Congenital adrenal hyperplasia(CAH) is a recognized cause of precocious pseudopuberty. Some children with CAH also develop true precocious puberty with early maturation of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. We review a case of CAH who eventually developed central precocious puberty nine months after initial treatment with corticosteroid. A 3-year-old boy visited complaining of rapid growth, a large penis and frequent penile erections. This patient was diagnosed with CAH with elevated 17-OH progesterone and cortical hypertrophy of adrenal gland on CT scan. His gonadotropin levels were within the normal prepubertal range. Even on treatment with corticosteroid he grew rapidly and had testicular enlargement, pubic hair development and rapid bone maturation. At second admission, his gonadotropin levels were elevated both basally and in response to LHRH stimulation, suggesting that the CAH led to early activation of pubertal gonadotropin secretion(true precocious puberty). He was treated with monthly depot injections of a LHRH analog in addition to the hydrocortisone. His second sexual characteristics regressed gradually and rate of linear growth and bone maturation decreased.
It is well known that unidentified factors in sera, hormones and growth factors promote the proliferation of granulosa cells and nuclear maturation of bovine COCs (cumulus oocytes complexes) in vitro. Attempts had been developed the simple composition of culture media and similar system to in vivo conditions has been applied. In the present study, we investigated the effect of FGF (fibroblast growth factor) on in vitro maturation and in vitro development of Hanwoo COCs. When the COCs were matured in HPM 199 (Inst. of Functional peptide, Japan) containing 0.1, 1 and 10 ng/ml FGF for 24 hr, maturation rates to metaphase II ($70.0{\sim}75.0%$) were significantly higher (p<0.05) than that of control group (0 ng/ml FGF, 37.5%). When matured COCs with FGF were cultured in maturation medium after in vitro fertilization, developmental rates to blastocysts were 9.5, 0 and 2.9%, respectively, compared to 25.0% of the control group (p<0.05). When the matured COCs with FGF were cultured in HPM 199 (IFP971, Inst. of Functional peptide, Japan) containing 10% FBS, 0.8% BSA or 0.1% PVA (polyvinyl alcohol), the blastocyst formation rates were 12.4, 12.8 and 8.5%, respectively, while the rates of matured COCs with FGF and cultured with IVMD and IVD (Inst. of Functional peptide, Japan) without serum were 38.4% and 34.8%, respectively (p<0.05). These results suggested that FGF is available for in vitro maturation of bovine COCs and is not suitable for in vitro development, but further investigation would be need for finding the synergistic autocrine/paracrine fashion of other growth factors in early bovine embryo development.
This study aimed to recover the ovarian function through in vitro culture of preantral follicles from aged mice. First, we isolated the preantral follicles from ovaries of sixty-seven-week old B6D2F1 mice with decreased fecundity to know how many follicles were present in them, which was 6 preantral follicles including 2 primary, 2 early secondary and late secondary follicles from 8 aged mice. It was confirmed that a few follicles (~2) were present in aged mice through histological analysis compared to adult mice as control. The 9 days of in vitro culture of preantal follicles showed in vitro growth and induced maturation after treatment with hCG (2.5 IU/mL) and EGF (5 ng/mL). Cumulus cells in the cumulus-oocyte complexes (COCs) were removed using hyaluronidase and oocytes at the germinal vesicle (GV) and GV breakdown (GVBD) were obtained from preantral follicle culture of aged mice in vitro. In conclusion, these observations demonstrated that there still were a few preantral follicles in the ovaries of 67 week-old mice, which we were able to culture in vitro and oocytes were obtained from them. This study proposed an in vitro culture system using preantral follicle as a therapeutic strategy for fertility preservation in humans for assisted reproductive medicine.
