Woo, Seon-Ock;Son, Sung-Hee;Park, Hong-Seog;Vulpe, Chris D.;Ryu, Jae-Chun;Yum, Seung-Shic
Molecular & Cellular Toxicology
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제4권4호
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pp.293-299
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2008
To screen the differentially expressed genes in cadmuim-exposed marine medaka fish (Oryzias javanicus), a candidate marine test fish for ecological toxicity, the differential display polymerase chain reaction (DD-PCR) was carried out, since the genome-wide gene expression data are not available in this fish species yet. A total of 35 clones were isolated from cadmium-exposed fish and their nucleotide sequences were analyzed. The differentially expressed gene candidates were categorized to response to stimulus (3); ion binding (3); DNA binding (1); protein binding (6); carbohydrate binding (1); metabolic process (4); biological regulation (3); cellular process (2); protein synthesis (2); catalytic activity (2); sense of sight (1); immune (1); neurohormone (1); signaling activity (1); electron carrier activity (1) and others (3). For real-time quantitative RT-PCR, we selected catalase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, heat shock protein 70, and metallothionein and confirmed that cadmium exposure enhanced induction of these four genes.
Streptomyces are attractive microbial cell factories that have industrial capability to produce a wide array of bioactive secondary metabolites. However, the genetic potential of the Streptomyces species has not been fully utilized because most of their secondary metabolite biosynthetic gene clusters (SM-BGCs) are silent under laboratory culture conditions. In an effort to activate SM-BGCs encoded in Streptomyces genomes, synthetic biology has emerged as a robust strategy to understand, design, and engineer the biosynthetic capability of Streptomyces secondary metabolites. In this regard, diverse synthetic biology tools have been developed for Streptomyces species with technical advances in DNA synthesis, sequencing, and editing. Here, we review recent progress in the development of synthetic biology tools for the production of novel secondary metabolites in Streptomyces, including genomic elements and genome engineering tools for Streptomyces, the heterologous gene expression strategy of designed biosynthetic gene clusters in the Streptomyces chassis strain, and future directions to expand diversity of novel secondary metabolites.
Objectives: Pinelliae Rhizoma has traditionally been used as an anti-depressant in oriental medicine. This study is to investigate the effect of Pinelliae Rhizoma extract (PRe) on psychological stress in genome wild expression of mice. Methods: After giving physical stress to mice, PRe was orally administered with 100 mg/kg/day for five days. After extracting whole brain tissue from the mice, their genome changes were observed by micorarray analysis method. The genome changes were analyzed by IMAGENE 4.0, TREEVIEW, FatiGo algorithems, BOND database, cytoscape program, etc. Results: 1. PRe administered group were remained at normal level; 60% of increase was shown in expressed genes by physical stress, and 65% of decrease was shown in expressed genes by psychological stress. 2. Genes with increased expression in control group that remained at a normal state in PRe administered group were involved with the gene of a cellular metabolic process on biological process, protein binding on molecular function, and cell part on cell composition. The pathway was found to be cytokin-cytokin receptor interaction. 3. Genes with decreased expression in control group that remained at a normal state in PRe administered group were involved with the gene of a cellular metabolic process on biologiacl detail and coupled ATPaes activity on molecular function. This gene related path was Ubiquintin mediated proteolysis etc. 4. Core node genes analyzed by protein interaction network were Vinculin, Cell sdivision cycle 42 homolog (S. cerevisiae) etc. They played an important role in maintaining cytoskeleton and controlling cell cycle. Conclusions: Several genes were up-regulated and down-regulated in response to psychological stress. The expression of most of the genes that were altered in response to psychological stress was restored to normal levels in PRe treated mice. When the interaction network information was analyzed, the recovery of the core node genes in PRe treated mice indicates that this final set of genes may be the effective target of PRe.
