고추에 발생하는 흰가루병은 전 세계적으로 매년 발생이 늘어나고 있으며, 특히 시설재배에 있어서 가장 문제가 되는 병중에 하나다. 2009년 4월 및 9월에 강원, 충북, 경남 및 전남 등 4지역을 대상으로 흰가루병 발생 실태를 조사하였다. 시설재배지에는 15.3~81.8%(평균 71%), 노지재배에서 16.8~72.3%(평균 46%)의 이병엽율을 보여 시설재배에서 발생이 많음을 볼 수 있었다. 병징은 잎 뒷면에 밀가루를 뿌려 놓은 것처럼 하얗게 분생포자가 퍼져 있고, 아랫잎은 황색으로 탈색되거나 낙엽되었다. 온도에 따른 고추 흰가루병의 분생포자 발아력을 조사한 결과, $25^{\circ}C$에서 처리후 6시간에서 발아율이 35.9%였으며, 습도는 85%에서 38.5%로 발아율이 가장 높았다. 온도 및 습도별로 발아관을 측정한 결과, 온도는 $20{\sim}25^{\circ}C$에서 습도는 85~93%에서 각각 105.8~107.8 ${\mu}m$ 및 79.7~80.3 ${\mu}m$로서 가장 길게 나타났다. 고추 흰가루병을 접종시킨 후 병 진전에 따른 발병도를 조사한 결과 접종 후 8일부터 병징을 보이다가, 15일 후에 병 발병도가 53.3~73%로서 급격하게 높아지는 것을 볼 수 있었다. 고추 흰가루병 인공접종 체계를 구축하기 위하여 분무접종, 압착 및 타락방법을 사용한 결과, 분무접종보다는 압착 및 타락방법이 높은 발병도를 나타내었다. 특히 타락방법을 이용한 인공접종에서는 발병도가 72%로서 가장 높은 발병도를 나타내어 병 저항성 검정을 위한 접종방법으로 추천할 만 하였으나, 금후 안정적이고 대량접종을 위해 효율적인 접종방법 개발이 필요하였다.
오이덩굴쪼김병균 Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum의 소형분생포자는 물한천배지상에서 Fe-EDDHA를 처리하였을 때 시간이 경과됨에 따라 발아율이 증가되어 무처리와 유의차를 보이지 않았으나 발아관의 길이는 현저하게 짧았다. Pseudomonas putid의 Siderophore를 처리하였을 때는 포자의 발아율과군사신장이 모두 현저하게 억제되었다. 토양중에 형성된 후막포자가 발아하는데 필요한 영양물질로 Glucose; Peptone을 각각 $0.25\%$씩 첨가하였을 때 $90\%$에 달하는 높은 발아율을 나타냈고, Glucose $0.25\%$와 Asparagine $0.25\%$를 첨가한 처리도 $86\%$의 발아율을 보였다. 오이의 근권토양에서 후막포자는 발아후 10일된 유묘에서 $25\%$의 발아율을 보인 반면 2일된 유묘에서는 $14\%$ 정도 밖에 안되었으며, 10일 이상 경과된 묘에서도 발아율이 증가되지 않았다. 근권토양에 Fe-EDDHA를 첨가한 처리와 P. putida를 접종한 처리는 후막포자의 발아를 현저히 억제하였으며, 근권부위에 영양물질을 첨가한 처리에서도 같은 경향이었다. 그러나 비근권토양에 영양물질을 첨가하여 후막포자를 발아시켰을 경우 Fe-EDDHA나 P. putida의 발아 억제 효과가 뚜렷하게 인정되지 않았다. 근권토양에서 후막포자 발아 억제효과는 Fe-EDDHA보다 P. putida를 접증한 처리가 더 큰것으로 나타났다.
