This study was conducted to compare the effects of n-6 linoleic acid and n-3 linolenic acid on lipid peroxidation and the activities of enzymes defending against oxidation, which are involved in the tumor promotion, and histolOgical changes of hepatocarcinogen treated rat liver. In this study, weanling male Sprague-Dawley rats were fed one of three diets, containing 15% (w/w) of beef fat (BF), com oil (CO) or perilla oil (PO), for 11 weeks. During the 3rd week, experimental groups were injected with 2-AAF (50 mg/kg of BW) intraperitoneally 3 times. Findings show that the com oil diet group has greater liver MDA content than the beef fat and perilla oil diet groups. Also, it is observed that the perilla oil diet group has lower MDA content than beef fat and com oil diet groups, even though perilla oil is more desaturated than beef fat and com oil. In terms of activity, mixed-function oxidase activity is not Significantly affected by the different dietary fats and 2-AAF treatment. GSH-peroxidase, GSH-reductase and GSH-Stransferase activities are significantly higher in the CO+AAF group than those of the other groups. GST and GSH-Px are activated by 2-AAF treatment in the com oil diet group only. The hepatocytes of the BF+AAF group were the most severely degenerated, the second was the CO+AAF group and the least was the PO+AAF group. It was also found that dietary com oil increased lipid peroxidation and activated defense enzymes against oxidation in liver, but dietary perilla oil did not, or supressed defense enzymes. Therefore it is concluded that dietary n-3 linolenic acid in perilla oil inhibits lipid peroxidation and carcinoenesis in rat liver following 2-AAF treatment.
Objectives : Polymorphisms of genes from glutathione Stransferases (GSTs) and N-acetyltransferase 2 (NAT2) have been associated with increased susceptibility to various cancers. Previous results showed that East Asians such as Koreans, Japanese and Chinese have a much higher frequency of the GSTM1 and GSTT1 null genotypes and NAT2 rapid acetylator type. Therefore, we investigated the association between the polymorphic types of GSTs (GSTM1, GSTT1, GSTP1) and NAT2 and the incidence of gastric cancer which is one of the most prevalent cancers among the East Asians. Methods : It was performed in a case-control study consisting of 238 healthy subjects and 108 cancer patients (54 distal and 54 proximal carcinomas). We also evaluated the association between GSTs and NAT2 and the risk factors for gastric cancer such as alcohol consumption, smoking, H. pylori infection, family history of gastric cancer, and tumor location. Results : In our study, the percentage of cases whose hometown was rural was higher than those of controls (odds ratio (OR) =2.88; 95% CI=1.72-4.76), and the frequency of the lower socio-economic status increased significantly in patients (OR=2.53; 95% CI=1.59-4.02). There was no significant difference in the GST polymorphic types between the cases and controls. However, NAT2 rapid or intermediate acetylator types were frequently detected in the cases with family history of gastric cancer (OR=1.92; 95% CI=1.79-26.0). Conclusions : These results suggest that the hometown and socio-economic status are important environmental factors for gastric carcinogenesis, and NAT2 polymorphic types could be associated with familial gastric carcinoma.
Plectasin, the first defensin extracted from a fungus (the saprophytic ascomycete Pseudoplectania nigrella), is attractive as a prospective antimicrobial agent. The purpose of this study was to establish a bacterium-based production system and evaluate the antimicrobial activity of the resulting plectasin. A gene encoding plectasin, with the codon preference of Escherichia coli, was optimized based on its amino acid sequence, synthesized using genesplicing with overlap extension PCR, and inserted into the expression vector pGEX-4T-1. The fusion protein was expressed in the soluble fraction of E. coli and purified using glutathione Stransferase affinity chromatography. Plectasin was cleaved from the fusion protein with thrombin and purified by ultrafiltration. The purified plectasin showed strong, concentrationdependent antimicrobial activity against gram-positive bacteria, including antibiotic-resistant bacteria, especially penicillin-resistant Enterococcus faecium. This antimicrobial activity was equal to chemically synthesized plectasin and was maintained over a wide range of pH and temperatures. This soluble recombinant expression system in E. coli is effective for producing plectasin at a relatively lower cost, and higher purity and efficiency than prior systems, and might provide a foundation for developing a large-scale production system. Overall, plectasin shows potential as a novel, high-performance, and safe antibiotic for the treatment of refractory diseases caused by drug-resistant bacterial strains.
