Park, So Yun;Lee, Ji Yun;Choi, Jun Young;Park, Mae Ja;Kim, Dong Sun
Molecules and Cells
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v.21
no.2
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pp.237-243
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2006
Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) is a neuromodulator of nociceptive responses in the dorsal root ganglia (DRG) and spinal cord. BDNF synthesis increases in response to nerve growth factor (NGF) in trkA-expressing small and medium-sized DRG neurons after inflammation. Previously we demonstrated differential activation of multiple BDNF promoters in the DRG following peripheral nerve injury and inflammation. Using reporter constructs containing individual promoter regions, we investigated the effect of NGF on the multiple BDNF promoters, and the signaling pathway by which NGF activates these promoters in PC12 cells. Although all the promoters were activated 2.4-7.1-fold by NGF treatment, promoter IV gave the greatest induction. The p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitor, SB203580, phosphatidylinositol 3-kinase (PI-3K) inhibitor, LY294003, protein kinase A (PKA) inhibitor, H89, and protein kinase C (PKC) inhibitor, chelerythrine, had no effect on activation of promoter IV by NGF. However, activation was completely abolished by the MAPK kinase (MEK) inhibitors, U0126 and PD98059. In addition, these inhibitors blocked NGF-induced phosphorylation of extracellular signal-regulated protein kinase (ERK) 1/2. Taken together, these results suggest that the ERK1/2 pathway activates BDNF promoter IV in response to NGF independently of NGF-activated signaling pathways involving PKA and PKC.
Kim, Soon-Young;Kwon, Hyuk-Ran;Shin, Dong-Woo;Ryu, Sang-Ryeol
Applied Biological Chemistry
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v.42
no.4
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pp.293-297
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1999
The pts operon, which encodes several factors in the phosphoenolpyruvate:carbohydrate phosphotransferase system (PTS) of Escherichia coli, has multiple promoters which respond to different signals to facilitate quick adaptation to changes in growth conditions. The influence of an 1 kbp DNA region upstream of the pts P0 promoter on pts expression was studied in vitro by employing the DNA templates containing both P0 and P1 promoter with or without the 1 kbp upstream DNA region for in vitro transcription assay. The 1 kbp DNA region upstream of the pts P0 promoter, however, had no effect on pts transcription in vitro. The intracellular concentration of cAMP was measured when cells were grown in the presence of glucose, mannose, or mannitol. The transcription of P0 was increased maximally in the presence of glucose even though the concentration of cAMP in the condition was lowest while the transcription from the P1b was highest when cells were grown in the presence of mannose or mannitol even though the intracellular concentration of cAMP was lower than cells grown in the absence of the sugar. These results suggest the possibility of the existence of a glucose inducible repressor specific for the P0 promoter and a second repressor that is inducible by glucose, mannose and mannitol specific for the P1 promoter.
We have studied anemarrhena asphodeloides, a hair growth promoter as an alternative medicine agent to compensate for the disadvantages of minoxidil, which has excellent hair growth promoting effect on follicular epithelial cells. anemarrhena asphodeloide, an Rhizome plant of aemarrhena asphodeloide family, is a traditional medicinal plant used in Korea as an antipyretic, antidiabetic, antidepressant, antiinflammatory. We applied and observed anemarrhena asphodeloides ethanol extracts to the back of mice, and there was no significant difference in body weight and food intake among all groups of mice. The ethanol extract of anemarrhena asphodeloides showed vigorous hair growth promoting effect without changing the serum composition and thus it is considered to be useful as a hair growth promoter in the future.
Park, Yong-Sung;Yun, Cheol-Won;Kong, Jae-Yang;Kim, Tae-Hyoung;Sung, Ha-Chin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.3
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pp.470-473
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2004
In the yeast Saccharomyces cerevisiae, iron can be toxic. Because of this phenomenon, its metabolism of iron is strictly regulated. We have constructed a model system in which cell growth is defected during periods of iron over-load. When $Aft1-1^{up}$ protein was overexpressed with Ga110 promoter, a galactose inducible promoter, cell growth was defected and levels of CLN2 transcript decreased. However transcript levels of AFT1 and FET3 genes increased over time in a consistent manner throughout the course of $AFT1-1^{up}$ overexpression. We have screened to find genes to suppress cell growth defect by iron overload with YEp-derived high copy yeast genomic DNA library and found that high copy of Rmelp suppressed cell growth defects. Rme1p has been known as an activator protein of CLN2 gene expression. Taking these results together, we suggest that the yeast cell cycle is arrested at the $G_1$, phase by iron overload via Cln2p.