본 논문은 베이지안 네트워크를 기반으로 대규모 유전자 상호작용 네트워크를 추론하기 위한 클라이언트-서버 시스템 구조를 제시한다. 유전체 수준(genome-wide)의 대규모 유전자 상호작용 네트워크를 베이지안 네트워크 형태로 추론하기 위해서는 병렬 서버를 이용하더라도 통상 수십시간이 소요된다. 따라서, 일반적인 대화형(interactive) 독자(standalone) 시스템 구조보다는 배치형(batch) 분산(distributed) 시스템 구조가 적합하다. 본 논문에서는 그와 같은 상황에 적합한 느슨한 연결의 (loosely-coupled) 클라이언트-서버 시스템을 구현할 결과를 기술한다. 유전자 상호작용 네트워크 추론은 크게 두 단계로 나누어진다. 첫째로, 생물주석정보(biological annotation)과 유전자 발현정보(expression data)를 사용하여, 전체 유전자 집단을 서로 중복이 가능한 모듈들로 나누며, 둘째로, 각각의 모듈들에 대해 독립적인 베이지안 학습을 수행하여 추론결과를 얻고, 각 모듈들이 공통으로 포함하는 유전자를 사용하여 각 모듈의 추론결과들을 하나로 통합한다.
Park, Jae-Yong;Hwang, Eun Mi;Park, Nammi;Kim, Eunju;Kim, Dong-Gyu;Kang, Dawon;Han, Jaehee;Choi, Wan Sung;Ryu, Pan-Dong;Hong, Seong-Geun
Molecules and Cells
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제23권3호
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pp.357-362
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2007
There is an increasing demand for high throughput (HTP) methods for gene analysis on a genome-wide scale. However, the current repertoire of HTP detection methodologies allows only a limited range of cellular phenotypes to be studied. We have constructed two HTP-optimized expression vectors generated from the red fluorescent reporter protein (RFP) gene. These vectors produce RFP-tagged target proteins in a multiple expression system using gateway cloning technology (GCT). The RFP tag was fused with the cloned genes, thereby allowing us localize the expressed proteins in mammalian cells. The effectiveness of the vectors was evaluated using an HTP-screening system. Sixty representative human C2 domains were tagged with RFP and overexpressed in HiB5 neuronal progenitor cells, and we studied in detail two C2 domains that promoted the neuronal differentiation of HiB5 cells. Our results show that the two vectors developed in this study are useful for functional gene analysis using an HTP-screening system on a genome-wide scale.
AP2/EREBP gene family consists of transcription factor genes with a conserved AP2 DNA-binding domain and is involved in various biological processes. AP2/EREBP gene families were identified through genome-wide searches in five Cucurbitaceae species including cucumber, wild cucumber, melon, watermelon, and bitter gourd, which consisted of more than 100 genes in each of the five species. The gene families were further divided into five groups including four subfamilies (ERF, DREB, AP2 and RAV) and a soloist group. Among the subfamilies, DREB subfamily which is known to be related to abiotic stress response was more analyzed and a total of 25 genes were identified as Cucurbitaceae homologues of Arabidopsis CBF/DREB1 genes which are important for abiotic stress-response and tolerance. In silico expression profiling using RNA-Seq data revealed diverse expression patterns of cucumber AP2/EREBP genes. AP2/EREBP gene families identified in this study will be valuable for understanding the stress response mechanism as well as facilitating molecular breeding in Cucurbitaceae crops.
Objective: Water buffalo, an important domestic animal in tropical and subtropical regions, play an important role in agricultural economy. It is an important source for milk, meat, horns, skin, and draft power, especially its rich milk that is the great source of cream, butter, yogurt, and many cheeses. In recent years, long noncoding RNAs (lncRNAs) have been reported to play pivotal roles in many biological processes. Previous studies for the mammary gland development of water buffalo mainly focus on protein coding genes. However, lncRNAs of water buffalo remain poorly understood, and the regulation relationship between mammary gland development/milk production traits and lncRNA expression is also unclear. Methods: Here, we sequenced 22 samples of the milk somatic cells from three lactation stages and integrated the current annotation and identified 7,962 lncRNA genes. Results: By comparing the lncRNA genes of the water buffalo in the early, peak, and late different lactation stages, we found that lncRNA gene lnc-bbug14207 displayed significantly different expression between early and late lactation stages. And lnc-bbug14207 may regulate neighboring milk fat globule-EGF factor 8 (MFG-E8) and hyaluronan and proteoglycan link protein 3 (HAPLN3) protein coding genes, which are vital for mammary gland development. Conclusion: This study provides the first genome-wide identification of water buffalo lncRNAs and unveils the potential lncRNAs that impact mammary gland development.
