• 대한한의학회지
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• 제24권1호
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• pp.74-83
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• 2003

Background : Production of cytokines by bronchial epithelial cells may contribute to the local accumulation of inflammatory cells in patients with bronchial asthma. In many recent studies, molecular biological methods have been used to investigate the role of cytokines in pathogenesis and new therapeutic targets of asthma. Objective : We aimed to identify the dose-dependent inhibitory effects of Socheongryong-tang and Socheongryong-tang plus Sasam (Adenophorae Radix) on the mRNA expressions of Interleukin (IL)-6, IL-8 and granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) involved in the asthma model. Materials and Methods : In this study, BEAS-2B cell lines, human epithelial cells, were used. These cells were stimulated by tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha},{\;}IL-1{\beta}$ and histamine for artificial inflammatory expression. ${\beta}-actin$ messenger RNA (mRNA) was used for the internal standard. After each 24 hours of the Socheongryong-tang (小靑龍湯) and Socheongryong-tang plus Sasam (小靑 龍湯加沙蔘) treatment, total cellular RNAs were collected by applying RNAzol directly to the living cells. Then the transcriptional activities of IL-6, IL-8 and GM-CSF were measured by RT-PCR with electrophoresis. Results : In the Socheongryong-tang (小靑龍湯) study, the mRNA expressions of IL-6, IL-8 and GM-CSF were significantly inhibited compared to that of the control group (p<0.05). In the Socheongryong-tang plus Sasam (小靑龍湯加沙蔘) study, the mRNA expressions of IL-6, IL-8 and GM-CSF were significantly inhibited compared to that of the control group (p<0.05). Conclusions : This study shows that Socheongryong-tang (小靑龍湯) and Socheongryong-tang plus Sasam (小靑龍湯加沙蔘) have dose-dependent inhibitory effects on the mRNA expressions of IL-6, IL-8 and GM-CSF in human epithelial cells, so these herbal medicines may inhibit the inflammatory process of asthma. Advanced studies are required to investigate the mechanisms of inhibition by herbal medicine in the asthma model.

• 대한바이러스학회지
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• 제30권2호
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• pp.141-150
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• 2000

The effectiveness of noninfectious recombinant adenovirus encoding murine granulocyte-macrophage colony stimulating factor (mGM-CSF) for the treatment of Meth A fibrosarcoma was investigated in syngeneic BALB/C model. Meth A and HeLa cells transduced with the recombinant adenovirus (Ad.mGM-CSF) produced substantial amounts of mGM-CSF, while WEH1164 cells transduced with the virus did not produce mGM-CSF. Mice inoculated subcutaneously with $1{\times}10^6$ Meth A cells, followed by injection of Ad.dE1 as a control, developed large tumors that reached a mean tumor size of 22 mm by day 30. However, tumor development and tumorigenicity were significantly inhibited in mice with a single intratumoral injection of Ad.mGM-CSF at $1{\times}10^8\;pfu$. Histological examination of the tumors injected with Ad.mGM-CSF revealed dense infiltrates of neutrophils, histiocytes, lymphocytes, and eosinophils associated with apoptotic cell death. The results suggest that the recombinant adenovirus encoding GM-CSF have a potential use for cancer gene therapy.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제46권4호
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• pp.376-381
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• 2003