Spirogyra neglecta, a freshwater green alga, is a local food in the northern and northeastern parts of Thailand. This investigation explored the anticarcinogenicity of S neglecta and its possible cancer chemopreventive mechanisms in rats divided into 14 groups. Groups 1 and 10 served as positive and negative control groups, respectively. Groups 1-9 were intraperitoneally injected with diethylnitrosamine (DEN) once a week for 3 weeks. Groups 10-14 received normal saline instead. One week after the last DEN injection, groups 2-5 were administered for 9 consecutive weeks various doses of S neglecta extract (SNE) and dried S neglecta (SND), mixed with basal diet. Groups 6-9 and 11-14 similarly were administered various doses of SNE and SND starting from the first week of the experiment. Administration of SNE and SND was not associated with formation of glutathione-Stransferase placental form (GST-P) positive foci in rat liver. SNE and SND during initiation phase significantly reduced the number of GST-P positive foci in rats injected with DEN. The number of GST-P also diminished in groups treated with SNE and SND after injection with DEN, except for the low dose extract group. SNE showed stronger anticarcinogenic potency than SND. Furthermore, SNE also decreased the number of Ki-67 positive cells. However, the numbers of TUNEL-positive cells in the liver of the SNE-treated groups were not statistically different from the controls. The GST activity in 50 mg/kg bw of SNE and 1% of SND groups was significantly increased as compared to the positive control. In conclusion, Spirogyra neglecta (Hassall) K$\ddot{u}$tzing showed cancer chemopreventive properties at the early stages of diethylnitrosamine-induced hepatocarcinogenesis in rats. Possible inhibitory mechanisms include enhancement of the activities of some detoxifying enzymes and/or suppression of precancerous cells.
목적:. 방사선 감수성이 다른 마우스 조직에서 apoptosis 유도 수준을 확인하고 방사선 감수성에 관여 된 인자를 Proteomics를 통해서 확인한다. 대상 및 방법: C3H/HeJ 마우스에 10 Gy 방사선을 조사하고 8시간 후 비장과 간을 채취하여 apoptosis 유도 수준을 비교 분석하였다. 조직에서 단백질을 추출하여 2-dimension electrophoresis (2-DE)를 실시하였다. 2-DE에서 방사선에 의해 발현의 변화를 보이는 gel의 spot를 trypsin 처리하여 MALDI-TOF 측정한 후 Swiss-prot database를 통하여 단백질 을 동정하였다. 결과: Apoptosls index는 방사선 조사 후 비장 조직에서 $35.3{\pm}1.7{\%}$, 간조직은 $0.6{\pm}0.2{\%}$로 비장에 비해 간 조직이 낮게 나타났다. Proteomoics 결과에서 방사선 내성 조직인 간은 ROS대사에 관여되는 단백질인 glutathione Stransferase Pi, carbonic anhydrase, NADH dehydrogenase, peroxiredoxin VI, riken cDNA 등이 방사선 조사 후 증가되었고 apoptosis 관련된 단백질인 cytochrome c는 간과 비장 조직에서 확인되었다. 그러나 방사선 민감 조직인 비장에서는 방사선 조사 후 산화적 Stress에 관련된 단백질, apoptosis 관련 단백질, 신호 전달에 관련된 단백질, 면역반응, cell cycle, Ca 신호 전달, 대사 cycle에 관련된 단백질 등이 방사선에 관련하여 발현의 변화를 보여 주었다. 결론 : Apoptosis유도 수준이 다른 조직에서 apoptosis에 관련된 단백질과 redox에 관련된 단백질은 방사성 감수성 조절에 관련된 것으로 보인다.
