님 추출물은 포유류에 낮은 독성을 가지고 있기 때문에 유기농업자재로 주로 이용되고 있다. 그러나 님 추출물은 림프구의 염색체 이상을 야기한다는 연구결과가 보고되었다. 따라서, 본 연구는 님 추출물을 이용하여 항돌연변이원성 시험 및 유전독성을 평가하였다. 항돌연변이원성 시험은 복귀돌연변이 시험을 이용하여 시험하였다. 복귀돌연변이 시험은 2개의 님 추출물을 Salmonella Typhimurium 5개 균주를 이용하여 돌연변이 유발 가능성을 평가하였다. 복귀돌연변이시험과 염색체이상시험은은 대사활성계 처리군(S-9 mix)과 대사활성계 미처리군(PBS)으로 나누어 양성대조군과 음성대조군을 사용하여 실시하였다. 염색체이상시험은 Chinese hamster lung cell을 이용하여 님추출물 시료에 대사활성계 처리군은 6시간 노출시켰고, 대사활성계 미처리군은 각각 6시간과 24시간 노출시켜 시험하였고, 음성대조군과 양성대조군을 사용하였다. 4 NQO에 의해 유도 된 돌연변이 집락수는 님추출물 시료 처리에 의해 감소되어 SRE는 항 돌연변이 효과가 있을 수 있음을 나타냈다. 복귀돌연변이와 염색체이상시험은 님추출물 모든 시험 농도군에서 대화활성계의 처리 유무와 관계없이 음성으로 판정되었다. 이상의 결과를 ICH에서 제안된 유전독성 battery system에 근거해 살펴 봤을 때 본 연구에서 사용된 님 추출물 2종은 모두 유전독성이 없어 안전함을 확인 할 수 있었다.
To classify the chemical hazard according to globally harmonized system of classification and labeling of chemicals (GHS), we investigated the genotoxicity of three chemicals, methyl myristate, 2-ethylhexanoic acid zinc salt, N,N,N',N'-tetrakis(2-hydroxyethyl) ethylenediamine, using male ICR mice bone marrow cells for the screening of micronucleus induction. Although these three chemicals have already been tested numerous times, a micronucleus test has not been conducted. The seven week-old male ICR mice were tested at three dosages for the three chemicals, respectively. After 24 h of oral administration with the three chemicals, the mice were sacrificed and their bone marrow cells were prepared for smearing slides. As a result of counting the micronucleated polychromatic erythrocyte (MNPCE) of 2,000 polychromatic erythrocytes, all treated groups expressed no statistically significant increase of MNPCE compared to the negative control group. There were no clinical signs related with the oral exposure of these three chemicals. It was concluded that these three chemicals did not induce micronucleus in the bone marrow cells of ICR mice, and there was no direct proportion with dosage. These results indicate that the three chemicals have no mutagenic potential under each test condition, and it is not classified these chemicals as mutagens by GHS.
The mouse lymphoma assay (MLA) has been recently validated as a sensitive and specific test system to determine the genotoxic potential for a chemical. The objective of this study is to evaluate the utility of MLA for detecting mutagens. Especially, to compare MLA with the in vitro chromosomal aberration test (CA), we performed MLA using the microwell method with three chemicals (hydroxyurea, theophylline and amino acid copper complex), which were reportedly positive in the CA. In cell treated with hydroxyurea, anti-neoplastic agent that blocks DNA replication, evidence of a positive response was obtained without S9 mix for 4 h and 24 h. In addition, analysis of colony size distribution at concentration that gave an elevated mutant fraction showed that hydroxyurea induced a high proportion of small type colonies, indicating that hydroxyurea-induced mutation is associated with large chromosomal deletion. Conversely, negative MLA result was obtained for theophylline, which was wed as central nervous system stimulator. Although theophylline increased the mutant frequency at concentration of 1250 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{m}{\ell}$ with S9 mix for 4 h, a concentration-related increase in mutant frequency was not observed. The MLA result of amino acid copper complex was considered equivocal because the positive result was obtained at concentration showing 10% or less RS or RTG. Thus, among 3 CA-positive chemicals, positive MLA result was obtained for one. The other two chemicals were negative and equivocal. However MLA, which evaluates mutagenic potential of chemicals through colony formation by cell grouth, may provide a higher predictivity of carcinogenesis than CA.
