국내 토양으로부터 MRSA에 대해 항균활성을 보이는 세균들을 분리하였다. 이들 가운데 가장 높은 항MRSA 균 활성을 보인 YK5 균주는 호기성 간균으로 운동성이 있고, 내생포자를 형성하였으며, 인돌을 형성하지 않았고, mannitol을 분해하여 산을 생성시키지 않았다. 이 균주의 16S rRNA 유전자 염기서열은 Paenibacillus 속 세균들의 유전자와 $95{\sim}98%$의 상동성을 나타냈는데 특히 P. elgii와 가장 높은 상동성을 보였으나, 기타 생리 생화학적 특성에서 다른 점들이 관찰되어 P. incheonensis YK5로 명명되었다. P. incheonensis YK5 를 SST 배지에 접종하여 $37^{\circ}C$에서 96 시간 배양한 다음 그 상등액으로 부터 부탄올로 추출된 항균물질은 그람 양성균인 MRSA 20 균주들과 Streptococcus pneumoniae, 그람 음성균인 Pseudomonas aeruginosa 10균주들, Salmonella spp., Shigella spp., Escherichia coli와 Klebsiella pneumoniae 및 인체병원성 진균인 Cryptococcus neoformans와 Trichophyton spp.에 대하여 광범위한 항균효과를 나타냈다. 또한 이 항균물질은 $20{\sim}100^{\circ}C$ 사이의 온도구간에서 안정한 활성을 유지하였을 뿐만 아니라, pH $3.0{\sim}7.0$의 넓은 pH범위에서 활성을 나타내 MRSA를 비롯한 다양한 병원균에 대한 항생물질로서의 가능성을 보였다.
Salmonella spp.의 신속한 검출을 위하여 엷은 박막형태의 수정결정을 사용하는 압전류적(piesoelectric) 항체센서 시스템을 개발하고 증류수, 완충용액, 식염용액 등의 여러 매질 중에서 보여주는 진동 특성을 검토하였다. Salmonella spp. 균 구조항원(Common structural antigen)에 대한 항체를 수정결정에 PEI pre-coating, BSA 가교화, 3-APTES silanizaition, protein A와 DTBP thiolation의 5가지 방법에 의해 고정화한 후 항체 센서의 안정성을 살펴보았다. Salmonella 균을 주입하였을 때 Salmonella 균과 수정 결정에 고정화한 항체와의 결함반응에 의해 수정결정의 질량증가와 이에 따른 진동수 감소가 나타났다. 고정화방법 중 protein A와 DTBP를 이용하여 고정화하는 방법이 센서반응을 가장 안정적이고 재현성 있게 나타내줌을 알 수 있었다. $7.45{\times}10^{7}\;CFU/ml$의 Salmonella 균을 반응 cell 내에 주입하였을 때 protein A를 이용한 고정화의 경우 80Hz, DTBP를 이용한 고정화의 경우 283 Hz의 진동수 감소가 나타났으며, 압전류적 항체센서를 이용할 경우 40분 이내에 Salmonella spp.의 검출이 가능하였다.
A survey was performed to investigate the infection status of zoonotic trematode (ZT) metacercariae in fish from a local market in Yangon City, Myanmar. A total of 264 fish (12 species) were collected through 4 times from December 2013 to June 2015. All collected fish were transferred to our laboratory on ice and examined by the artificial digestion method. More than 7 species of ZT metacercariae, i.e., Haplorchis taichui, H. pumilio, H. yokogawai, Centrocestus spp., Stellantchasmus falcatus, Pygidiopsis cambodiensis, and Procerovum sp. were detected. Metacercariae of H. taichui were collected in 58 (42.3%) out of 137 fish (5 species), and their average density was 42.9 per fish infected. Metacercariae of H. pumilio were detected in 96 (49.0%) out of 196 fish (9 species), and their average density was 23.6 per fish infected. H. yokogawai metacercariae were found in 40 (50.0%) out of 80 fish (5 species), and Centrocestus spp. metacercariae in 91 (50.8%) out of 179 fish (8 species), and their densities were 306 and 25.8 per fish infected, respectively. Metacercariae of S. falcatus and P. cambodiensis were detected only in mullets, Chelon macrolepis. A total of 280 Procerovum sp. metacercariae were found in 6 out of 12 climbing perch, Anabas testudineus. Morphological characteristics of adult flukes recovered from experimental animals were described. It has been first confirmed that fish from Yangon, Myanmar are commonly infected with various species of ZT metacercariae.
