Methanol induction conditions with various additives for the enhanced production of recombinant hepatitis B surface antigen(HBsAg) were investigated in Pichia pastoris, which can utilize methanol as a carbon source and produce recombinant proteins under the control of strong, tightly-regulated alcohol oxidase(AOX) promoter. The presence of non-methanol carbon sources such as glycerol and glucose fully repressed the expression of AOX promoter. Various additives were tested to improve the production of recombinant protein and it was found that sorbitol could be a good carbon source during methanol induction period. An optimized concentration of amino acid mixture enhanced the production of HBsAg significantly. Pluronic F-68, a non-ionic surfactant, also improved the production of HBsAg without inhibiting cell growth. Addition of oleic acid at 0.01%(v/v) during the induction period showed positive effect on the production of HBsAg. Finally, 1.2%(v/v) of trace salts enhanced the production of HBsAg 1.9 times compared to that of control culture.
The dietary effects of chicken treated with Hwangki-Beni Koji sauce (HBS) on reactive oxygen species (ROS) generating and scavenging related enzyme activities in rats fed with a high-fat and high-cholesterol diet were investigated. The rats (five rats per group) were divided into a normal control diet group (NC), a high-fat and high-cholesterol diet control group (HFC), HFC plus base sauce-treated chicken supplemented diet group (HFC-BS), and a HFC plus HBStreated chicken supplemented diet group (HFC-HBS), and fed for 5 weeks. Total type T (T) and type O (O) hepatic xanthine oxidoreductase in HFC-HBS were 27.91-35.78% and 24.57-31.84% lower than those of HFC and HFC-BS, respectively. In HFC-HBS compared with HFC and HFC-BS, superoxidase dismutase activity was 62.89-64.50% higher, glutathione S-transferase activity was 19.29-25.17% higher, glutathione content was 25.11-53.30% higher, and lipid peroxide content was 20.29-24.19% lower. Therefore, chicken treated with HBS may prevent liver damage by the ROS formed from a high-fat and high -cholesterol diet.
The identification of serum HBV DNA is very important for the assessment of the disease activity in persistent infection, for the evaluation of the infectivity of an individuals blood. The dot blot, however, has limited sensitivity and sometimes inconsistent with other serological markers and clinical settings. Using the most important recent advance in molecular biology, the polymerase chain reaction(PCR), specific DNA sequences can be amplified more than a million-fold in a few hours and with this technique the detection of the extreme low level of DNA is possible. This study was to determine sensitivity of the PCR for the detection of serum HBV DNA in comparison with dot blot analysis and to investigate the serum HBV DNA status and clinical significance of PCR in patients with chronic HBsAg positive liver disease. The subjects of this study were 17 patients with asymptomatic HBsAg carriers(9 HBeAg positive patients, 8 anti-HBe positive patients), 91 chronic hepatitis B(50 HBeAg positive patients, 41 anti-HBe positive patients), 57 liver cirrhosis(21 HBeAg positive patients, 36 anti-HBe positive patients), 27 hepatocellular carcinoma(10 HBeAg positive patients, 17 anti-HBe positive patients). The results were summerized as following; The detection rates of HBV DNA by dot blot, PCR were 58.9%, 72.2% in HBeAg positive patients, 34.3%, 53.9% in anti-HBe positive patients. The detection rates of HBV DNA by PCR in HBeAg negative patients were 25.0% in asymptomatic HBsAg carriers, 61.0% in chronic hepatitis B, 52.8% in liver cirrhosis, 52.9% in hepatocellular carcinoma. The positive rate for HBV DNA is a significant difference between HBeAg positive and negative asymptomatic HBsAg carriers, but not significantly difference in other groups. In conclusions, this study confirmed that the PCR is much more sensitive than the dot blot analysis in detecting the HBV DNA in the sera of patients with chronic liver disease. The presence of HBV DNA in the serum was detected by PCR with higher sensitivity and it suggested that active viral replication is still going on in most patients with chronic HBsAg positive liver disease irrespective of HBeAg/anti-HBe status, and PCR may be used as a prognostic factor in asymptomatic HBsAg carriers.