최근 들깨잎 주산지인 부산시 강동지역과 경남 밀양지역 하우스내의 들깨잎에 가장자리가 검게 변하고 마르는 증상을 띄는 병해가 발생되고, 심하면 잎 전체가 고사하는 병이 발생되었다. 이런 병반으로부터 병원성이 강하고 분생포자 형성이 많은 SD1 균주를 분리하여 병원균의 형태 및 배양적 특성을 조사한 결과 PDA 평판배지에서 $25^{\circ}C$, 암조건으로 배양할 경우 균사생장이 가장 왕성하였으며, 분생포자 형성량은 V8A 평판배지에서 가장 많았다. 또한 SD1 균주의 균사생장 적온은 $25^{\circ}C$, 분생포자 형성 적온은 3$0^{\circ}C$였으며, 분생포자 현탁액에 첨가한 영양원에 따른 분생포자 발아율과 발아관의 신장은 10% 토마토쥬스에서 가장 양호하였는데 24시간 후 발아율은 거의 100%였으며, 36시간 후 발아관 길이는 535.2$\mu\textrm{m}$로 PDB보다 1.4배정도 길었다. 또한 SD1 균주의 병원성을 검정한 결과 10% 토마토쥬스를 첨가한 분생포자 현탁액으로 접종할 경우 자연 발병된 병징과 동일하였으며 발병율도 100%로서 PDB 분생포자 현탁액에서는 60%, 살균수에서는 전혀 발병되지 않았다. 본 균주는 균총 형태와 색깔, 광학현미경을 이용한 형태적 특성과 몇 가지 배지 등을 이용한 배양적 특성 및 병원성 검정 결과에 따라 Alternaria alternata로 동정되었으며, 들깨 잎마름병으로 명명하였다.
From apple skin, we isolated a bacterial strain which strongly inhibited the growth of apple white rot fungus, Botryosphaeria dothidea. The isolated strain, designated as SS279, was identified to be the genus Bacillus. The antifungal activity of Bacillus sp. SS279 was found in the culture filtrate. The production of antifungal substances occurred during logarithmic phase and was the highest when cultures reached the stationary growth phase. The optimum ranges of temperature and pH for its production were 25-30$\circ$C and 4.5-9.0, respectively. The culture filtrate of Bacillus sp. SS279 exhibited a strong inhibitory effect on the spore germination and germ tube elongation of B. dothidea. Autoclaved culture filtrate of Bacillus sp. SS279 showed only a slight decrease in antifungal activity, indicating that the Bacillus sp. SS279 produce heat-stable antifungal substances. In in vivo bioassay, Bacillus sp. SS279 also showed antagonistic activity against apple white rot caused by B. dothidea.
유기농 인증을 받아서 3년 이상이 경과한 농가의 토양을 수집하여 근권 세균을 450균주 분리하였고, 여러 가지 식물 병원균의 균사 생장을 억제하는 세균 KB-401 균주를 선발하였다. KB-401 균주는 특히 감귤 검은점무늬병균(Diaporthe citri)의 균사 생장과 포자 발아를 억제하며, 발아하는 포자에 처리하였을 때 발아관의 선단이 팽윤되는 현상을 관찰할 수 있었다. 본 균주는 생리적인 특성과 16S rDNA의 염기서열을 분석한 결과, Bacillus subtilis로 동정되었다.
Magnaporthe grisea, the casual agent of rice blast, requires formation of an appressorium, a dome-shaped and well melanized infection structure, to penetrate its host. Environmental cues that induce appressorium formation include hydrophobicity and hardness of contact surface and chemicals from its host. Artificial surfaces are widely used to induce appressorium formation, but frequencies of appressorium induction are not always consistent. To understand variable induction of appressorium formation in M. grisea, several factors were tested on GelBond. High levels of appressorium formation were induced over a wide range of temperature (20~3$0^{\circ}C$) and pH (4~7). spore age up to 3-week-old did not significantly affect appressorium formation, but only a few apressoria on GelBond. However, adenosine specifically inhibited appressorium formation. Adenosine inhibition of appressorium formation was restored by exogenous addition of cAMP. Germ tube tips of M. grisea maintained the ability to differentiate appressoria by chemical inducers on GelBond at least up to 16 h after conidia germination. These results suggest that environmental factors have little effect on the variable induction of appressorium formation on the artificial surface in M. grisea.
