• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제24권12호
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• pp.1673-1678
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• 2014

The interactive inhibitory effects of pH and chloride on the catalysis of laccase from Trametes versicolor were investigated by studying the alteration of inhibition characteristics of sodium chloride at different pHs for the oxidation of 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid). At pH 3.0, the addition of sodium chloride (50 mM) brought about a 40-fold increase in $K{_m}^{app}$ and a 4-fold decrease in $V_{max}{^{app}}$. As the pH increased to 7.0, the inhibitory effects of sodium chloride became significantly weakened. The mixed-inhibition mechanism was successfully used to quantitatively estimate the competitive and uncompetitive inhibition strengths by chloride at two different pHs (pH 3.0 and 6.0). At pH 3.0, the competitive inhibition constant, $K_i$, was 0.35 mM, whereas the uncompetitive inhibition constant, $K{_i}^{\prime}$, was 18.1 mM, indicating that the major cause of the laccase inhibition by chloride is due to the competitive inhibition step. At a higher pH of 6.0, where the inhibition of the laccase by hydroxide ions takes effect, the inhibition of the laccase by chloride diminished to a great extent, showing increased values of both the competitive inhibition constant ($K_i=23.7mM$) and uncompetitive inhibition constant ($K{_i}^{\prime}=324mM$). These kinetic results evidenced that the hydroxide anion and chloride share a common mechanism to inhibit the laccase activity.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제27권6호
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• pp.577-583
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• 2019

Human cytochrome P450 2C9 is a highly polymorphic enzyme that is required for drug and xenobiotic metabolism. Here, we studied eleven P450 2C9 genetic variants-including three novel variants F69S, L310V, and Q324X-that were clinically identified in Korean patients. P450 2C9 variant enzymes were expressed in Escherichia coli and their bicistronic membrane fractions were prepared The CO-binding spectra were obtained for nine enzyme variants, indicating P450 holoenzymes, but not for the M02 (L90P) variant. The M11 (Q324X) variant could not be expressed due to an early nonsense mutation. LC-MS/MS analysis was performed to measure the catalytic activities of the P450 2C9 variants, using diclofenac as a substrate. Steady-state kinetic analysis revealed that the catalytic efficiency of all nine P450 2C9 variants was lower than that of the wild type P450 2C9 enzyme. The M05 (R150L) and M06 (P279T) variants showed high $k_{cat}$ values; however, their $K_m$ values were also high. As the M01 (F69S), M03 (R124Q), M04 (R125H), M08 (I359L), M09 (I359T), and M10 (A477T) variants exhibited higher $K_m$ and lower $k_{cat}$ values than that of the wild type enzyme, their catalytic efficiency decreased by approximately 50-fold compared to the wild type enzyme. Furthermore, the novel variant M07 (L310V) showed lower $k_{cat}$ and $K_m$ values than the wild type enzyme, which resulted in its decreased (80%) catalytic efficiency. The X-ray crystal structure of P450 2C9 revealed the presence of mutations in the residues surrounding the substrate-binding cavity. Functional characterization of these genetic variants can help understand the pharmacogenetic outcomes.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2002년도 생물공학의 동향 (X)
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• pp.321-324
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• 2002

본 연구에서는 hGM-CSF를 생산해 배지 내로 분바하도록 유전자 조작된 Nicotiana tabacum 세포를 수성이상계 내에서 배양하여 in situ recovery를 시도하였다. 특히 식물세포 자체의 생상에 큰 영향을 주지 않으면서도 일반 배지에서 회수한 단백질에 비해 많은 양을 생산할 수 있는 수성이상계 시스템을 선정하였다. 6% (w/w) PEG 20,000과 10% (w/w) dextran 2.000,000 을 이용하는 경우 최대 세포 농도가 18.6 g/L 로, 일반배지를 사용하는 경우 (15.7 g/L)에 비해 저해가 없음을 확인하였다. 또한 목적 단백질인 hGM-CSF의 생산에 있어서도 위의 시스템의 경우 dextran-rich phase인 아랫 상으로 분배됨으로 인해 회수가 쉬울 것으로 확인되었으며 그 생산량 또한 일반배지에서의 생산량 (1.5 ng/mL)에 비해 크게 다르지 않음을 확인할 수 있었다. 따라서 hGM-CSF의 회수를 위한 in situ recovery 시스템에 있어서 수성이상계의 이용 가능성을 확인하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권2호
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• pp.320-324
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• 2007

The removal of hydrogen sulfide ($H_2S$) from aqueous media was investigated using Thiobacillus novellas cells immobilized on a $SiO_2$ carrier (biosand). The optimal growth conditions for the bacterial strain were $30^{\circ}C$ and initial pH of 7.0. The main product of hydrogen sulfide oxidation by T. novellus was identified as the sulfate ion. A removal efficiency of 98% was maintained in the three-phase fluidized-bed reactor, whereas the efficiency was reduced to 90% for the two-phase fluidized-bed reactor and 68% for the two-phase reactor without cells. The maximum gas removal capacity for the system was 254 g $H_2S/m^3/h$ when the inlet $H_2S$ loading was $300g/m^3/h(1,500ppm)$. Stable operation of the immobilized reactor was possible for 20 days with the inlet $H_2S$ concentration held to 1,100 ppm. The fluidized bed bioreactor appeared to be an effective means for controlling hydrogen sulfide emissions.