This experiment was designed to evaluate the effect of transforming growth factor-$\beta$ (TGF-$\beta$) and insulin-like growth factor-I (IGF-I) in bovine oocyte maturation in the presence or absence of serum on subsequent fertilization and embryo development. In addition, various concent rations of these growth factors were evaluated for the ability to promote development of eight-cell stage embryos to the blastocyst stage. Cumulus-oocyte complexes were recovered from 2 to 6 mm follicles obtained from slaughterhouse ovaries and cultured at 38.5$^{\circ}C$ for 24 hours in TCM-199 (HEPES Modification) with or with out 20 % fetal bovine serum (FBS) to which the following growth factors were added TGF$\beta$ IGF-l or TGF $\beta$ + IGF-I, all at 10 ng/ml each. The matured oocytes were fertilized in IVF-TL medium with frozen-thawed semen at a concentration of 1 ${\times}$ 10$^6$ cells/ml of fertilization medium following Percoll separation. After 24 hours of sperm-egg incubation, the embryos were transferred to CZB medium without glucose for 48 hours and then cultured in TCM-199 with 20% fetal bovine serum (FBS) for 96 hours. The addition of growth factors to IVM medium in the presence of serum had no effect on cleavage and subsequent embryo devlopment to blastocyst. In the absence of serum, TGF- improved cleavage and development to blastocyst compared to control's(p<0.05) and no synergistic effeet of IGF-I + TGF-$\beta$ was observed. In the second experiment, eight-cell embryos obtained by in vitro maturation (IVM) in TCM-199 + 20% FBS without growth facrors and in vitro fertil-ization (IVF) were cultured in the in vitro cuiture (IVC) medium supplemented with 5, 10 ng/ml TGF-$\beta$ or 5, 10, 50, 100 ng/ml IGF-I. Cleavage rate and development to the blastocyst stage was observed during seven days of incubation. The supplementation of 10 ng/ml TGF-$\beta$ to lVC medium for eight-cell embryos improved development to blastocyst (p<0.05) compared to control. In conclusion, these data indicate that the supplementation of growth factors to IVM medium in the presence of serum does not influence cleavage and subsequent embryo development. However, significantly more oocytes matured in serum-free TCM-199 and eight-cell embryos cultured in lVC medium developed to blastocyst with supplementation of 10ng/ml TGF-$\beta$.
This study examined whether the connexin (Cx) is an essential protein during oocyte maturation in the ovary of the goldfish (Carassius auratus). In mature female goldfish ovaries, at late vitellogenic stage, human insulin-like growth factor-I (IGF-I; 20 M) and human chorionic gonadotropin(hCG; 20 IU/㎖) were injected. Twelve hr after the injection, mature female goldfish ovaries were removed and stored at -80C until analysis by RT-PCR. From the goldfish Cx43 cDNA sequence (GenBank accession number AB078505), two degenerate primers were designated. In vivo, 12 hr after the treatment with hCG, goldfish Cx43 mRNA expression level was increased, while the levels of IGF-I was not changed. Goldfish Cx43 mRNA expressed after, but not before the hCG treatment. These results suggest that Cx43 mRNA was judged to be a gene, which was transcribed during oocyte maturation induced by hCG.
Recently, we reported growth arrest-specific gene 6 (Gas6) as a new maternal effect gene (MEG), that expressed in the oocytes but functioned principally during embryogenesis. Gas6 RNAi-treated oocytes developed to metaphase II (MII) stage but they have affected M-phase promoting factor (MPF) activity and incurred abnormal pronuclear (PN) formation during fertilization. Gas6 is a ligand of TAM family members (Tyro3, Axl and Mertk) of receptor tyrosine kinase (RTK). Purpose of the present study was to evaluate the expression of Tyro3, Axl and Mertk transcripts in oocytes and early embryos. Expression of Gas6 and Mertk mRNA was detectable in oocytes and follicular cells, while Tyro3 and Axl mRNA was expressed only in follicular cells. Expression of Mertk mRNA was relatively constant during oocytes maturation and embryogenesis, but the other receptors, Tyro3 and Axl, were not expressed in oocytes and PN stage of embryos at all. Knockdown of Mertk mRNA and protein by using sequence-specific Mertk double strand RNA (dsRNA) did not affect oocytes maturation. In this case, however, contrary to the ligand Gas6 RNA interference (RNAi), MPF activity had not been changed by Mertk RNAi. Therefore, we concluded that the Gas6-Mertk signaling is not directly related to the oocyte maturation. It is still required to study further regarding the function of Mertk as the receptor of Gas6 during preimplantational early embryogenesis.