The present research work was conducted to evaluate the beneficial effects as well as the safety aspects of lactobacilli as probiotic. Lactobacilli were isolated from poultry faecal samples, feed samples and from some known preparations procured from poultry feed manufacturers. L. acidophilus and L. sporogenes were tested for the antibacterial activity against four poultry pathogens viz. Escherichia coli, Salmonella spp., Proteus spp. and Pseudomonas aeruginosa. Cell free supernatant (CFS) of L. acidophilus exhibited significantly higher antibacterial activity against Salmonella spp. at original pH (4.50${\pm}$0.02). At the adjusted pH (6.50${\pm}$0.02) significantly higher antibacterial activity was recorded against indicator organism except for P. aeruginosa. Likewise, L. sporogenes exhibited similar antibacterial activity at original as well as adjusted pH except for E. coli. Antibacterial activity against E. coli was significantly higher at adjusted pH than at original pH of CFS. The competitive exclusion of E. coli by lactobacilli over the intestinal epithelial cells (IEC) was checked. L. acidophilus strain I, which was of poultry origin, exhibited maximum attachment over IEC as compared to other three strains of non-poultry origin viz. L. acidophilus strain II, L. sporogenes strain I and II. Overall, L. acidophilus exhibited higher competitive exclusion as compared to L. sporogenes. All the lactobacilli of poultry origin were most sensitive to penicillin G, amoxycillin, ampicillin and chloramphenicol, least sensitive to sulphamethizole, ciprofloxacin, neomycin, norfloxacin and pefloxacin and resistant to metronidazole and nalidixic acid. The isolates from probiotic preparations were most sensitive to ampicillin, amoxycillin and tetracycline, least sensitive to sulphamethizole, norfloxacin, neomycin and ceftriazone and resistant to nalidixic acid and metronidazole. Eight of the multiple drug resistant lactobacilli isolates were studied for the presence of plasmids. Plasmids could be extracted from six isolates of lactobacilli. These plasmids could be responsible for bacteriocin production or for antibiotic resistance of the strains. The lactobacilli need further studies regarding their safety for use in the probiotic preparations.
A survey was performed to investigate the infection status of zoonotic helminth larvae in fish from a local market of North Dagon District in Yangon City, Myanmar. A total of 486 fish in 13 species were collected 8 times from December 2015 to December 2019. All fish were transported under ice to a laboratory in Korea and examined for helminth larvae using artificial digestion method. Larval gnathostomes and metacercariae of more than 8 zoonotic trematode species, i.e., Opisthorchis viverrini, Haplorchis taichui, H. pumilio, H. yokogawai, Centrocestus spp., Stellantchasmus falcatus, Pygidiopsis cambodiensis, and Procerovum sp., were detected. Larval gnathostomes were found in 58 (16.0%) out of 362 fish of 6 species, with mean intensity of 2.8 per fish infected. Metacercariae of O. viverrini were detected in 10 (2.9%) out of 349 fish of 5 species, with mean intensity of 16.9 per fish infected. Metacercarial prevalences of 4 intestinal flukes, H. taichui, H. pumilio, H. yokogawai, and Centrocestus spp., were 16.8%, 26.0%, 12.5%, and 15.0% in the positive fish species, respectively, and mean metacercarial intensity was 63.3, 26.8, 86.2, and 8.7 per fish infected. Metacercariae of S. falcatus and P. cambodiensis were detected only from the mullet, Chelon macrolepis. Metacercariae of Procerovum sp. were found in Channa striata and Anabas testudineus. Collectively, it was confirmed that the fish were infected with gnathostome larvae and metacercariae of O. viverrini and intestinal flukes in Yangon City, Myanmar.
DEAE-sephadex ion exchange column chromatography에 의해 Bacillus sp. 유래 h-mannanase의 정제를 수행하여 비활성은 21.57 units/mg, 정제배율은 93.78배를 나타내었다. 최적 온도는 5$0^{\circ}C$, 최적 pH는 6.0이며, 온도 안정성에서는 30∼5$0^{\circ}C$에서는 90%이상의 잔존활성을 나타내었고,70∼8$0^{\circ}C$에서는 30%이하의 잔존활성을 나타내었다. pH 안정성에서는 pH 5.5∼7.0에서 100%의 잔존활성을 나타낸 반면 pH 2.0∼4.0에서는 40%이하로 감소되 었다. 정제효소에 의해 konjac glucomannan을 가수분해하여 1차 activated carbon column chromatography와 2차 sephadex G-25 gel filtration 에 의해 당가수분해물을 분리 회수하여 TLC및 FACE에 의해 주요 당가수분해물은 중합도 5와 7로 확인되었다. B. iongum, B. btfidum, B. infantis, E. adolescentis, B. animalis, B. breve의 생육활성에 대한 중합도5와7의 영향을 검토하기 위하여 modified-MRS배지상에 탄소원으로 중합도 5와 7을 대체하여 생육활성을 비교한 결과 B. longum의 경우 특징적으로 각각 4.67, 5.33배의 상대활성을 나타내어 우수한 생육활성을 나타내었다. 또한 B. breve에 대해서는 중합도 5 glucomannooligosaccharide를 처리시 2.42배의 생육활성을 나타내었으나 B. infantis와 B. adolescentis에 대해서는 중합도 5와 7의 올리고당을 탄소원으로 대체시 오히려 생육활성이 현저히 감소되었다.