Seo, Hwi Won;Suh, Jae Hyun;So, Seung-Ho;Kyung, Jong-Soo;Kim, Yong-Soon;Han, Chang-Kyun
Journal of Ginseng Research
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제41권4호
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pp.595-601
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2017
Background: Red ginseng oil (RGO) is produced by supercritical $CO_2$ extraction of secondary products derived from Korean Red Ginseng extract. As the use of RGO has increased, product safety concerns have become more important. Methods: In the present study, the subacute oral toxicity and bacterial reverse mutagenicity of RGO were evaluated. Sprague-Dawley rats were orally administered with RGO for 28 d by gavage. Daily RGO dose concentrations were 0 mg/kg body weight (bw), 500 mg/kg bw, 1,000 mg/kg bw, or 2,000 mg/kg bw per day. Bacterial reverse mutation tests included five bacterial strains (Escherichia coli WP2 and Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535, and TA1537), which were used in the presence or absence of metabolic activation. The plated incorporation method for mutation test was used with RGO concentrations ranging from $312.5{\mu}g$ to $5,000{\mu}g$ per plate. Results: The subacute oral toxicity test results did not reveal any marked changes in clinical characteristics. There were no toxicological changes related to RGO administration in hematological and serum biochemical characteristics in either control or treatment animals. Furthermore, no gross or histopathological changes related to RGO treatment were observed. The bacterial reverse mutation test results did not reveal, at any RGO concentration level and in all bacterial strains, any increase in the number of revertant colonies in the RGO treatment group compared to that in the negative control group. Conclusion: The no-observed-adverse-effect level of RGO is greater than 2,000 mg/kg bw and RGO did not induce genotoxicity related to bacterial reverse mutations.
This study was designed to assess the toxicity of capsaicin-containing (CP) pharmacopunture using an in vitro chromosomal aberrations in Chinese hamster lung (CHL/IU) cells. In order to determine the high dose level in the main study of this study, a dose range finding study was conducted first. The high dose was selected at 10.0% of CP pharmacopuncture extract, and then diluted sequentially to produce lower dose levels of 5.00, 2.50, 1.25, 0.625 and 0.313% by applying a geometric ratio of 2. As a result, the cytotoxicity and precipitation of the CP pharmacopuncture as a test substance were not evident at any dose level during short-time treatment with and without metabolic activation and continuous treatment without metabolic activation. Therefore, the dose levels for this study were chosen as 10.0, 5.0, and 2.5%., and the treatment volume was 1.3 mL. In addition, negative and positive controls were set. In main study, the frequency of cells with chromosome aberrations in CP treated groups was less than 5% in short-time treatment with and without metabolic activation and continuous treatment without metabolic activation. In addition, there was no statistically significant difference when compared to the negative control group. The frequency of cells with structural chromosomal aberrations in the positive control group was more than 10% compared to the negative control group, and it increased statistically significantly. In conclusion, under the conditions of this study, CP pharmacopuncture did not show the possibility of causing chromosome aberrations.
