국산 미생물 발효차의 폴리페놀 색소성분들인 데아플라빈(TF)과 데아루비긴(TR) 및 EGCG를 macrophage cell line (RAW264.7에 적용하여 nitric oxide 합성 및 사이토카인 생성을 평가하였다. 사이토카인 생성은 TF, TR 및 EGCG를 RAW264.5 cell에 적용하였을 때, $80\;{\mu}g/ml$ 농도에서 대조군과 LPS 촉진 처리에 비하여 nitric oxide 생성은 약 1.5배 증가하였다. IL-6, $TNF-{\alpha}$ 및 GM-CSF는 TF, TR 및 EGCG 농도에 의존적으로 증가하였다. $TNF-{\alpha}$ 생성은 크게 증가하였으며, 이는 TF, TR 및 EGCG가 사이토카인 생성을 통하여 면역증강 효과를 가질 것으로 나타났다 TF, TR 및 EGCG는 총 페놀 함량에 비례하여 항산화능을 나타내었으며, 암세포 증식을 유의적으로 억제하였다. 이들 폴리페놀물질의 억제효과는 그 성분들의 항암촉진작용 및 항산화활성에 의한 것으로 판단된다.
Objective : This study was designed to investigate the effects of Curcuma longa Rhizoma(CLR) on asthma. Methods : Detecting splenocyte proliferation rates, cytokines and antigen specific antibody isotypes in bronchoalveolar lavage fluid (BALF). In addition, the present author I also investigated changes in spleen and histopathological changes of lung tissues. Results : Oral administration of CLR lowered spleen weight and splenocyte proliferation rates. In addition, levels of IL-4, IL-17A and Granulocyte/Macrophage Colony-Stimulating Factor(GM-CSF), Th2 driven cytokines, were lowered respectively and IFN-g, and Th1 driven cytokine, were elevated by CLR. Levels of Ovalbumin(OVA) specific IgE and IgGl in BALF were also lowered by oral administration of CLR too. Conclusion : CLR is useful to treat patients with asthma and the mechanisms are related to the in suppression of Th2 skewing reactions.
Many Lactobacillus strains have been promoted as good probiotics for the prevention and treatment of diseases. We engineered recombinant Lactobacillus casei, producing biologically active canine granulocyte macrophage colony stimulating factor (cGM-CSF), and investigated its possibility as a good probiotic agent for dogs. Expression of the cGM-CSF protein in the recombinant Lactobacillus was confirmed by SDS-PAGE and Western blotting methods. For the in vivo study, 18 Beagle puppies of 7 weeks of age were divided into three groups; the control group was fed only on a regular diet and the two treatment groups were fed on a diet supplemented with either $1\times10^9$ colony forming units (CFU)/day of L. casei or L. casei expressing cGM-CSF protein for 7 weeks. Body weight was measured, and fecal and blood samples were collected from the dogs during the experiment for the measurement of hematology, fecal immunoglobulin (Ig)A and IgG, circulating IgA and IgG, and canine corona virus (CCV)-specific IgG. There were no differences in body weights among the groups, but monocyte counts in hematology and serum IgA were higher in the group receiving L. casei expressing cGM-CSF than in the other two groups. After the administration of CCV vaccine, CCV-specific IgG in serum increased more in the group supplemented with L. casei expressing cGM-CSF than the other two groups. This study shows that a dietary L. casei expressing cGM-CSF enhances specific immune functions at both the mucosal and systemic levels in puppies.
Nutrigenomics refers to research that investigates the interaction between nutrition and the human genome. Caffeine in tea and coffee is widely and routinely consumed by people. This study was performed to confirm the effect of caffeine treatment on the gene expression and cytokine profiling in 3T3-L1 adipocyte cells using microarray and protein array methodology. Treatment of caffeine in 3T3-L1 adipocyte cells increased expression of several genes related with obesity including adipocyte C1Q and collagen domain containing (ACDC), Adipsin (ADN), uncoupling protein 3(UCP3), while glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), which is known as lipid storage enzyme, was decreased by caffeine treatment. Furthermore, cytokines, such as interleukin-3 (IL-3), interleukin-12(IL-12), interleukin-13 (IL-13), granulocyte colony stimulating factor (GCSF), granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) and vascular endothelial growth factor (VEGF), were decreased in caffeine treated 3T3-L1 adipocyte cells. These results provided interesting information about the genes related with caffeine and cytokine expression profiling in obesity.
