• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권3호
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• pp.491-496
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• 2001

A modification of decarboxylating agar medium as described by niven was performed to improve the detection method of biogenic amine-producing bacteria and to eliminate the false-positive. A total of 120 bacterial strains isolated from kimchi were used to evaluate different dicarboxylating agar media and for screening biogenic amines. Potential false-positives ranged from approximately 66 to 79% of the strains tested in the already well-known media. In our improved medium, none of the 120 strains showed the potential false-positives. There was a good agreement (81.7%-87.5%) between the results obtained by the improved medium and by HPLC analysis. Consequently, this medium was greatly improved in screening biogenic amine-producing bacteria and discarding false-positives. Of the 120 kimchi isolates, 14.2, 18.3, 37.5, and 0.8% were found by HPLC to be the producers of histamine, tyramine, putrescine (as a form of spermine), and cadaverine, respectively. The proportion of biogenic amine producer during kimchi fermentation increased to a maximum at an immature period and decreased thereafter.

• 약학회지
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• 제54권4호
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• pp.240-243
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• 2010

High-performance liquid chromatography (HPLC) screening method revealed that a propolis product marketed as a functional food contained an undeclared substance similar to tadalafil, the active ingredient of the prescription drug Cialis$^{(R)}$ approved for the treatment of male erectile dysfunction. In order to identify the illegal additive, the propolis product was extracted with methylene chloride, and the extract was purified further using semipreparative HPLC. The chemical structure of the isolated substance was elucidated based on IR, LC/MS-ESI, and $^1H$- and $^{13}C$-NMR spectroscopy, which showed the characteristics similar to tadalafil. The only difference was the substitution of the methyl group at the piperazinedione ring of tadalafil to the amino group of the identified illegal additive.

• 한국포장학회지
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• 제16권1호
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• pp.9-18
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• 2010

For screening test of the non-volatile compounds which migrate from food packaging materials into foodstuffs, the traditional high performance liquid chromatography (HPLC) systems suffer from the lack of universal detector with high sensitivity and universality and high efficiency HPLC separation column which provides complete separation of complex mixtures into all individual substances. In this work, the use possibility of online two-dimensional liquid chromatography (2D-LC) system coupled with a charged aerosol detector (CAD), a universal detector, was reviewed. 2D-LC system permits to improve peak capacity and resolving power for complex mixtures. Charged aerosol detector (CAD) offers a new feasibility for detection of any non-volatile compounds with high sensitivity and constant response factor in a calibration range. The combination of size exclusion chromatography (SEC) and normal phase HPLC (NP-HPLC) is most frequently used for the separation of the natural and synthetic polymers which are mainly used as raw materials for the manufacture of food packaging materials. However, there is no commercial software available for data acquisition and handling and therefore the quantification in 2D-LC analysis is still rare.

• KSBB Journal
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• 제23권6호
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• pp.484-488
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• 2008

본 연구에서는 peroxidase 활성의 신속한 스크리닝을 위해 peroxidase의 활성을 정량적으로 평가할 수 있는 분석으로 agar plate와 96-well plate에서 peroxdase의 활성에 비례하여 색상감도를 측정할 수 있는 colorimetric 분석법을 개발하였다. 이 방법은 RP-HPLC 결과와 매우 비례적으로 상관적인 결과를 보였다. 이 colorimetric 분석법을 사용하여, 폐수에서 한천 고체배지에서 7회에 걸친 스크리닝으로 높은 농도의 2,4-DCP(1000 ppm)에서 생존하는 균주를 스크리닝하였고 선별된 이들 균주들은 탄소원으로 2,4-DCP 만을 대사할 수 있으며 높은 peroxidase 생산량을 보였다. 분리된 균주들 중 높은 peroxidase 활성을 가지는 2,4-DCP 분해 균주를 분리하였고 최종 분리된 균주는 염색폐수의 COD를 4시간 동안 44%에서 61%까지 제거하였다. 상기의 결과에 의해 본 연구에서 개발된 발색법이 페놀화합물 분해 균주 스크리닝법이 빠르고 쉬운 난분해성 물질인 페놀 혼합물의 분해 균주 탐색에 대하여 성공적으로 적용될 수 있기를 기대한다.

