• Toxicological Research
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• 제18권4호
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• pp.369-374
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• 2002

The present study was performed to validate an automated image analysis system (Loats Automated Micronucleus Scoring System) for the mouse bone marrow micronucleus assay, comparing with conventional microscopic scoring. Two studies were conducted to provide slides for a comparison of micro-nucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) values collected manually to those collected by the auto-mated system. Test article A was used as an example of a compound negative for the induction of micronuclei and test article B was wed as a micronucleus-inducing agent to elicit a positive response. Cyclophosphamide was included to provide an positive control in two studies. Bone marrow samples were collected 24 h after administration of test article A and B in male ICR mice. The cells were fixed with absolute methanol and stained with May-Grunwald and Giemsa. The number of MNPCEs was determined by the analysis of 1000 total PCEs per bone marrow sample. In addition to micronucleus scoring, an index of bone marrow toxicity based on PCE ratio (% of PCEs to total erythrocytes) was determined for each sample. The automated and manual scoring was similar when the MNPCEs incidence induced by each test article was less than 10. However manual scoring was able to effectively enumerate micronucleated PCEs in mouse bone marrow when MNPCEs incidence was more than 10, such as cyclophosphamide treatment. Conversely, PCE ratio was superior in computer-assisted image analysis. Taken together, it is suggested that improvement of the automated image analysis may be necessary to render the automatic scoring as sensitive as manual scoring for routine counting of micronuclei, especially because it is superior in objectivity and high throughput scoring.

• 대한방사선치료학회지
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• 제4권1호
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• pp.71-77
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• 1990

본 연구는 악하선 세포를 배양하고 전리 방사선을 조사하여 배양 세포의 DNA 합성능의 변화와 염색체의 구조적 이상을 연구하였다. SG세포는 DME배지에 $10\%$ FBS와 항생제, fungizone등이 첨가된 배양액에 배양하였다. 배양 악하선 세포에 대한 전리 방사선의 조사는 선량별로 $^{60}Co$ gamma선원을 이용하여 (dose rate 58.4 rad/min)실시하였다. 배양세포의 DNA 합성에 관한 방사선의 효과는 $^{3}H-TdR$의 동조율(incorporation)을 측정하여 평가하였다. 전리 방사선에 의하여 유발된 배양 악하선 세포의 염색체 이상을 관찰하기 위한 염색체 표본제작은 일반적으로 널리 사용되고 있는 방법에 따랐으며, 제작된 슬라이드는 Giemsa염색액으로 단염색 하였다. 본 실험에서 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 배양 악하선 세포의 DNA 합성능은 전리 방사선의 양이 증가함에 따라 그 합성능이 감소하였다. 2. 방사선 조사후 배양2일째에 그 DNA 합성능이 회복되었다. 3. 본 연구에 나타난 염색체 이상은 염색체 절단(single break과 double break), 결손, triradius등이었으며 polyploid도 관찰되었다. 4. 전리 방사선에 의해 유발된 염색체 이상은 선량의 증가에 따라 그 발생빈도 역시 증가되었다.

• 한국동물학회지
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• 제8권1호
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• pp.11-14
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• 1965

The object to this study is to identify the genus and species of the microfilariae which were recently found in the area of Youngju-Gun. THe identification of the microfilariae was made on the morphologicla aspects. 1. Blood samples were collected through vena punction from known microfilariae carriers living in the newly confirmed filaria endemic area of Youngju0Gun in Jyongsang Pukdo Province. Youngju-Gun is located in the mountainous central part of Korean Peninsula. 2. The following fixation and staining techniques were applied. (1) Fixation by drying in the air, followed by staining with Azeo or Giemsa. (2) Knott's fixation method (2% formalin), followed by staining with Azur II. 3. A comparative study of the body length of the microfilariae after different fixation and staining techniques were applied. (1) Knott's fixation method followed by staining with Azur II : average body length found was 28.4$\mu$. (2) Dry fixation followed by staining with Giemsa : average body length found was 209.4$\mu$. (3) Dry fixation followed by staining with Azeo : average body length found was 205.4$\mu$. 4. The locations of the different body cells were measured in 60 individuals of microfilariae in the wet preparation fixed by Knott's method and stained with Azur II. The distance of the different body cells to cephalic apex of microfilariae was measured and calculated as a percentage of the total body length. The average results are as follows : BNC , 3.04% ; N, 22.74%, EP, 31.4% ; EC, 37.77%, G1 cell , 67.94%; G2 cell, 73.54% : G3 cell , 75.55% ; G4 cell, 77.65% ; AP, 82.02%%. 5. As a result of the above findings the microfilariae found in the above mentioned area could be identified as Brugia malai(BRUG, 1927) BUCKLEY, 1960.