Purpose : Although there are a lot of the reports about the persistence of anti HBs titer of plasma derives HBV vaccine, it is difficult to find the follow up studies of the recombinant HBV vaccine. We performed this study to compare the persistence of anti HBs titer by vaccination schedule and the seronegative rate of 5 years later according to Anti HBs titer after basic immunization in neonatal period by recombinant HBV vaccination. Methods : This study was performed on 420 neonates at Pusan Moon Hwa Hospital from April to December 1993, followed up for 5 years after basic immunization by recombinant HBV vaccine. The anti HBs titer test was done by radioimmunoassay(RIAAUSAB, Abbott laboratories). The positive anti HBs level that would protect against HBV infection was defined as a level equal to or greater than 10mIU/mL. Results : In this study the seronegative rate after 5 years was 5% in 2 month schedule group, 25.5% in 6 month schedule group(P>0.05). In 2 month schedule group the seronegative rate was 20% when anti HBs titer is lower than 200mIU/mL, 0% when more than 200mIU/mL(P>0.05). In 6 month schedule group the seronegative rate was 66.7% when anti HBs titer was lower than 200mIU/mL, 40% when 200~499.9mIU/mL, 23.9% when 500~999.9mIU/mL, 22.5% when more than 1000mIU/mL. Conclusion : In this study the seronegative rate after 5 years of recombinant HBV vaccination was 5~25.5%. The persistence of anti HBs titer was statistically irrelevant to schedule. The seronegative rate after 5 years was statistically irrelevant to anti HBs titer after basic immunization.
Purpose: To evaluate the hepatitis B vaccination program which has been conducted since 1980, Korea. Methods: This study was carry out self reported questionnaire and serologic test covering 2,072 elementary school students who were born between 1980 and 1987, selected by cluster sampling. The HBV serologic markers (HBsAg, Anti-HBs and Anti-HBc) were tested by radioimmunoassay (RIA). The contents of questionnaire include demographic data of students and parents, vaccination status, vaccination frequency, vaccination age, past history of mother's HBV test. Results: 1) The HBsAg positive rates by sex showed 3.7% for male and 2.7% for female, representing an average rate of 3.4%. The HBsAg positive rates by age group showed 5.6% for 13 years and l.5% for 6 years, representing a tendency of lowering rate as ages being younger. 2) The pre-natal HBV test rate was 10.2%, while post-natal HBV test rate was 42.5%. The test showed that the parents' educational level being higher than others, the pre- and post-natal HBV test showed higher rates. In case the fathers occupation being office worker, the post-natal HBV test showed a higher rate compared with other occupation. 3) Overall vaccination rate was 82.6%, complete vaccination rate 69.8%, booster injection rate 42.8%. The vaccination rate, complete vaccination rate and booster injection rate increased as the age being younger. If the educational level of parents were higher, the vaccination rate, complete vaccination rate and booster injection rate showed higher rates. Younger students showed younger vaccination age, and higher educational background of family showed younger vaccination ages. 4. With regard to positive rate of HBV markers by vaccination age, HBsAg and Anti-HBc positive rate showed higher degrees in the following order; preschool age (1-6 years), school age (6-13 years) and infancy (0-1 year). Anti-HBs positive rate was increased as the frequency of vaccination increased. Five years after initial complete vaccination, minimum protective rate was lowest, 69.6%.
In order to analyze the positive rate of hepatitis B surface antibody by age before and after hepatitis B vaccination, 13,855 serum specimens who were referred for the hepatitis B surface antibody test at the General Hospital of Jeju Hospital were examined by CMIA method. The positive rate of HBs Ab was 5,176 (37.36%). The positive rate according to gender was 40.13% for female and 34.77% for male. The age group with the highest HBs Ab average was in their 40's (399.86 mIU/mL), while the lowest age group was in the 90's (211.50 mIU/mL). It is remarkable that the age group with the highest HBs Ab positive rate is in the 30's, and that teenagers (age group of 10-20 years) had the lowest positive rate. Especially 15, 18, 19 years old was statistically significant. Consideration should be given to determining the titer of vaccination and to clarify the timing of vaccination.
The study is carried out to investigate the effect of drinking and smoking for the activities of aspartate aminotransferase(AST, or GOT) and alanine aminotransferase(ALT or GPT), from December 25, 1986 to April 30, 1987. The male physical examinees for employment, 900 who had visited to the Taegu Medical Center were subjected. And the positive cases of HBs-Ag, Anti-HBs and skin test for Clonorchis sinensis were excluded. The general characters of drinking and smoking pattern were introduced by interview with questionnaire provided for. In drinking cases, the longer duration was significantly effected the higher rate of abnormality in AST and ALT level. But the amount and the frequency were not. It was not appeared effects by mackgulri which is a Korean traditional wine and small amount of beers. In smoking cases, also same pattern. The age was related in all cases. By the way, when the effect is related the positive results with other factors: HBs-Ag, Anti-HBs, skin test for Clonorchiasis and harmful occupational history, it is higher abnormal rate of AST and ALT in the duplicated cases with two factors or more. Particularly in HBs-Ag positive cases, those who had smoking was the highest in rate of abnormality, and drinking was the follows. In correlation matrix among seven factors; HBs-Ag, age, drinking amount, drinking period, drinking frequency, smoking amount and smoking period, correlation coefficient was significant between the abnormal rate and to with age, drinking period, smoking period, and smoking amount.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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