• KSBB Journal
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• 제24권2호
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• pp.189-194
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• 2009

대나무 (이대와 왕대) 잎으로부터 HPLC on-line ABTS screening기법을 사용하여 flavone C-glycosides의 homoorientin의 항산화활성을 빠르게 분석하였으며, 이대와 왕대 잎으로부터 homoorientin의 추출을 다양한 초음파 에너지와 시간의 추출방법을 적용하였다. 전 처리한 추출액에 포함된 이대와 왕대 잎으로부터 homoorientin을 분석하고 최적의 추출조건을 실험적으로 모색하였다. 실험결과에 의하면 왕대는 이대 잎보다 homoorientin의 함량이 7배 정도 높았으며, 최적 추출은 35 kHz, 60 min에서 (positive) 피크면적 1574.71, 23.67%와 (negativity) 피크면적 6924.34, 1.23%로 왕대 잎에서의 추출 효율이 가장 우수 하였다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제19권4호
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• pp.198-202
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• 2004

잔류물질 간이 시험법으로 EEC-4 plate test와 Charm II test가 항생물질과 합성항균제 잔류검사에 널리 이용되고 있는 바, 이들 상호간의 결과 수치를 비교, 분석한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. EEC-4 plate혹은 Charm II 에서 양성으로 나타난 돈육 71건에 대하여 HPLC로 정량 분석한 결과, only tetracyclines 46건, only sulfonamides와 solfonamides+tetracyclines가 각각 4건씩, amphenicols+tetracyclines와 amphenicols+sulfonamides+tetracyclines가 각각 1건씩 검출되었고, 15건에서는 검출되지 않았다. Sulfonamides 계열에서 검출된 9건의 경우, Charm-II test 결과 수치가 낮은 경우에 정량 검출량이 높게 나타났고, EEC-4 plate test 결과 pH 6.0, pH 7.2, pH 8.0 모두에서 양성으로 나타나는 등 두 시험방법 간에 연관성이 있었고, chloramphenicols 계열에서 검출된 2건과 검출되지 않은 7건의 경우, Charm-II test결과 수치가 낮은 경우에는 오히려 정량 검출되지 않았으나, control point 근방의 양성 수치에서는 검출량이 높게 나타날 뿐 아니라 EEC-4 plate test에서도 pH6.0, pH7.2, pH8.0 모두에서 양성으로 나타나는 등 두 시험방법 간에 연관성이 있었다. 한편, tetracycline계열의 경우, EEC-4 plate와 Cham-II간에 연관성은 없었다. 또한, EEC-4 plate와 Charm II에서 각각 양성을 나타내었으나 HPLC에서는 검출되지 않는 경우는 tetracyclines계열에서는 $10.5\%(6/57)$, sulfonamides계열의 경우는 없었고, chloramphenicols계열의 경우는 $81.8\%(9/11)$로 각각 나타나 EEC-4 plate와 Charm II가 세 가지 잔류물질 시험에 대한 screening method로서 적합함을 알 수 있었다.

• 대한수의학회지
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• 제41권1호
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• pp.13-19
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• 2001

A simple and rapid analytical method for the determination of tylosin in chicken, pork and muscle was established by High-Performance Liquid Chromatography(HPLC). Chicken, pork and beef muscle(5 g) were fortified by adding the $0.2{\mu}g/ml$ of standard tylosin and the drug was extracted from meats with 70% acetonitrile(ACN) and followed by liquid-liquid partition for clean-up procedure. Then $20{\mu}l$ portion of ACN elution was directly analyzed by HPLC with spectra 100 variable wavelength detector, and unfortified blank control were treated similarly. The average recovery rate of tylosin added to chicken, pork and beef muscle were $83{\pm}2.3$, $96{\pm}3.3$ and $92{\pm}1.6$(%) at the level 0.2 ppm, respectively. No tylosin residues in marketing meats. These results suggested that HPLC methodology could be acceptable for the extraction, determination and screening of tylosin residues in edible meats.