Objective : The purpose of the current series of experiments were to assess the effect of GM-CSF, as a medium supplement, on the development of mouse embryos and the expression of LIF and IL-1? mRNA. Materials and Methods: Mouse 2-cell embryos were collected from the oviducts of 6 weeks old ICR mice at 48 hours after hCG injection. Embryos were cultured in P-1 medium supplemented with mouse GM-CSF (0, 1, 5, 10 ng/ml). The embryo development to blastocysts and hatching blastocysts was assessed and the cell number in blastocyst was also examined. Using RT-PCR, the expressions of LIF and IL-1? mRNA in blastocyst were evaluated in the GM-CSF supplemented group and control group. Results: In mouse, the addition of GM-CSF increased the percentage of blastocysts (65.5%, 68.6%, 73.0% and 76.1% for control and 1, 5 and 10 ng/ml, respectively), and increased the proportion of hatching blastocysts (35.2%, 36.4%, 43.2% and 53.0% for control and 1, 5 and 10 ng/ml, respectively). The mean cell numbers in blastocyst were significantly increased in GM-CSF supplemented groups compared to control group. LIF and IL-1? expression in blastocyst were significantly higher in GM-CSF supplemented group than in control group. Conclusion: The results of experiment by mouse embryos showed beneficial effects of GM-CSF as a medium supplement. Furthermore, the addition of GM-CSF significantly increased the expression of LIF and IL-1? in mouse embryos. These results suggest that GM-CSF might be a important molecule in embryo implantation.
The Angelicae dahuricae radix (ADR) has been used a traditional medicine to treat acne, erythema, headache, toothache, sinusitis, colds, and flu in Korea, Japan and China. Here, we report the effect of ADR on compound 48/80-induced ear-swelling and the phorbol myristate acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187-induced inflammatory cytokine secretion in the human mast cell line, HMC-1. ADR dose-dependently inhibited the ear-swelling response induced by intradermal injection of compound 48/80, In vitro model, PMA plus A23187 significantly increased interleukin $(IL)-1{\beta}$, IL-8, granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF), and tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ secretion compared with media control. We also show that the increased cytokines $IL-1{\beta}$, IL-8, GM-CSF, and $TNF-{\alpha}$ level was significantly inhibited by treatment of ADR. In addition, ADR partially blocked PMA plus A23187-induced extracelluar signal-regulated kinases phosphorylation. These results suggest that ADR might explain its beneficial effect in the treatment of mast cell-mediated inflammatory diseases.
연구배경: 미세먼지는 여러 가지 유기물과 무기물의 복합체로 그 구성 성분이 시간과 장소에 따라 다르고 모양과 크기도 일정하지 않으며, 특히 지름 $10{\mu}m$이하의 미세먼지 (particulate matter 10; $PM_{10}$)는 흡입이 가능한 입자의 크기여서 하부기관지 및 폐의 가스-교환부분까지 침착하여 호흡기계에 손상을 일으킬 수 있다. 본 연구에서는 황사에 포함된 $PM_{10}$과 비황사 시기에 포집된 $PM_{10}$이 폐상피세포주에 작용하여 전염증성 사이토카인(proinflammatory cytokine) 및 cytokine messenger RNA(mRNA)의 발현에 어떤 영향이 있는지를 관찰하여 기관지 천식과 만성 폐쇄성 폐질환등 호흡기 질환의 증상 악화기전에 미치는 역할을 규명하고자 하였다. 연구방법: 공기 포집기(HV 500F, sibata model)를 이용하여 황사와 비황사 기간에 하루 6시간씩 실외의 장소에서 대기분진을 membrane filter에 포집한 다음, $PM_{10}$입자를 추출하고 폐암 상피세포주인 A549 cells(한국세포은행주)에 $PM_{10}$을 농도에 맞게($10{\mu}g/ml$, $100{\mu}g/ml$, $500{\mu}g/ml$) 노출시켰다. 각각의 노출된 세포로부터 interleukin(IL)-$1{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-8, granulocyte macrophage colony stimulating factor(GM-CSF)의 mRNA를 역전사중합효소연쇄반응(reverse transcriptase polymerase chain reaction; RT-PCR) 방법으로 측정하였다. 결 과: 황사 및 비황사 기간 중 포집된 $PM_{10}$을 가했을 시 가하지 않은 대조군에 비하여 $IL-1{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-8, granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF)의 m'RNA와 cytokine의 발현이 유의하게 높았으며, 황사 기간의 고농도의 $PM_{10}$에 노출된 세포의 $IL-1{\alpha}$ mRNA는 비황사 기간의 $PM_{10}$에 노출된 세포의 mRNA보다 증가되어 있었다. 결 론: $PM_{10}$은 A549 cells에서 전염증성 사이토카인의 발현을 증가시키고 비황사 기간보다 황사 기간 중 대기 중에서 채취한 $PM_{10}$에 노출된 A549 cells에서 일부의 전염증성 사이토카인의 mRNA발현을 더욱 증가시키는 것을 알 수 있었다. 따라서 황사 기간의 $PM_{10}$에 의한 일부의 전염증성 사이토카인의 발현 증가가 만성 호흡기 질환의 증상 악화기전에 연관되어 있을 가능성을 시사하였다.