본 연구는 Monascus pilosus mycelial ethanol extract (MPME)의 간 손상 예방 효과를 관찰할 목적으로 고지방-고콜레스테롤 식이로 유도한 비만 흰쥐(Sprague-Dawly계)를 대상으로 실험하였다. 실험동물은 정상 대조군(NC)과 고지방-고콜레스테롤 식이군(고지방식이군)으로 분류하였으며, 고지방식이군은 15% lard-1% cholesterol 첨가 5L79 diet로 3주간 성장시켜 비만을 유도한 후 고지방식이 대조군(HF), 0.5% MPME extract 첨가 고지방식이군(MPM) 및 2% CLA (conjugated linoleic acid) 첨가 고지방식이군(CLA)의 4개군 (n=5)으로 나누어 7주 동안 성장시켜 다음과 같은 결과를 얻었다. 1일 평균 체중증가량은 NC군은 3.48 g, HF군은 4.48 g인데 비하여 MPM군과 CLA군은 각각 3.09 g 및 4.38 g으로 HF군에 비하여 각각 31.03% 및 2.24%의 감소를 나타내었다. 체중에 대한 간 중량(%)은 모든 실험군에서 NC군에 비해 유의하게 증가하였으나 MPM군은 HF군에 비하여 유의하게 감소하였으며 CLA군은 HF군과의 차이를 보이지 않았다. 간 조직손상의 지표로 이용되는 혈청 ALT와 AST의 활성은 HF군에서는 NC군 보다 2.70배 및 2.55배가 각각 증가하였으며, CLA군은 NC군의 수준으로 회복되지는 못하였으나 HF군에 비해 현저히 감소하였고 MPM군에서는 정상상태인 NC군 수준으로 감소되었다. MPM군과 CLA군의 간조직 reduced glutathione의 함량은 HF군에 비해 높게 나타났으며, 이와 반대로 MPM 및 CLA군의 과산화지질 함량은 현저하게 낮았다. HF군의 간 조직 xanthine oxidoreductase (XOR)의 type O활성과 O/T ratio는 NC군에 비해 증가하였으며, MPM과 CLA군의 경우에는 HF군에 비해 감소하였다. 또한 HF군의 간 조직 superoxide dismutase (SOD) 및 glutathione Stransferase (GST)의 활성은 NC군에 비해 감소하였으나 MPM과 CLA군에서는 HF군에 비해 증가하였다. 이상의 결과를 종합해 볼 때, 본 실험의 결과로서는 MPME의 정확한 간 보호기전을 알 수가 없으나 MPME는 지방의 흡수를 억제함과 동시에 SOD와 같은 ROS 제거계 효소의 유도를 통하여 비만과 간 조직 손상을 예방하거나 경감시키는 효과가 있는 것으로 생각된다.
연구배경 : 90% 정도의 만성폐쇄성 폐질환(COPD) 환자들이 흡연력이 있으나 흡연자의 15~20%에서만 COPD가 발생하는 것은 유전자 감수성 등 다양한 다른 인자들의 영향이 있음을 암시한다. 담배 연기 속에 포함된 epoxide를 가수 분해하는 효소인 microsomal epoxide hydrolase(mEPHX)의 효소 활성은 두 개의 유전자 다형성 양상에 따라 서로 다르므로 이 다형성의 양상에 따라, 그리고 활성화된 유독 물질을 대사시키는 glutathione Stransferase의 M1 subunit 유전자 (GSTM1)의 homozygous deletion 여부에 따라 COPD의 발생 위험도 다를 것으로 예측된다. 대상 및 방법 : 전남 대학교 병원 호흡기 내과에 내원한 58예의 COPD군과 이와 연령이 비슷한 폐결핵 환자 59례 및 정상인들 20례로 구성된 대조군(79예)의 말초혈액 백혈구로부터 추출한 DNA를 이용하여 mEPHX 유전자의 다형성과 GSTM1 유전자의 결손 여부 그리고 임상 양상과의 관계를 관찰하였다. mEPHX 유전자의 exon 3과 exon 4를 각각 두 쌍의 primer를 이용하여 증폭하여 제한 효소 절단 양상으로 유전자 다형성 위치의 염기를 확인하였고 일부에서는 염기 서열을 직접 확인 하였다. 또한 GSTM1 유전자의 exon 4와 exon 5 부위를 PCR 증폭하여 homozygous deletion 여부를 혈액응고인자 V를 양성대조로 이용하여 확인하였다. 결 과 : COPD와 대조군 양군 간에 연령 ($63.7{\pm}10.9$ vs $60.4{\pm}8.1$세)은 차이를 보이지 않았고 흡연자는 COPD군(33/40, 82.5%)이 대조군(38/71, 53.5%)에 비하여 많았다(p<0.01). GSTM1은 73예가 결손되어 53.3%의 결손율을 보였는데 COPD군(32/58, 55.2%)과 대조군(41/79, 51.9%) 사이에 유의한 차이는 없었다. mEPHX는 29예(21.2%)가 slow, 73예(53.3%)가 normal, 32예(23.4%)가 fast enzyme activity를 보이는 유전자형이었는데, slow enzyme activity를 보이는 유전자형의 빈도가 COPD군(7/57, 12.3%)에서 대조군(22/77, 28.6%)보다 유의하게 낮았다(p<0.05). COPD 발생의 비교 위험도는 mEPHX의 낮은 효소 활성을 보이는 유전자형이 0.32 (95% 신뢰구간 0.14-0.75, p<0.01)를 보였으나, 흡연자들만을 이용하여 비교하였을 때는 mEPHX의 유전자형에 따른 COPD의 빈도는 차이가 없었다. 결 론 : 소수의 집단을 대상으로 한 본 연구에서 GSTM1 결손이나 mEPHX의 유전자형은 COPD 발생의 유의한 위험인자는 아니었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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