목 적 : G-CSF와 GM-CSF는 과립구생성에 중요한 사이토카인으로서, 각각의 수용체(이하 G-CSFr과 GM-CSFr)에 결합하여 기능을 하게 되며, 이들 수용체들은 미성숙 골수 세포로부터 성숙된 말초 과립구까지 발현된다. 일반적으로 혈중 G-CSF와 GM-CSF의 농도 및 이들 수용체의 발현은 과립구가 증가하는 감염질환에서 변화한다고 알려져 있으나, 가와사키병에서 과립구 수 증가와 관련된 변화에 대해서는 아직 연구된 바가 없다. 본 연구에서는 가와사키병 환아와 정상아의 혈중 G-CSF와 GM-CSF의 농도를 측정하고 말초혈액의 과립구 표면에 존재하는 이들의 수용체를 정량분석 하였으며, 또한 수용체를 충분히 포화시킬 수 있는 과량의 CSF에 수용체를 노출시켰을 때 결합하지 않고 남은 수용체 발현양에는 어떤 변화가 있는 지를 분석하여 가와사키병 환자의 과립구 수 증가와 G-CSF와 GM-CSF 및 이들 수용체 변화의 관련성을 규명하고자 하였다. 방 법 : 정상 대조군으로서 비감염성질환으로 입원한 같은 연령대의 아동 중 말초혈액 백혈구 수 및 중성구 수가 정상인 아동 13명과 면역글로불린을 쓰기 전 급성기 초기의 가와사키병 환아 14명, 총 27명의 혈중 G-CSF와 GM-CSF의 농도를 측정하였고 세포표면 G-CSFr와 GM-CSFr의 발현양은 각각 항 G-CSF 수용체 단클론항체, 항 GM-CSF 수용체 단클론항체와 혼합 후 유세포 분석기를 이용하여 정량적으로 분석하였으며, 활동성 G-CSFr, GM-CSFr의 양적변화를 유세포 분석기를 이용하여 측정하였다. 결 과 : 가와사키병 환아의 총 백혈구 수는 정상대조군과 차이가 없었으나 중성구 수, 단핵구 수는 증가하였고 총 백혈구수는 중성구 수 증가에 따라 증가하였다. 혈중 G-CSF의 농도는 정상대조군과 유의한 차이가 없었으나 감소되어 있었고(P=0.133) 혈중 GM-CSF의 농도는 정상대조군에 비해 유의하게 감소되어 있었다(P=0.027). 가와사키병 환아의 중성구의 G-CSFr, GM-CSFr의 발현양은 정상대조군과 통계적으로 유의한 차이가 없었다(P=0.721, P=0.912). 수용체를 포화시키기에 충분한 과량의 CSF와 배양시킨 후 포화농도에도 결합하지 않은 수용체의 양을 측정하면 남은 수용체수는 감소하게 되는데, 가와사키병 환아에서 과량의 G-CSF에 배양한 후 감소된 중성구 G-CSFr의 발현양은 정상대조군과 유의한 차이는 없었고(P=0.554), 혈중 G-CSF 농도와는 무관하였으며(P>0.05) 혈중 GM-CSF 농도와 반비례하였다(정상아; r=-0.589, P=0.044, 가와사키병 환아; r=-0.946, P=0.004). 가와사키병 환아와 정상대조군에서 수용체를 포화시키기에 충분한 과량의 GM-CSF에 배양한 후 중성구의 GM-CSFr의 발현양을 분석한 결과는 발현이 증가된 소견을 보여(P=0.255) 항 GM-CSF항체가 항 G-CSF 항체와는 달리 GM-CSF와 그 수용체의 결합에 무관한 것으로 나타났다. 증가된 중성구의 GM-CSFr의 양은 정상아에서는 총 백혈구 수와 비례하였으나(r=0.788, P=0.035), 가와사키병 환아에서는 상관관계가 없었다(P=0.644). 결 론 : 가와사키병 환아의 백혈구 수 증가의 원인은 중성구 수의 증가로 보이고 G-CSF, GM-CSF의 농도는 감소되어 있었으며 G-CSFr, GM-CSFr 발현양 및 활동성 G-CSFr, GM-CSFr 발현양은 정상아와 유의한 차이가 없어서 이는 중성구 수 증가가 G-CSF, GM-CSF의 증가나 그 수용체 수 변동에 의한 것이 아닌 것으로 나타났고 GM-CSF 농도의 감소가 활동성이 있는 G-CSFr의 증가를 일으켜 가와사키병 급성기 총 백혈구 수 증가의 원인인 중성구 수 증가를 유도했을 가능성을 나타낸다.

• Applied Microscopy
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• 제39권3호
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• pp.253-260
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• 2009