• KSBB Journal
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• 제9권3호
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• pp.319-324
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• 1994

옥수수잎의 유관속초세포 내에 존재하는 malate dehydrogenase(EC 1.1.1.40)을 이용하여 malate 정량용 biosensor를 제작한 후, 기질인 malate에 대하여 여러 가지 조건하에서 측정한 결과, sodium-alginate로 고정화한 것이 하지 않은 것보다 180시 간까지 지나도 40% 이상의 activity를 가지며, 최적 pH는 8.0이었으며 pH 7.4에서 Km치는 $0.6{\times}10^{-5}M$이였다. 전극의 안정성은 연주일 이상 측정이 가능하였으며, 정량 가능한 범위는 $5.5{\times}10^{-5}M∼2.5{\times}10^{-2}M$ 이며, 감응도는 53.7mv/decade이고, 측 정소요시간은 16~18분이 소요되였다. 방해물질로서 각종 염의 영향은 크게 받지 않음을 알았다. 본 연구에서 제작한 조직 biosensor는 효소분리과정을 거치지 않고 조직을 이용하여 malate흘 정량하였다는 것과 지금까지 연구된 효소 바이오센셔와는 랄리 강산성에셔 측정하던가, 한 가지 이상의 효소를 사용하지 않고도 중성영역인 pH=8에서 측정이 가능 하였으며, malate를 탈수소화하여 정량한 연구는 많았지만, 탈탄산화하여 정량한 연구는 없었다. 본 연구에서 제작한 조직바이오센셔는 malate 측정용 sensor로 가능하리라 생각된다.

• 대한원격탐사학회:학술대회논문집
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• 대한원격탐사학회 1999년도 Proceedings of International Symposium on Remote Sensing
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• pp.323-324
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• 1999

• 한국정밀공학회:학술대회논문집
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• 한국정밀공학회 2006년도 추계학술대회 논문집
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• pp.323-324
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• 2006

• 대한전기학회:학술대회논문집
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• 대한전기학회 1996년도 하계학술대회 논문집 A
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• pp.324-327
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• 1996

This paper presents the adoption of PWM converter to enhance input power factor in inverter arc welder. By using PWM converter in inverter arc welder, the disadvantages of bridge diode converter such as low input power factor is improved, new NCT(Noise Cut Transformer) is designed to reduce noise which has harmful effect in switching component, half bridge PWM inverter is adopted to reduce cost in inverter arc welder.

• 분석과학
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• 제6권4호
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• pp.405-409
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• 1993

Memantine HCl을 자외부 유도화제인 MPCN과 반응시켜 흡광광도법으로 정량하였다. 유도화반응은 pH 5, $50^{\circ}C$에서 MPCN을 1:20배 몰비로 사용하여 30분간 반응시켰으며 dichloromethane으로 추출한 후 324.5nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과 memantine HCl의 최종 농도로써 $5.0{\times}10^{-6}{\sim}6.5{\times}10^{-5}M$ 사이에서 직선성을 나타냈으며 detection limit는 $0.43{\mu}g/ml$이었다. 본 분석법을 제제에 적용하였을 때 주사제는 $100.08{\pm}0.72%$였고 정제는 $99.75{\pm}0.77%$로, 부형제에 의한 영향 없이 간편하고 신속하게 재현성 있는 결과를 나타내므로 의약품의 품질관리에 효과적으로 응용될 수 있으리라 사료된다.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제59권3호
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• pp.410-416
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• 2021

본 연구에서는 천연 흑연의 용량과 안정성을 개선하기 위해 석유계 피치로 코팅된 천연 흑연을 제조하여 전기화학적 성능을 평가하였다. 천연흑연과 피치를 건식 스피드 믹서를 이용해 코팅하였으며, 믹서의 회전 속도, 시간, 흑연과 피치의 조성, 피치의 연화점을 변화시키면서 음극 활물질을 제조하였다. 제조된 음극 활물질의 물리적 특성은 SEM, TEM, PSD를 이용해 분석하였으며, 전기화학적 성능은 사이클, 율속, 임피던스, 순환전압 전류 테스트를 통해 조사하였다. 9000 RPM, 10 wt%, 2 h, 연화점 150 ℃ 조건에서 코팅된 천연 흑연을 0.1 C에서 전기화학적 특성을 테스트 하였을 때, 324.5 mAh/g 의 가장 높은 용량과 50 사이클 이후 98.9%의 용량 유지율을 보였다. 고속 충·방전을 위한 테스트에서는 5 C/0.1 C 용량 유지율은 80.3%로 나타났으며, 코팅되지 않은 천연흑연보다 약 1.7 배로 향상된 용량 유지율을 확인할 수 있었다.