• KSBB Journal
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• 제22권5호
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• pp.356-361
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• 2007

시아노박테리아 같은 수중 미생물에 대한 2차대사물질에 대한 연구는 육상식물이나 미생물에 관련된 연구방법을 응용하고 있으며 아직까지 체계화 되어있지 않아 시아노박테리아를 보다 효율적으로 조사하기 위한 새로운 연구기술의 모색이 절실히 필요하다. 이 연구에서는 의학적인 관점에서 시아노박테리아를 조사하기 위한 유용한 접근 방법을 모색하였고 체계화시켰다. 균주마다 특성화된 최적 배양을 하였고 PCR 증폭을 이용한 분자생물학적인 방법과 HPLC를 통한 정성분석으로 의학적으로 의미있는 NPs를 생산하는 유망 균주를 선별하였다. 선별된 균주에서 나온 추출액은 SPE와 preparative HPLC를 거쳐 분리 정제되어지고, 정제된 물질들은 질량분석기에 의해 분자량과 구조가 결정되어 졌으며, 생활성 테스트에 의해서 그 생물학적인 활성을 정함으로써 의학적인 가능성이나 활용성에 대해서 고찰하였다. 이번 시험에서 98개의 실험균주 중 46개의 균주가 NRPS 또는 PKS 관련 gene을 함유하고 있었으나 HPLC를 이용한 정성분석에서 단지 5개의 균주가 상당히 의미있는 관련 단백질을 생산하고 있음이 알려졌다. 즉, 41 균주에서 관련 gene은 존재하였지만 그 발현이 미약하였고 또는 프로모터의 활성이 이루어지지 않았다. 이와같은 휴먼 gene의 활성화는 자외선 조사 또는 건조를 이용한 자극과 배양액의 성분 조절로 이루어질 수 있고 이를 통해 흥미있는 결과를 이끌어낼 수 있다(13, 14). 이번 연구에서는 HPLC를 통한 정성분석은 Biomass에 대해서 이루어졌다. 그러므로 배양액으로 유출되는 extracellular substances에 대한 분석은 행해지지 않았다. 시아노박테리아가 NRPS/PKS 관련 유전자를 함유하고 있을 때, 특히 biomass에서 NPs 이 검출되지 않을 경우 배양액 안에서의 존재 가능성 대해서 조사할 필요성이 요구되어진다. 시아노박테리아는 대표적인 photoautotroph 미생물로써 $CO_2$를 탄소성분과 에너지원으로 사용한다. 그러므로 E. coli 같은 미생물보다 배양시 경제적이고 또한 다른 종류의 미생물이 탄소영양분의 부족과 cyanobacterial NPs의 생물학적 환성에 의해서 공생하기 어려워 옥외배양을 통한 대량생산이 가능하다. 그러나, 생산되는 cyanobacterial NPs의 높은 구조적 안정성까지 포함하여 시아노박테리아는 미래의학산업의 중요한 천연소스임에 틀림이 없지만 개체 분화의 시간이 4$\sim$10시간 정도로 다른 미생물에 비해 길고 배양시 광원의 필요성 등 한계 요소를 지니고 있다(15). 그러므로 최근에는 개체 분화가 빠른 시아노박테리아나 또는 다른 미생물에 대해서 cyanobacterial NRPS/PKS gene의 heterologous expression 이 연구되어지고 있다(16).

• Archives of Pharmacal Research
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• 제17권5호
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• pp.360-363
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• 1994

Column--swtiching technique with a reversed-phase high performance liquid chromatographic method has been developed for the routine analysis of radioiodinated insulin and its degadation products in biological fluids. The diluted biological samples were loaded onto a precolumn packed with LiChrosorb RP-8 $(25-40{\;}{\mu}m)$ using 0.1% trifuoroacetic acid (TFA) in water as a washing solvent. After valve switching, the concentrated insulins were eluted in the back-flush mode and separated by a W-Porex $C_{18}$ column with a gradient of 0.1% TFA in water and 0.1% TFA in acetonitrile as the mobile phase. The method showed good precision, accuracy and speed with the detection limit of 20 pg/ml. Total analysis time per sample was about 40 min and the coefficients of variation were less than 8, 2%.

• KSBB Journal
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• 제23권4호
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• pp.297-302
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• 2008

오죽으로부터 HPLC On-line $ABTS^{+}$ screening기법을 사용하여 Flavone C-glycosides의 특성중의 하나인 항산화활성을 빠르게 분석하였으며, 오죽으로부터 homoorientin와 orientin의 추출을 다양한 초음파 주파수와 시간의 추출방법을 적용하였다. 전처리한 추출액에 포함된 오죽의 Flavone C-glycosides을 분석하고 최적의 추출조건을 실험적으로 모색하였다. 실험결과에 의하면 전체 수율에서는 Frequency 72 KHz, 60분에서 3.37 mg으로 추출 효율이 높았고, homoorientin와 orientin의 항산화활성은 Frequency 35 KHz, 30분으로 추출한 시료가 73.8%와 14.8%로 가장 우수하였다.