Background: Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) gene-transduced tumor cell vaccines induce very potent systemic anti-tumor immunity in preclinical and clinical models. Our previous phase I clinical trial in patients with metastatic renal cell carcinoma (RCC) has demonstrated both immune cell infiltration at vaccine sites and T cell-mediated delayed-type hypersensitivity (DTH) response to whole tumor cell vaccines. Methods: To investigate the immune responses to autologous genetically- modified tumor cell vaccines, tumor-specific $CD8^+$ T cell lines were generated from peripheral blood lymphocytes (PBL) of a RCC patient 1.24 by repeated in vitro stimulation with either B7.1-transduced autologous RCC tumor cells or B7.1-transduced autologous tumor cells treated with interferon gamma ($IFN{\gamma}$), and cloned by limiting dilution. Results: Among several RCC-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs), a $CD4^+/CD8^+$ double positive T cell clone (17/A2) appeared to recognize $IFN{\gamma}$-treated autologous RCC restricted by HLA-B39. The 17/A2 also recognized other HLA-B39 positive RCC tumor cells after $IFN{\gamma}$ treatment. Conclusion: These results demonstrate that autologous RCC vaccination successfully generates the tumor-specific CTL 17/A2, and suggest that the presentation and recognition of the tumor antigen by the 17/A2 might be upregulated by $IFN{\gamma}$.
Purpose: This study was carried out to investigate the anti-inflammatory effects of Ligustri Lucidi Fructus water extract (LF) in the lipopolysaccharide (LPS)-induced mouse macrophages RAW 264.7 cell. Methods: Ligustri Lucidi Fructus was extracted with distilled water (2,000 ml) for 2 hours. In order to evaluate cytotoxicity of LF, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay was performed. To investigate anti-inflammatory effects of LF, the concentration of nitric oxide (NO) was measured with NO assay, cytokine was measured by Bio-Plex cytokine assay, and intracellular calcium (Ca) was measured with Fluo-4 Ca assay in RAW 264.7 cell. And when p-value is below 0.05, it is judged to have the significant difference statistically (P<0.05). Results: 1. LF showed no cytotoxicity. 2. LF inhibited significantly the production of NO at the concentration of 25, 50 and $100{\mu}g/ml$. 3. LF inhibited significantly the production of interleukin (IL)-4, macrophage inflammatory protein (MIP)-$1{\alpha}$, granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/ml$. 4. LF inhibited significantly the production of granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF), vascular endothelial growth factor (VEGF) at the concentration of 50, 100 and $200{\mu}g/ml$, the interferon (IFN)-${\gamma}$ at 25, 50 and $100{\mu}g/ml$ respectively. 5. LF inhibited significantly the production of IL-$1{\beta}$ at the concentration of 50 and $200{\mu}g/ml$, the IL-5 at 25 and $100{\mu}g/ml$, the IL-12p70, MIP-$1{\beta}$ at 50 and $100{\mu}g/ml$, the regulated on activation, normal T cell expressed and secrete d (RANTES) at 100 and $200{\mu}g/ml$ respectively. 6. LF inhibited significantly the production of IL-10, interferon gamma-induced protein (IP)-10 at the concentration of $200{\mu}g/ml$. 7. LF inhibited significantly the production of intracellular Ca at the concentration of 25, 50, 100 and $200{\mu}g/ml$. Conclusions: These results suggest that LF has anti-inflammatory effect and immuno-modulating activity.
목적 : 인삼은 다양한 생물학적 작용이 있다. 그 중 항염증작용과 관련하여 염증성 사이토카인 분비 및 저산소 유도인자-1${\alpha}$ 활성화 조절 효과를 살펴보고자 한다. 방법 : phorbol myristate acetate (PMA)+A23187에 유도된 세포에서 염증성 cytokines 분비의 변화와 인간의 mast cell인 HMC-1 cells에서 hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1)${\alpha}$의 작용을 관찰하였다. 결과 : PMA+A23187은 대조군과 비교해서 interleukin $(IL)-1{\beta}$, IL-6와 tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$의 분비를 증가시킨다. 또한 증가된 cytokines IL-1, IL-6, $TNF-{\alpha}$가 인삼의 처리에 의해 두드러지게 억제하는 것을 확인하였다. 인삼(5 ${\mu}g/ml$)은 $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$의 분비를 약 105.1${\pm}$9.7%, 95${\pm}$9.4%, 29.7${\pm}$4.5%,(P<0.05)로 최대로 억제하였고, PMA+A23187에 유도된 vascular endothelial growth factor (VEGF)와 granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF)의 분비를 41.3%와 75.7%로 각각 억제하였다. 그리고 저자는 인삼이 PMA+A23187로 유도된 HIF-1${\alpha}$ 발현과 HIF-1에 대해 DNA binding activity를 억제하고 있음을 관찰하였다. 결론 : 인삼이 HIF-1에서 염증반응을 억제함을 나타내고, 이는 인삼이 염증성 질환을 치료하는데 유익한 효과가 있음을 의미한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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