Jang, Tae Young;Koo, Bon Chul;Kwon, Mo Sun;Roh, Ji Yeol;Kim, Teoan;Park, Young Sik
Reproductive and Developmental Biology
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v.37
no.3
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pp.91-96
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2013
Transgenic chickens have been spotlighted as an highly potent bioreactor for their fecundity, short generation time, and eggs associated with mass production of protein. In this study, we generated transgenic chickens exhibiting oviduct specific expression of human growth hormone fused to human transferrin for oral administration. Gene of the modified growth hormone located at downstream ovalbumin promoter (~3.6 kb) was introduced to stage X blastodermal cell employing retrovirus vector system. Several transgenic chickens were successfully generated. However, genomic analyses showed unexpected deletion within the transgene. The modification of the transgene seemed to occur during germ cell formation because the deletion was detected only from the sperm DNA of the G0 founder animal. There was no evidence of deletion in the somatic cell DNA samples of the same chicken. Consequently, same pattern of the deletion was confirmed in both somatic and germ cells of the G1 progeny.
Lhx8 (LIM homeobox 8) gene encodes a LIM homeodomain transcriptional regulator that is preferentially expressed in germ cells and critical for mammalian folliculogenesis. However, Lhx8 DNA binding sequences are not characterized yet. We aimed to identify and characterize a cis-acting sequence of germ-cell specific transcriptional factor, Lhx8. To identify Lhx8 DNA binding element, Cyclic Amplification of Sequence Target (CAST) Analysis was performed. Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) was processed for the binding specificity of Lhx8. Luciferase assay was for the transcriptional activity of Lhx8 through identified DNA binding site. We identified a putative cis-acting sequence, TGATTG as Lhx8 DNA binding element (LBE). In addition, Lhx8 binds to the LBE with high affinity and augments transcriptional activity of luciferase reporter driven by artificial promoter containing the Lhx8 binding element. These findings indicate that Lhx8 directly regulates the transcription of genes containing Lhx8 binding element in oocytes during early folliculogenesis.
Kim, Jong Bin;Chang, Dae Soo;Kim, Hyejin;Jeon, Mi Ae;Ku, Kayeon;Lee, Jung Sick
Development and Reproduction
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v.17
no.2
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pp.73-78
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2013
This study histologically describes the intersexuality of Scomberomorus niphonius collected from the coastal area near Jeju Island. A total of 126 S. niphonius, collected from March to July 2012 with a total length of 62.4 cm (${\pm}17.5$) and a total weight of 1,701.9 g (${\pm}1,528.9$) were used for analyses. From a histological perspective, two types of intersex were confirmed. One type had scattered germ cells from the opposite sex within the gonad. The second type developed germ cells from the opposite sex in the connective tissue of the outer gonadal membrane. The intersexuality was 14.3% (n=18/126), with females (21.3%; n=16/75) exhibiting a higher rate than males (3.9%; n=2/51). There was no displayed correlation between intersexuality and the total length and weight.
In order to study on the Sertoli cell, we attempt have been made to measure the average number of each germ cells per Sertoli cell on the 12 stages of cycle in matured korean Jindo dog. The fine structure of Sertoli cell junctional specialization was studied with electron microscope. The results were summarized as follows; 1. The average number of various germ cells associated with Sertoli cell was 9.77 to 13. 80 through stages of cycle and the total average number was 11.62. 2. Sertoli-Sertoli cell junctional specialization was present in seminiferous epilthelium, and Sertoli-spermatid cell junctional specialization rose from stage 8 spermatid, persisted to step 13 spermatid and then disappeared. The structure of Sedoli-spermatid cell juncticnal specialization was not similar to that of Sertoli cxlls. 3. Just after spermiation, free-surface of Sertoli-spermatid cell junctional specialization was replaced by Sertoli cell cytoplasm with tubulobulbar complex at the neiglaboring region observed. 4. The Sertoli cell process was located within the cytoplasm of late stage spermatids. Some membranes of residual body and spermatid cytoplasm partly disappeared, resulting in opening of the cytoplasm of spermatid into that Sertoli cell. This fact suggested that spermatid cytoplasm was partly eliminated.
Crude seasoning oil was manufactured from direct heat treatment of com germ, wheat germ, dehulled peanut, mustard, black pepper and com oil(RBD type). The sesame oil substituted was composed of this crude seasoning oil, oil soluble natural pigment mixture and com oil, and showed the similar appearance, flavor and taste with sesame oil. Free fatty acid content of SO was 1/4 than sesame oil, the other values were similar, respectively. Use of this SO was suitable about cooking, general frying as well as frying of laver and Chinese cake. As a result, this SO had possiblility as sesame oil substituted.