The mutagenic activity of chitosan oligosaccharide and its antimutagenic effect against 2-amino-3,8-dimethylimidazo[4,5-f]quinoxaline (MeIQx) were investigated using the Salmonella/Ames test. No mutagenic activity was found in the Salmonella typhimurium strains TA 98 and TA 100, either with or without S9 activation. In contrast, chitosan oligosaccharide showed an inhibitory effect on the mutagenic activity of the cooked food mutagen, MeIQx, in the presence of S9. The influence of chitosan oligosaccharide on the genotoxicity of MeIQx was examined using a host-mediated assay in mice. The oligosaccharide was administered for 14 consecutive days (intragastric application at doses of 0.1 or 0.5 g/kg body wt) to mice. S. typhimurium TA 98 was given intravenously before an oral dose of MeIQx (4.5 mg/kg body wt.). The number of $his^+$ revertants were determined from the Ever of mice. The intragastric application of oligosaccharide led to a 47% reduction in the number of mutants induced by MeIQx (p<0.05). These results suggested that chitosan oligosaccharide had antimutagenic properties against MeIQx in vitro and in vivo.
Quercetin and its glycosides showed a strong free radical scavenging effect to DPPH radical generation. However, there were not big differences between quercetin aglycone and glycosides under experimental condition of this study. On the other hand, quercetin had pro-oxidant effect in bleomycin-dependent DNA assay. Quercetin aglycone and its glycosides, quercitrin inhibited $H_2$$O_2$- induced DNA damage in CHL cells. They also have an anticlastogenicity toward DNA breakage agent by radical generation like bleomycin. These results indicate that quercetin aglycone and its glycosides are capable of protecting the free radical generation induced by reactive oxygen species like $H_2$$O_2$. The mechanism of inhibition in hydrogen peroxide-induced genotoxicity may be due to their free radical scavenging properties. Therefore, quercetin aglycone and its glycosides may be useful chemopreventive agents by protecting of free radical generation which are involved in carcinogenesis and aging. However, quercetin and its glycosides must also carefully examined for pro-oxidant properties before being proposed for use in vivo.
한국독성학회 2002년도 Current Trends in Toxicological Sciences
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pp.135-135
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2002
Nowadays a huge variety of products that aim to assist to quit smoking or reduce addictive symptoms are developed and manufactured with safety evaluation, but the safety of the most recent products of interest which do not contain tobacco and nicotine, and shape cigarettes is not evaluated and guaranteed relatively.(omitted)
Kim, Areumnuri;Jeong, Mihye;Park, Kyung-Hun;Chon, Kyongmi;Cho, Namjun;Paik, Min Kyoung
한국환경농학회지
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제34권4호
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pp.350-354
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2015
BACKGROUND: Botanical insecticides, especially Azadirachta Indica extract (AIE) and Sophorae radix extract (SRE) are widely used in Agriculture field. In our previous studies on genotoxicity test of AIE and SRE samples, a suspicious clastogenic properties was shown. Herein, we investigated the DNA damage effect of these botanical insecticide samples through the in vitro comet assay. METHODS AND RESULTS: Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell line was used, and methyl methanesulphonate was as positive control. Respective two samples of AIE and SRE were evaluated using Single Cell Gel Electrophoresis (Comet) assay and measured as the Olive tail moment (OTM). Results from this study indicated that all tested AIE and SRE samples did not show DNA damage in comet assay using CHL cells, compared with control. CONCLUSION: AIE and SRE samples used in this study were not cause genetic toxicity and are suitable for use as organic materials.
An herbal water extract of Bojungikkeehapdaechilkitang(BDT) was prepared to test it for single-dose and repeated-dose toxicity, genotoxicity and reproductive toxicity, and to obtain a 50% lethal dose$(LD_{50})$, approximated lethal dose(ALD), and approximated target organs for BDT. The extract was tested on female and male ICR mice according to KFDA Guideline 1999-61 at doasge level of 2000, 1000, 500, 250 and 125mg/kg/10mL In this study, clinical signs, mortalities and gross findings of principal organs were observed for 14 days of single dosing, and afterwards in some cases. The ALD and $LD_{50}$ of BDT extract obtained in this study was>2000mg/kg for both male and female ICR mice. Also, any possible digestive toxicity of BDT extract was found to be above 1000mg/kg in both male and female ICR mice. The results of this study strongly suggest that BDT extract has no toxic effect at dosage level below 500mg/kg.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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