• 미생물학회지
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• 제27권4호
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• pp.342-347
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• 1989

Fusarium 속의 20균주를 PDA 배지에서 배양하고. HCI-Giemsa 염색법을 이용하여 균사 내에서의 영양핵의 핵분열을 관찰하였고, 염색체 수를 세었다. 관찰한 모든 Fusarium 속의 균주들익 염색체 수는 4-8개 사이에 있었다. 그 중에서 3균주인 F. solari S Hongchun D4. F. moniiforme(from banana), F. raphani (from radish)는 n=8개이고, F, solani 7468(from Sydney), F, solani 7475 (from Sydney), F, oxyporum (from tomato), F, oxyporum(from tomato). F F. roseum(from rice), F, sporotrichioides C. Jungsun 1, F. avenaceum C Kosung 6. F, avenaceum46039 등의 7균주에서는 n=7개였다 F. monilzfonne (from rice), F. graminellrum, F. probiferatum 6787(from Sydney), F. anguioides ATCC20351의 5균주는 n=6개 F. moniliforme NRRL2284. F. poae NRRL3287. F. tricintum NRRL 3299의 3균주는 n=5개였고 가장 적은 수의 n=4개인 균주로는 F. sporotrichioides NRRL3510과 F. equiscli KFCC 11843 IFO 030198의 3균주였다. 이상의 균주들의 염색체 수를 비교 고찰할 때 Fusarium 속의 기본 염색체 수는 반수체가 4개이며 종 분화과정에서 이수체와 배수체가 되었을 것으로 추론된다.

• 미생물학회지
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• 제22권4호
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• pp.207-214
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• 1984

2-deoxy-D-glucose가 첨가된(25 pg/ml) 최소액체 배지에 8.5시간 전 배양하여 swelling 시킨 conidiospore에 2% driselase와 2% ${\beta}-glucuronidase$를 동량 혼합한 효소용액을 처리하여 반응시킨 결과 protoplast형성 시간 2시간이내로 단축 시킬 수 있었다. 5% Ficoll(m.w. 400,000)용액을 사용하여 conidial protoplast를 보다 순수하게 분리 벙제할 수 있었으며, protoplast를 Giemsa로 핵 염색한 결과, 대부분의 protoplast는 하나의 핵을 갖고 있었다. 또한 전자현미경으로 관찰한 결과 conidiospore에서 유래된 protoplast는 세포벽 성분이 남아 있지 아니한 완전한 protoplast인 것으로 판명되었다. 영양요구성 돌연변이주에서 유래된 conidial protoplast의 융합률은 $3.4{\times}10^{-1}$에서 $4.9{\times}10^{-1}$수준으로 이는 mycelial protoplast의 경우보다 5-28배 가량 높은 수준의 것이었다.

• 한국동물학회지
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• 제15권4호
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• pp.214-224
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• 1972

작년 9월 2$\\sim$4일에 프랑스, 파리에서 사람의 染色體에 관한 國際會議(The Standardization Conference on Human Cytogenetics)가 열렸는데, 이것은 Denver, Londan 및 Chicago 會議(1960, 1963, 1966)에 계속해서 개최된 4번째 會議가 된다. 계속해서 이틀후인 9월 6일부터 1주일간 같은 장소인 파리에서 4차 國際人類遺傳學會가 개최되었다. 이들 양 會議에서 사람의 染色體에서 밴드 구조를 얻을 수 있는 特殊染色法과 그에 따른 染色體의 새로운 同定과 命名法이 화제의 중심이 되었던 것이다. 이 사람은 다행히 이들 회의에 참석할 기회를 얻어 이 문제를 토의하는 회합에 참석했기에 여기 간단히 그 문제를 해설해볼까 한다. 1956년 Tjio 및 Leven이 사람의 染色體의 정확한 수를 확인했고, 그 뒤 Denver 및 London 國際會議를 거쳐서 사람 染色體의 同定과 命名에 관한 國際的인 規約이 정해지기는 했지만, 23쌍의 사람의 染色體 하나 하나를 정확히 구분하기란 어려운 일로되었다. 종래의 방법으로 얻어진 사람의 染色體를 顯微鏡 밑에 色體 1쌍(X-Y, X-X)으로 구분을 하지만 실제로 확신을 갖일 수 있는 것은 常染色體에서 6쌍과 Y染色體만이였다. 다음 1960년대에 染色體 연구에 널리 이용되어온 오토래디오그리피(Autoradiography)는 DNA 複製의 시간적인 차이를 통해 染色體 固定에 큰 도움을 주었지만 실제로 정확한 식별이 가능케 한 것은 常染色體쌍 5과 여성의 X染色體 1개만 이라고 하겠다. 이렇게 생각한다면 남어지 11쌍의 常染色體와 1개의 X染色體는 1970년에 이르기까지 정확한 同定은 불가능했다고 말할 수 있다. 그러나 1970년을 전후해서 이문제에 관한 정세는 일변했으며, 여러 가지 特殊染色法이 개발되어 사람의 染色體 하나 하나를 정확히 식별 할 수 있는 단계에 접어들게 되었다. 그중에서도 식별 할 수 있는 단계에 접어들게 되었다. 그중에서도 대표적인 것이 키나크린 螢光染色法(quinacrine fluorescence staining method)와 김자分染法(heat-giemsa staining method)이며 이들 방법을 통하면 染色體의 縱軸에 따라 특유한 明暗의 밴드 패턴(banding patterns)이 나타나게 되어, 사람만이 아니라 고등한 동물의 모든 染色體가 쉽게 同定이 된다는 것이다.