Spermatogenesis and taxonomic values of mature sperm morphology of in male Septifer (Mytilisepta) virgatus were investigated by transmission electron microscope observations. The morphologies of the sperm nucleus and the acrosome of this species are the cylinder shape and cone shape, respectively. Spermatozoa are approximately 45-50 ${\mu}m$ in length including a sperm nucleus (about 1.26 ${\mu}m$ long), an acrosome (about 0.99 ${\mu}m$ long), and tail flagellum (about 45-47 ${\mu}m$). Several electron-dense proacrosomal vesicles become later the definitive acrosomal vesicle by the fusion of several Golgi-derived vesicles. The acrosome of this species has two regions of differing electron density: there is a thin, outer electron-dense opaque region (part) at the anterior end, behind which is a thicker, more electron-lucent region (part). In genus Septifer in Mytilidae, an axial rod does not find and also a mid-central line hole does not appear in the sperm nucleus. However, in genus Mytilus in Mytilidae, in subclass Pteriomorphia, an axial rod and a mid-central line hole appeared in the sperm nucleus. These morphological differences of the acrosome and sperm nucleus between the genuses Septifer and Mytilus can be used for phylogenetic and taxonomic analyses as a taxonomic key or a significant tool. The number of mitochondria in the midpiece of the sperm of this species are five, as seen in subclass Pteriomorphia.
The internal ultrastructural changes of germ cells and external morphology of spermatozoon during the spermatogenesis in the rockfish, Sebastes inermis were studied using transmission and scanning electron microscope. The testis is seminiferous tubule type in internal structure. Seminiferous tubule consist of many cyst which contain numerous germ cells in same developmental stage. Spermatogonium contained a large nucleus with single nucleolus in interphase. Primary spermatocyte identified by the presence of synaptonemal complex in nucleus and the contained a number of mitochondria, endoplasmic reticula and Golgi bodies in cytoplasm. The nucleoplasm of secondary spermatocyte was more concentrated than that of the previous phase. Spermatids were more condensed in nucleus and cytoplasm, and show the long-spherical shape. In the cytoplasm of spermatid mitochondria located to lower portion of the nucleus and Golgi bodies located to upper portion, but proacrosomal granule is not appeared. The spermatozoon consist of the head and tail. No acrosome could be found in the head. The cytoplasmic collar of posterior part in sperm head contained mitochondria which surrounded axial filament. The well developed axonemal lateral fins were identified in sperm flagellum, and the axial filament of the flagellum consist of nine pairs of peripheral microtubules and one pair of central microtubules.
Ki, Byeong Seong;Park, Miree;Woo, Yunmi;Lee, Woo Sik;Ko, Jung Jae;Choi, Youngsok
Reproductive and Developmental Biology
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v.39
no.2
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pp.43-47
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2015
Sirtuin proteins are evolutionary conserved Sir2-related $NAD^+$-dependent deacetylases and regulate many of cellular processes such as metabolism, inflammation, transcription, and aging. Sirtuin contains activity of either ADP-ribosyltransferase or deacetyltranfease and their activity is dependent on the localization in cells. However, the expression pattern of Sirtuins has not been well studied. To examine the expression levels of Sirtuins, RT-PCR was performed using total RNAs from various tissues including liver, small intestine, heart, brain, kidney, lung, spleen, stomach, uterus, ovary, and testis. Sirtuins were highly expressed in most of tissues including the testis. Immunostaining assay showed that Sirt1 and Sirt6 were mainly located in the nucleus of germ cells, spermatocytes, and spermatids in the seminiferous tubules, whereas Sirt2 and Sirt5 were exclusively present in the cytoplasm of germ cells and spermatocytes. Our results indicate that Sirtuins may function as regulators of spermatogenesis and their activities might be dependent on their location in the seminiferous tubules.
The ultrastructure of germ cells during spermatogenesis and the structural changes in the epithelial cells of the seminal vesicle with testicular development in male Neptunea (Barbitonia) arthritica cumingii were investigated monthly based on electron microscopic and histologic observations. N. arthritica cumingii (Gastropod: Buccinidae) undergoes internal fertilization and possesses a modified type of spermatozoon, which is approximately 20$\mu$m long. The axoneme of the tail flagellum consists of nine peripheral pairs of microtubules and one central pair. Many spermatozoa occur in the acini of the testis in the ripe stage and are transported to the seminal vesicles in the accumulating phase. In males, the monthly gonadosomatic index began to increase in September and reached a maximum in February. Subsequently, it decreased rapidly after April. The testis of this species can be classified into four developmental stages: the active (August to September), ripe (October to July), copulation (April to July), and recovery (July to August) stages. Structural changes in the epithelial cells of the seminal vesicles of this species could be classified into three phases: (1) S-I (resting), (2) S-II (accumulating), and (3) S-III (spent) phases. The morphology and structure of the epithelial cells of the seminal vesicle differed in each phase; the cells were cuboidal, squamous, or columnar in the resting, accumulating, or spent phases, respectively.
Monoclonal antibodies against the zoospores of Allomyces macrogynus were prepared using standard hybridoma technique. Mice were immunized either with the fixed zoospores or the zoospore proteins, and the production of the antibodies from the resulting hybridomas were screened by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Thirty hybridomas were initially identified ans six hybridomas were purified to the single cell clones. Culture supernatants from the hybridomas were tested for the effects on the growth of the germ tubes, and some of the hybridoma culture supernatants studied showed growth stimulatory effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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