상처치유는 growth factor와 cytokine들의 복합적인 작용에 의해 일어나는 과정이다. GM-CSF는 호중구와 대식세포를 분화시키고 각질세포를 증식시키는 다면발현성 사이토카인으로 여러 세포에서 재조합되어 사용되고 있다. (주)핸슨바이오텍에서 개발한 rice cell 유래의 재조합 rrhGM-CSF는 다른 세포에서 유래된 GM-CSF들보다 탄수화물 측쇄가 많은 것이 특징이다. rrhGM-CSF의 창상치유효과를 알아보기 위하여 햄스터에 만성 당뇨를 유도하여 상처치유가 어려운 동물모델을 만든 후, 등쪽에 인위적으로 피부 전 층을 제거하여 창상을 유발하였다. 실험군에는 rrhGM-CSF가 포함된 연고를 적용하고, 대조군에는 base cream만을 적용하여 재상피화되는 과정과 피부조직의 구조 및 PCNA 반응을 통한 세포증식 정도를 비교하였다. 육안 및 조직학적 관찰 결과, rrhGM-CSF를 적용한 그룹의 재상피화 속도가 더 빨랐으며, PCNA 면역조직화학적 조사에서도 증식하는 각질세포의 수가 대조군보다 상대적으로 많은 것으로 나타남으로써, rrhGM-CSF에 의한 피부상처 치유 효과를 관찰할 수 있었다. 이러한 결과들로 미루어 보아 벼세포 유래의 rrhGM-CSF는 국소적인 피부 창상 치유에 효과적인 것으로 보이며, rrhGM-CSF의 풍부한 당화 사슬은 이 단백질이 상처부위에 안정된 상태로 기능을 나타냄으로써 효과를 오랫동안 지속시킬 수 있었던 것으로 사료된다.

• KSBB Journal
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• 제30권3호
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• pp.103-108
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• 2015

Production of foreign proteins by transgenic plant cell cultures has several advantages such as post-translational modification, low risk of product contamination and low-cost production and purification. However, target proteins are degraded by extracellular proteases existing in the media. A solution to this problem is the use of perfusion culture and ion exchange chromatography for the application of integrated bioprocess using in situ recovery. With this method, production of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF) was investigated in this study. First, optimization of cell concentration during the induction phase for the production of hGM-CSF was examined. As cell concentration increased, the level of hGM-CSF was decreased due to the presence of extracellular proteases. Induction using sugarfree media produced 33% more hGM-CSF. The effects of pH on the binding of hGM-CSF to cationic and anionic exchange resins were also investigated. In terms of stability, optimal pH was found to be 5~7. In the case of using buffer exchange when CM-Sepharose was used as a cationic exchange resin, optimal pH for binding was 4.8 and adsorption yield was 77%. When DEAE-Sepharose was used as an anionic exchange resin, it was 5.5 (74%). Without buffer exchange, optimal pH was 4.6 (84%). From these results, an integrated bioprocess using in situ recovery with simultaneous production and separation of foreign protein in transgenic plant cell suspension cultures was found to be feasible.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제16권1호
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• pp.365-370
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• 2015

GM-CSF는 중요한 조혈모세포 성장인자로서 면역요법에서 중요한 기능을 한다. 본 연구의 목적은 GM-CSF가 돼지 처녀생식배아의 발달과 세포 수 및 착상관련 유전자의 발현에 관한 영향을 평가하는 것이다. 본 연구에서 돼지 처녀 활성화 배아는 GM-CSF가 5, 10, 20 ng/ml 존재 하에서 7일 동안 배양하여 배 반포의 형성율과 전 세포 수 그리고 유전자 발현을 평가하였다. 그 결과 단백질이 없는 배양액에 20 ng/ml의 GM-CSF를 첨가 하였을 때 배 반포의 형성 율이 유의적으로 증가하였으며 배반포의 세포 수 또한 GM-CSF 를 첨가한 배양액에서 증가 하였다. GM-CSF는 처녀생식 배 반포에서 interleukin-6의 mRNA 발현을 증가 시켰으나, LIF 수용체 mRNA 발현에는 영향을 주지 않는다는 것을 real time RT-PCR로 밝혀내었다. 이 결과로 GM-CSF 성분이 확인된 배양액에서 돼지 배아의 체외 발달 과 생존력을 강화 시켰음을 시사하고 있다.