• 대한수의학회지
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• 제28권1호
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• pp.155-163
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• 1988

For the laboratory diagnosis of Sarcocystis infections especially in domesticated food animals, several antificial digestion techniques were applied for the musculature specimens and several staining techniques was applied for the bradyzoites of Sarcocystis species isolated. The digestion technique using trypsin(0.5%) and sodium chloride(0.85%) mixed solution was regarded as the most valuable for the detection of asexual stages of Sarcocystis in bovine musculature specimens. Optimal time for digestion was approximately one to four hours. The trypsion digestion technique with Giemsa's stain could be helpful for the detection of Sarcocystis prolferative forms and for the observation of the nucleus of the parasite. A systematic detection was also performed in an autopsy for a bovine carcass naturally infected with Sarcocystis species, and the asexual stages such as metrocytes and bradyzoites were observed in the specific organs, respectively.

• Journal of Plant Biology
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• 제18권3호
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• pp.92-100
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• 1975

The present study demonstrates karyotype based on H-patterns of A.fistulosum and A. ascalonicum using Giemsa technique. The results obtained in this study are summarized as follows: I). Karyotypic analysis of A. fistulosum is 6VII＋$JII^t＋JII$ and that of A. ascalonicum collected from a local farm in the suberbs of Taegu city clearly heterozygous as $13V＋J_1^t＋J_2＋i. ii$). The heterochromatin of both species is generally located distally in both arms of chromosomes and each chromosome type possesses some variations on H-patterns. iii). The percentage of heterochromatin to total chromosome length in cell is about 14.6% in A. fistulosum, 12.8% in A. ascalonicum. The number of bands is revealed about 38 in A. fistulosum and 33 in A. ascalonicum. Also in the amounts of chromocenters per nucleus, the former is somewhat more than the latter.

• 한국패류학회지
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• 제18권1호
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• pp.23-26
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• 2002

경기도 가평군 외서면 호명리와 강원도 정선군 신동읍 조동리에서 채집된 깨알달팽이, Diplommatina (Sinica) paxillus와 큰깨알달팽이, Diplommatina (Sinica) changensis를 대상으로 공기건조법에 의한 염색체 관찰을 실시하였다. 실험결과 2종 모두 2n=26의 염색체 수를 지니며 6쌍의 중부염색체와 7쌍의 차중부염색체로 구성된 동일한 핵형을 나타내었으나 각 염색체 쌍의 크기와 완장비, 상대적 길이 등에서 종간 차이를 발견할 수 있었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제51권2호
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• pp.213-218
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• 2013

Malaria is a parasitic infection caused by Plasmodium species. Most of the imported malaria in Korea are due to Plasmodium vivax and Plasmodium falciparum, and Plasmodium ovale infections are very rare. Here, we report a case of a 24-year-old American woman who acquired P. ovale while staying in Ghana, West Africa for 5 months in 2010. The patient was diagnosed with P. ovale malaria based on a Wright-Giemsa stained peripheral blood smear, Plasmodium genus-specific real-time PCR, Plasmodium species-specific nested PCR, and sequencing targeting 18S rRNA gene. The strain identified had a very long incubation period of 19-24 months. Blood donors who have malaria with a very long incubation period could be a potential danger for propagating malaria. Therefore, we should identify imported P. ovale infections not only by morphological findings but also by molecular methods for preventing propagation and appropriate treatment.