Kim, Jungman;Guevarra, Robin B.;Nguyen, Son G.;Lee, Ji-Hoon;Jeong, Dong Kee;Unno, Tatsuya
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.5
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pp.876-882
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2016
Tylosin has been used as a livestock feed additive and antibiotic growth promoter for many years. However, the mode of action by which tylosin enhances animal growth is unclear. We used high-throughput sequencing of 16S rRNA genes to investigate the effects of tylosin as a feed additive on swine gut microbiota. No significant difference in the rate of weight increase was observed between control and tylosin-treated pigs during a 10-week feeding trial. However, tylosin-treated pigs showed rapid increases in the relative abundance of the phylum Firmicutes. Increases in Firmicutes species are associated with (so-called) obese-type gut microbiota. The abundance of species of four families of the phylum Firmicutes (Streptococcaceae, Peptococcaceae, Peptostreptococcaceae, and Clostridiaceae) correlated positively with host weight gain. The abundance of Streptococcaceae family bacteria was least affected by tylosin treatment. Distribution analysis of operational taxonomic units (OTUs) showed that both control and tylosin-treated pigs exhibited similar OTU alterations during growth. However, the tylosin-treated group showed distinctive alterations in gut microbiota when the host weighed approximately 60 kg, whereas similar alterations occurred at around 80 kg in the control group. Our results suggest that use of tylosin accelerates maturation of swine gut microbiota rather than altering its composition.
This study was carried out to investigate the effects of Bifidobacteria growth promoter BE0623 and a dietary fiber supplement, which included Bifidobacterium lactis BB12, Lactobacillus acidophilus, Streptococcus thermophilus, and Bifidobacterium lactis. In fermented milk containing BE0623, the viable cell count of Bifidobacteria significantly increased by about 45 to 75 times compared to the control, and the titratable acidity increased, whereas the pH decreased. All fractions obtained by isolating BE0623 had Bifidobacteria growth effect. Acacia dietary fiber is a pale yellow powder. It has a viscosity of 60 to 100 cPs and a pH between 4.1 and 5.0. Its general components are less than 10% moisture, more than 90% dietary fiber, and less than 4% ash. The optimal addition ratio of Bifidobacteria growth promoting material was determined to be 0.05%. The general components of the manufactured fermented milk were carbohydrate 17.85%, protein 3.63%, fat 3.00%, and dietary fiber 2.95%. During storage of the fermented milk for 24 days, its titratable acidity, viscosity, and sugar content all met the criteria. In addition, the viable cell counts of Bifidobacteria and lactic acid bacteria in the fermented milk were 1.7 × 108 CFU·mL-1 and 1.5 × 107 CFU·mL-1, respectively, and Escherichia coli was negative. There was no significant difference between the control group and the treatment group in the sensory evaluation of sweet, sour, weight, and flavor, and the preference for the treatment group was excellent. The acceptability of the fermented milk of the treated group according to the storage period was excellent in terms of color, flavor, and appearance.
The production of heterologous protein using GAL promoter in conventional S. cerevisiae has several problems to s이ve for c commercialization. In this research, S. cerevisiae mutant(reg1-501, gaI1), which cannot use galactose and has alleviated g glucose repression level, is used as host for optimizing induction of GAL promoter. In this experiment, the effects of specific g growth rate on specific recombinant protein expression rate were tested in both cases and optimum fed batch fermentation m method was obtained in both cases. Through these experiments, optimum condition of recombinant protein production by G GAL promoter using S. cerevisiae mutant (reg1-501, gal1) were found.
Chlorella is a eukaryotic microalgae which shares metabolic pathways with higher plants. These charac-teristics make chlorella a potential candidate for eukaryotic overexpression systems. Recently, a foreign flounder growth hormone gene was stably introduced and expressed in transformed Chlorella ellipsoidea by using a modified plant transformation vector that contains cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S pro-moter and the phleomycin resistant Sh ble gene as a selection marker. In this study, this same vector was modified by incorporating a promoter and a 3' UTR region of the 33kDa peptide gene from a chlorella virus that was isolated in our laboratory. The 33kDa gene promoter was used to replace the 35S promoter and the 3' UTR was introduced to separate the target gene and downstream Sh ble gene. Three different chlorella transformation vectors containing human erythropoietin (EPO) gene were constructed. The mp335EPO vector consists of a promoter from the 33kDa peptide gene, whereas the mp3353EPO vector contains the same promoter from the 33kDa peptide gene and its 3' UTR. The mp35S33pEPO vector contains the 35S promoter and the 3' UTR from the 33 kDa peptide gene. There was no significant difference in the expression levels of EPO protein in chlorella cells transformed with either of three of the transformation vectors. These data indicate that the promoters from the chlorella virus are comparable to the most common CaMV 35S promoter. Furthermore, these data suggest that other promoters from this virus can be used in future construction of chlorella transformation system for higher expression of target proteins.
Kim, Jong-Hyun;Kim, Jung-Hoe;Kim, Sun-Chang;Nam, Soo-Wan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.10
no.4
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pp.551-553
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2000
A strong constitutive $P_{JH}$ promoter from Bacillus was applied to overexpress the endoxylanase gene in B. subtilis. The expression plasmid, pHJKJ4, was designed to contain the $P_{JH}$ promoter and endoxylanase promoter ($P_B$), and introduced into B. subtilis DB104. Through batch fermentation of the trasformant cell on a maltose medium, endoxylanase was produced in a growth-associated manner as the predominant protein. The total activity reached about 600 unit/ml at the end of the cultivation, which corresponded to 698 mg endoxylanase protein/l with a specific activity of 860 unit/mg protein. It was also found that the segregational plasmid instability was less than 30% and most of the endoxylanase activity was detected in the culture medium. This result suggests that the secretory production of endoxylanase can be significantly enhanced with the use of the $P_{JH}$ promoter and high-cell density culture techniques, quantitatively as well as qualitatively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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