Kim, Young-Dae;Song, Hong-In;Hong, Jung-Pyo;Jeon, Chang-Yeong;Kim, Su-Kyoung;Han, Hyoung-Kyun;Kim, Dong-Sam;Bang, Jong-Deuk
Journal of Life Science
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v.16
no.6
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pp.1044-1051
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2006
The barren ground is an abnormal phenomenon of coastal ecosystem in which seaweeds, are destroyed and mostly replaced by the coralline algae containing the calcium carbonate components. To restore the seaweed forest, We have exerted an effort in the local areas, Samchuck, Korea, where barren phenomena are profound. Two methods of seaweed forest construction developed in the present study are underwater longline and seed transplantation for the brown seaweed Costaria costata, a fast growing edible seaweed. The sizes of C. costata attached on the underwater longline were $96.7{\pm}2.2mm$ of blade length and $83.6{\pm}7.7g$ of blade weight in April. Thereafter the sizes declined from May. Similar pattern was obtained from in the transplantation method with maxima of $90.4{\pm}15.8mm$ and $70.1{\pm}31.7g$ for blade length and weight, respectively in April. It appeared totality maturation from two methods in May. This maturation time is the same like that of wild C. costata.
Antioxidant effect of traditional doenjang(TD) was reduced by increasing of maturation period. Methanol fractionate of TD matured for 1 year showed strong antioxidant effect against linoleic acid, following the order of hexane and water layer. Antioxidant effect in lipophilic and hydrophilic extracts of TD were gradually increased according to increasing maturation period, whereas their values or two extracts were lower than those or fractionates from TD. Hydrogen-scavenging effect in hydrophobic extract, methanol and butanol fractionates of TD were much higher than those of the other samples. Chloroform and ethylacetate fractionates were markedly lower in the range of $10.57{\sim}22.84\%\;and\;7.82{\sim}22.58\%$, respectively. Anticarcinogenic effect of extracts and fractionates from TD were higher in water fractionates for A549 cell (human lung carcinoma) and methanol fractionates fur MCF-7 cell (human breast adenocarcinoma). Especially, inhibitory effect for growth of cancer cell was increased by the increasing maturation period of TD.
Cheruveetil, Mohammed Ashraf;Shetty, Prasanna Kumar;Rajendran, Arya;Asif, Muhammed;Rao, Kamini A
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.48
no.4
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pp.352-361
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2021
Objective: The study assessed the developmental potential of germinal vesicle (GV) oocytes subjected to in vitro maturation (IVM) after prematuration culture with cilostamide (a phosphodiesterase-3 inhibitor) and the impact of cilostamide exposure on the morphology of meiosis II (MII) oocytes and subsequent embryo quality. Methods: In total, 994 oocytes were collected from 63 patients. Among 307 GV oocytes, 140 oocytes were selected for the experimental group and 130 oocytes for the control group. The denuded GV-stage oocytes were cultured for 6 hours with cilostamide in the experimental group and without cilostamide in the control group. After 6 hours, the oocytes in the experimental group were washed and transferred to fresh IVM medium. The maturational status of the oocytes in both groups was examined at 26, 36, and 48 hours. Fertilization was assessed at 18 hours post-intracytoplasmic sperm injection. Embryo quality was assessed on days 3 and 5. Results: In total, 92.1% of the oocytes remained in the GV stage, while 6.4% converted to the MI stage (p<0.01) after cilostamide exposure. In both groups, more MII oocytes were observed at 36 hours (25.8% vs. 21.5%) than at 26 hours (10.8% vs. 14.6%) and 48 hours (13% vs. 7.9%) (p>0.05). With the advent of cilostamide, blastocyst quality was better in the experimental group than in the control group (p<0.05). Conclusion: Cilostamide effectively blocked nuclear maturation and promoted cytoplasmic growth. Prematuration culture with cilostamide enabled synchronization between cytoplasmic and nuclear maturity, resulting in better blastocyst outcomes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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