• Applied Microscopy
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• 제40권2호
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• pp.73-80
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• 2010

Granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF)는 과립구 및 대식세포뿐만 아니라 상피세포의 증식과 분화를 자극하는 당단백질이며, 최근 생산된 벼세포 유래 재조합 GMCSF(rrhGM-CSF)는 감염원으로부터 안전하고 당사슬이 매우 풍부하여 물질의 안정성 혹은 효과의 지속성을 높여 주는 것으로 알려졌다. 본 실험에서는 간 재생 능력이 우수한 흰쥐를 실험모델로 하여 간의 78%를 제거한 후, 간 재생을 유도하는 과정에서 rrhGM-CSF를 처리하고, 시간 경과에 따라 형태변화의 차이와 더불어 단백질 발현 분석법과 면역조직화학법을 이용하여 PCNA 발현에 미치는 효과에 대해서 알아보고자 하였다. rrhGMCSF는 간 재생 속도를 뚜렷이 증가시키지는 못하였으나, 대조군에 비해 실험군에서는 재생 초기에 간 세포판의 붕괴와 재구성 시기를 다소 앞당기는 것으로 관찰되었다. 증식 중인 세포에서 증가하는 것으로 알려져 있는 핵단백질인 proliferating cell nuclear antigen (PCNA)의 간 조직에서의 분포와 발현 정도를 보면 부분간절제 후 12시간과 24시간에서는 PCNA 단백질이 두 그룹에서 조금씩 발현되다가 간 절제 3일과 5일이 경과한 실험군에서 단백질이 높게 발현되었다. 간 재생이 진행될수록 간 조직 전체에서 고르게 PCNA 양성반응이 나타났으며, 대조군 보다 실험군에서 반응성이 더 뚜렷한 것으로 나타났다. 이러한 결과들로 보아 부분 간절제 후 간 재생을 유도하는 과정에서 rrhGM-CSF가 세포분열을 촉진시키는 인자들 중의 하나로 작용하여 간 재생에 효과를 나타낼 수 있을 것으로 사료된다.

• 동의생리병리학회지
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• 제18권6호
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• pp.1896-1903
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• 2004

Anglicae dahuricae Radix (ADR), the dried roots of Angelica Dahurica Benth et Hook (Umbelliferae), is a traditional herbal medicine used to treat colds, headache, skin diseases such as acne and possess analgesic, antipyretic and drainage effects. In the present study, the author evaluated the effect of ADR on regulation of inflammatory reaction. ADR reduced the ear-swelling responses derived from compound 48/80 in dose-dependent manner significantly. ADR inhibited the PMA plus A23187-induced productions of IL (Interleukin)-8, IL-1β, granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) and tumor necrosis factor (TNF)-α from human mast cells (HMC)-1. In addition, ADR blocked PMA plus A23187-induced ERK1/2 phosphorylation. Ⅰ suggest that ADR regulates inflammatory reaction through inhibition of inflammatory cytokines such as IL-8, IL-1β and GM-CSF.

• Advances in Traditional Medicine
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• 제5권1호
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• pp.69-74
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• 2005

'SecSec' has been used for the purpose of prevention and treatment of throat diseases such as sore throat, cough, bronchial asthma and allergic asthma in Korea. However, its effect in experimental models remains unknown. To investigate the biological effect of SecSec, we examined cytotoxicity and secretion of inflammatory cytokines on human leukemic mast cell line, HMC-1, stimulated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and calcium ionophore A23187. SecSec by itself had no cytotoxicity on HMC-1. When SecSec (1 mg/ml) was added, the secretion of tumor necrosis factor-alpha $(TNF-{\alpha})$, interleukin (IL)-6, and granulocyte macrophage-colony stimulating factor (GM-CSF) was significantly inhibited about 47.20%, 25.55%, and 46.43%, respectively on PMA plus A23187-stimulated HMC-1 cells. But SecSec did not inhibit IL-8 secretion. These findings may help understanding the mechanism of action of this medicine leading to control activated mast cells on allergic inflammatory condition like asthma.

• 대한약침학회지
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• 제15권1호
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• pp.7-11
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• 2012

Aim: Historically, mineral compound herbal medicines have long been used in treatments of immune-related diseases in Korea, China and other Asian countries. In this study, we investigated the anti-inflammatory effect of egg white combined with chalcanthite (IS4) on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells. Methods: RAW 264.7 cells cultured with LPS and various concentrations of IS4 were analyzed to determine the production of pro-inflammatory cytokines and mediators by using enzyme-linked immune sorbent assays (ELISAs). Results: IS4 concentration inhibited the production of interleukin-1beta (IL-$1{\beta}$), interleukin-6 (IL-6), and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) induced by LPS. IS4 at high concentrations (25 and 50 ${\mu}g/ml$) inhibited, in concentration-dependent manner, the expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$) stimulated by LPS. Conclusion: IS4 has shown an anti-inflammatory effect in RAW 264.7 cells.