The rice blast disease caused by of Magnaporthe oryzae is one of the most destructive diseases of rice. By the microarray analysis, we profiled expression changes of genes during conidiation and found out many putative genes that are up-regulated. Among those, we first selected MGG_06399 encoding a dual-specificity tyrosine-regulated protein kinase (DYRK), homologous to YAK1 in yeast. To investigate functional roles of MoYAK1, We made ${\Delta}Moyak1$ mutants by homology dependent gene replacement. The deletion mutant showed a remarkable reduction in conidiation and produced abnormally shaped conidia smaller than those of wild type. The conidia form ${\Delta}Moyak1$ were able to develop a germ tube, but failed to form apppressoria on a hydrophobic coverslip. The ${\Delta}Moyak1$ formed appressria on a hydrophobic cover slip when exogenous cAMP was induced, but the appressoria shape was abnormal. The ${\Delta}Moyak1$ also formed appressoria abberent in shape on onion epidermis and rice sheaths and failed to penetrate the surface of the plants. These data indicate that MoYAK1 is associated with cAMP/PKA pathway and important for conidiation, appressorial formation and pathogenic development in Magnaporthe oryzae. Detailed characterization of MoYAK1 will be presented.
Candidiasis is a fungal infection of the most common causes; generally, opportunistic infections occur often in patients with weakened immune systems. Because of high rates in fungal infection patients and increasing frequency of being isolated from clinical materials, quickly identifying of Candida albicans is critical. By identifying 404 yeast cell strains of referred samples via API 20C kits, NGL and PRO tests and Germ tube (GT) test were conducted and compared. In the 3.0 McFarland yeast cells, 0.1% ${\rho}-nitrophenyl-N-acetyl-{\beta}-D-galactosaminide$ (NGL) and 0.04% ${\small{L}}$-proline ${\beta}$-naphtylamide (PRO) were each put in test tubes and incubated at $35^{\circ}C$ for 15, 30, 60 and 90 minutes. Afterwards, 1 drop of 2% NaOH was applied, and if the color turned yellow; it was positive for NGL test. Afterwards, 1% ${\rho}$-dimethylaminocinnamaldehyde was applied, and if the upper layer turned pink or red, it was positive for PRO test. NGL and PRO tests were conducted for all C. albicans and identified accurately within 30 minutes. In NGL, PRO test, false-positive, negative were not seen, whereas, GT test showed false-positive in 1 strain and false-negative in 3 strains. Therefore, sensitivity and specificity of NGL, PRO tests were 100% and 99.5%, respectively, and positive and negative predictive rate were 99.5% and 100%, respectively. However, GT test sensitivity and specificity were 98.5% and 99.5%, respectively, and positive and negative predictive rates were 99.5% and 98.5%, respectively. In conclusion, NGL, PRO tests are better than GT tests for sensitivity and specificity, therefore, these reliable tests will be useful in clinical laboratories.
Candida albicans infections are often problematic to treat owing to antifungal resistance, as such infections are mostly associated with biofilms. The ability of C. albicans to switch from a budding yeast to filamentous hyphae and to adhere to host cells or various surfaces supports biofilm formation. Previously, the ethanol extract from Paeonia lactiflora was reported to inhibit cell wall synthesis and cause depolarization and permeabilization of the cell membrane in C. albicans. In this study, the P. lactiflora extract was found to significantly reduce the initial stage of C. albicans biofilms from 12 clinical isolates by 38.4%. Thus, to assess the action mechanism, the effect of the P. lactiflora extract on the adhesion of C. albicans cells to polystyrene and germ tube formation was investigated using a microscopic analysis. The density of the adherent cells was diminished following incubation with the P. lactiflora extract in an acidic medium. Additionally, the P. lactiflora-treated C. albicans cells were mostly composed of less virulent pseudohyphae, and ruptured debris was found in the serum-containing medium. A quantitative real-time PCR analysis indicated that P. lactiflora downregulated the expression of C. albicans hypha-specific genes: ALS3 by 65% (p = 0.004), ECE1 by 34.9% (p = 0.001), HWP1 by 29.2% (p = 0.002), and SAP1 by 37.5% (p = 0.001), matching the microscopic analysis of the P. lactiflora action on biofilm formation. Therefore, the current findings demonstrate that the P. lactiflora ethanol extract is effective in inhibiting C. albicans biofilms in vitro, suggesting its therapeutic potential for the treatment of biofilm-associated infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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