액젓 또는 어간장 제조시 발효기간의 단축과 향미를 개선할 목적으로 최근들어 soy sauce용 koji를 많이 이용하고 있으나 본 연구에서는 soy sauce용 koji를 대체하기 위하여 어육을 기질로 한 koji의 제조 가능성을 검토하였다. 마쇄한 정어리육과 전분을 혼합한 후 살균 처리한 다음 Aspergillus awamori(KFCC. 11439), Aspergillus guercinus (KFCC. 11595), Aspergillus niger(KFCC. 11239), Aspergillus oryzae(KFCC. 32343) 및 Aspergillus sojae(KFCC. l1559)의 곰팡이균을 각각 접종하여 배양 시간에 따른 생육특성을 조사하고 우수한 균주를 선정하여 정어리육을 기질로 한 koji의 효소적 특성을 조사하였다. 생육특성을 조사한 바 $30^{\circ}C$에서 48시간 배양한 후 곰팡이의 포자가 형성되었으며 protease 및 lipase activity는 배양 72시간까지 계속 증가하는 현상을 보였고 trimethylamine생성은 배양 96시간까지 Aspergillus awamori와 Aspergillus niger를 접종한 처리구를 제외하고는 모두 감소되었으며 5종의 Aspergillus spp중 Aspergillus oryzae와 Aspergillus sojae가 비교적 우수한 균주로 선발되었고 적정 배양시간은 72시간이었다. 이 균주를 대상으로 적정 koji의 제조조건을 검토하기 위하여 pH의 변화, 전분의 첨가양 및 배양온도에 따른 protease및 lipase activity를 조사한 바 protease activity는 Asp. oryzae를 접종한 경우 pH 9 부근에서 Asp. sojae의 경우는 pH $6\~7$에서 가장 높은 활성을 나타냈고 lipase activity는 pH $6\~7$ 범위에서 가장 높았다. 전분의 첨가양은 어육중량의 $20\%$(w/w), 배양온도는 Asp. oryzae는 $30\~35^{\circ}C$ 범위에서 Asp. sojae는 $35^{\circ}C$ 부근에서 이들의 활성도가 가장 높게 나타나 어육을 기질로 한 koji의 제조 가능성을 확인할 수 있었다.
본 연구에서는 신선편의 채소와 과일에서 주로 검출되는 대장균(E. coli Ol577:H7), 리스테리아(L. monocytogenes), 살모넬라(Salmonella, spp.), 형색포도상구균(S. aureus)을 검출하고 동정할 수 있는 real time PCR 방법을 melting curve 분석을 활용하여 single tube 반응으로 두 종의 식중독균을 동시 검출하는 방법을 개발하고자 하였다. 대장균의 ${\beta}$-glucuronidase (uidA), 황색포도상구균의 thermonuclease (nuc), 리스테리아의 hemolycin (hly), 살모넬라의 tetrahionate reductase (ttr) 를 특이적으로 검출할 수 있는 4종의 프라이머 세트에 대한 real-time PCR의 melting curve 분석을 통하여 황색포도상구균과 대장균 동시분석 시 $T_m$ 값이 $80.6{\pm}0.9^{\circ}C$와 $86.9{\pm}0.5^{\circ}C$, 리스테리아와 살모넬라 동시분석 시 Tm 값이 $80.4{\pm}0.6^{\circ}C$와 $88.1{\pm}0.11^{\circ}C$로 확인하였고, 그 결과 정제되어진 각 식중독균의 genomic DNA를 주형으로 한 duplex real-time PCR 방법이 uniplex real-time PCR 방법과 마찬가지로 10 genome equivalents 까지 검출할 수 있는 민감도를 나타내었다. 또한, 양배추에 네 종의 식중독균을 접종하고, 증균배양 없이 DNA를 추출하여 duplex real-time PCR 을 수행한 결과 모든 식종목균에서 $10^3$ CFU/g의 검출 한계를 나타내었다. 결과적으로 개발된 melting curve 분석을 이용한 duplex real-time PCR 방법은 식품안전 증진을 위한 시간, 노동력, 비용 절감에 있어서 유효한 방법이 될 것으로 판단된다.
Briatia, Xoxiong;Khanongnuch, Chartchai;Azad, Md Obyedul Kalam;Park, Cheol Ho
한국자원식물학회지
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제29권6호
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pp.712-721
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2016
This experiment was conducted to investigate the endophytic bacterium Herbaspirillum spp effect on seed germination and sprout growth of tartary buckwheat. Inoculant concentration (%v/v) and seed soaking time were applied 10, 20 and 40% and 0, 4, 8, 12 hour, respectively. The experiment was carried out in a growth chamber maintained temperature at 20, 25 and $30^{\circ}C$ without light for 7 days. Results showed that, 10 to 20% (v/v) inoculant concentration by 4 to 8 h seed soaking time at $20^{\circ}C$ temperature increased seed vigor rate and total seed germination rate 80-95% and 90-100%, respectively. On the other and, seed inoculation with Herbaspirillum spp. increased hypocotyl length (13-15 cm), root length (8-11 cm), total fresh weight (135-296 g) and total dry weight (7-10 g), compared to control. It is indicated that sprouts growth and yield depends on inoculation concentrations, seed soaking time and temperature. Therefore, it would be suggested that seed inoculation with Herbaspirillum spp. at concentration of 10 to 20% (v/v), soaking time 4 to 8 h and temperature $20^{\circ}C$ promote seed germinations and sprout growth rate of tartary buckwheat.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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