Members of the genus Aspergillus are the most common fungi and all reproduce asexually by forming long chains of conidiospores (or conidia). The impact of various Aspergillus species on humans ranges from beneficial to harmful. For example, several species including Aspergillus oryzae and Aspergillus niger are used in industry for enzyme production and food processing. In contrast, Aspergillus flavus produce the most potent naturally present carcinogen aflatoxins, which contaminate various plant- and animal-based foods. Importantly, the opportunistic human pathogen Aspergillus fumigatus has become the most prevalent airborne fungal pathogen in developed countries, causing invasive aspergillosis in immunocompromised patients with a high mortality rate. A. fumigatus produces a massive number of small hydrophobic conidia as the primarymeans of dispersal, survival, genome-protection, and infecting hosts. Large-scale genome-wide expression studies can now be conducted due to completion of A. fumigatus genome sequencing. However, genomics becomes more powerful and informative when combined with genetics. We have been investigating the mechanisms underlying the regulation of asexual development (conidiation) and gliotoxin biosynthesis in A. fumigatus, primarily focusing on a characterization of key developmental regulators identified in the model fungus Aspergillus nidulans. In this review, I will summarize our current understanding of how conidiation in two aspergilli is regulated.
본 연구에서는 국내외에서 수집한 벼 294개 유전자원 핵심집단을 대상으로 벼의 지엽각 특성에 대한 조사를 수행하였고, GWAS를 이용하여 지엽각 연관 유전자를 추출 및 분석하였다. 표현형 데이터를 이용한 GWAS의 Manhattan plot 결과 분석을 통해, 각 집단에서 염색체를 대상으로 표현형과 통계적 유의성을 나타내 연관성을 보이는 SNP를 발굴하였다. 지엽각 관련 특성에 대하여 선행 연구된 QTL region과의 비교를 통하여 본 연구에서 발굴된 SNP간의 유의성을 조사한 결과, 지엽각과 유의성이 있는 SNP (S8-19815442)가 이미 확인된 QTL region에 위치하는 것으로 나타났으며, 후보유전자 Os08g31950 대해 연관 유전자 변이를 관찰하기 위해서 형질 특이적 품종군 간의 염기서열을 비교한 결과 1개의 지역에서 단일염기변이가 검출되었다. Os08g31950의 조직별 RNA의 상대적 발현량 수준을 비교한 결과, Os08g31950 유전자는 모든 조직에서 높은 발현량을 확인할 수 있었으며 조직별로 다양한 발현 양상을 관찰할 수 있었다. 또한, 모두 직립형 품종군에서 상대적으로 발현량이 높게 나타났으며 뿌리보다 잎에서의 발현율이 높게 나타났다. 본 연구를 통해 동정된 지엽각 연관 후보유전자 Os08g31950는 벼 생육 및 수량 증대에 이용할 수 있는 마커제작 및 육종의 기초자료가 될 것으로 기대된다.
Epigenetic modification of the genome through DNA methylation is the key to maintaining the differentiated state of human embryonic stem cells (hESCs), and it must be reset during differentiation by retinoic acid (RA) treatment. A genome-wide methylation/gene expression assay was performed in order to identify epigenetic modifications of RA-treated hESCs. Between undifferentiated and RA-treated hESCs, 166 differentially methylated CpG sites and 2,013 differentially expressed genes were discovered. Combined analysis of methylation and expression data revealed that 19 genes (STAP2, VAMP8, C10orf26, WFIKKN1, ELF3, C1QTNF6, C10orf10, MRGPRF, ARSE, LSAMP, CENTD3, LDB2, POU5F1, GSPT2, THY1, ZNF574, MSX1, SCMH1, and RARB) were highly correlated with each other. The results provided in this study will facilitate future investigations into the interplay between DNA methylation and gene expression through further functional and biological studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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