacetate로 용출한 다음 이를 증발시키고 여기에 묽은 Oxolinic Acid와 hexane을 가하여 방해물질을 제거하면서 재추출하여 시료를 정제하였다. 이 시료를 HPLC의 자외선 검출기로 정량하였던 바 회수율은 79~91%, 검출한계는 50ppb였으며 재현성이 있는 것으로 나타나 잔류검사법으로 적합하다고 사료되어 보고한다.
Provitamin A carotenoids($\alpha$- $\beta$-carotene lutein capsanthin) cintents in various red pepper and red pepper products were analyzed by HPLC and UV/VIS spectroscopy. The amounts of $\beta$-carotene and capsanthin were at its highest in powdered red pepper and lutein in red pepper leaves. There are little $\alpha$-carotene present in all samples analyzed. So vitamin A activity was calculated only from $\beta$-carotene content. Capsanthin and $\beta$-carotene contents of red pepper were higher than those of green pepper whereas lutein content of red pepper was lower than that of green pepper. whereas lutein content of red pepper was lower than that of green pepper. Vitamin A activity from colorimetric analysis was higher than that from chromatographic method and results were not generally in accordance with the vitamin A data presented in current food composition tables. Vitamin A activities in retinol equivalent(R. E. ) of green pepper red pepper powdered red pepper fermented red pepper paste and red pepper leaves were 70, 570, 1, 340, 140, 980 R. E respectively.
A reversed phase HPLC method was established for quantitative determination of lignans including schizandrin (1), gomisin A (2), deoxyschizandrin (3), gomisin N (4), and wuweizisu C (5) from Schizandra chinensis using a binary gradient of acetonitrile and water as a mobile phase with UV detection at 254nm. In result, contents of schizandrin (1), gomisin A (2), deoxyschizandrin (3), gomisin N (4), and wuweizisu C (5) in Schizandra chinensis from Moonkyung were 8.41${\pm}$0.30, 3.01${\pm}$0.13, 1.06${\pm}$0.05, 7.69${\pm}$0.30, and 1.68${\pm}$0.06 mg/g, respectively.
The extraction procedure and HPLC condition were modified to analyze the residues of oxytetracycline, sulfamethoxazole and chloramphenicol in pork, simultaneously. The antibacterial agents in pork were extracted with 0.02M EDTA-Mcilivine buffer:ethanol:acetonitrile (5:3:2). After the removal of fat with n-hexane, the extracts were evaporated and purified with Sep-pak $C_{18}$ cartridge column using 0.01M oxalic acid 0.1% (v/v) triethylamine (TEA) in acetonitrile. The peak of antibacterial agents was detected with $\mu$ Bondapak C18 column, UV detector (280nm) and 0.01M oxalic acid: methanol: acetonitrile (7.5:2.0:0.5). Detection limits for three antibacterial standards were 0.03 ppm. Calibration curves were linear between 0.03 and 2.0 ppm (R$^2$>0.999). When spiked the level of 1.0 ppm of oxytetracycline, sulfamethoxazole and chloramphenicol into meats, the recoveries from meats were 77.3%, 79.7% and 59.3%, respectively. These results showed that the modified extraction method provided good analytical resolution and the recoveries of the above antibacterial agents in meats.
Indigotin, indirubin, berberine, palmatine, alizarin, and purpurin are major pigments of indigo plant, Phellodendron bark, and madder. The six pigments were examined using the HPLC-DAD-MS instrument for the purpose of the simultaneous detection of the pigments in a single sample run. The HPLC-DAD-MS method examined the individual pigment solutions in DMSO, a solution containing 6 pigments, and the DMSO extract of the silk dyed with a dye solution of 5 pigments excluding indirubin. The retention times of the HPLC chromatograms, ${\lambda}_{max}$ of the uv-vis absorption bands in the DAD analyses, and the molecular ions detected for the compound peaks in the MSD analyses were consistent throughout the analyses of individual pigment solutions, mixed pigment solutions, and dye extracted from silk dyeing. The developed instrumental method of the simultaneous detection of six pigments can identify dye in an exhumed textile if the textile is dyed using any one (or multiple) pigments of indigo, Phellodendron bark, or madder plant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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