Background and Objective : Radiation resistance(RR) is one of main determinants of treatment outcome in oral squamous cell carcinoma(OSCC), but accurate prediction of RR is difficult. We aim to establish RR OSCC cell lines and identify genes related with RR by a measurement of altered gene expression after inducing RR. Material and Methods : OSCC cell lines, SCC15, SCC25 and QLL1, were treated with 2Gy radiation per session, and parts of them were alive in finally accumulated dosage of 60Gy through 30 times repetition of radiotherapy for inducing RR cell lines. We compared results of cDNA array and proteomics in non-radiated cell lines and RR cell lines to detect changes of gene expression. Western blot was used for the validation of results. Results : cDNA array revealed 265 commonly up-regulated genes and 268 commonly down-regulated genes in 3 RR cell lines comparing their non-radiated counterpart. Among them, 30 cancer related genes were obtained. Proteomics showed 51 commonly altered protein expressions in 3 RR cell lines and 18 cancer related proteins were obtained. Among the detected genes, we found NM23-H1 and PA2G4 were over-expressed in both cDNA array and proteomics. Western blot showed increased expression of NME1 in RR cell lines but not in PA2G4. Conclusion: We concluded that NM23-H1 may be a candidate of RR related gene and over-expression of NM23-H1 could be a biomarker to predict RR in OSCC.
Objectives : This study was carried out to investigate the anti inflammatory and anti allergy effects of Vitex rotundifolia Linne fil. extract(VRE). Results : 1. In vitro test, VRE was used to determine the modulation of cytokine secretion, the activation of inflammatory and allergic factor and the inhibition of gene expression. The cell survival rate of Raw 264.7 and Jurkat T cells didn't decrease and accordingly cytotoxicity wasn't observed. In anti-allergic assay, the secretion of IL-2, TNF-${\alpha}$, IL-4, IL-5 and IFN-${\gamma}$ were suppressed on Jurkat T cells induced by dust mites. And the gene expression of COX-2 was suppressed in HMC-1 stimulated by calcium ionophore A23187. In anti-inflammatory assay, the gene expression of TNF-${\alpha}$, COX-2 were suppressed on LPS-activated Raw 264.7 cells. And the secretion of IL-6 and IL-8 were suppressed on EoL-1 cells induced by dust mites. P38 and ERK activation of MAPK decreased generally. VRE showed potent inhibitory activity of NO production. 2. In vivo test, we used NC/Nga mouse induced by atopic dermatitis to observe the effects of VRE on the weight, water and feed, blood test, weight of organs, total IgE and histological change of main organs. Quantity of water and feed were not changed, therefore it didn't affect the weight directly, and no change was observed in related main organs, thus maybe there is no organ toxicity by test substances. And the symptoms were decreased significantly, and the thickness of epithelial cell layer and the number of mast cells were inhibited significantly by the difference of dosage. The number of total complete blood cells and IgE in serum were not changed significantly. Conclusion : These results suggest that VRE has anti-inflammatory and anti-allergic effects. Therefore VRE could be used effectively on improvement or treatment of atopic dermatitis. However, further study is needed to prove which component of VRE indicates effective pharmacological action.
비선택성 제초제인 bialaphos는 고등식물에 있어서 glutamine 합성을 억제 하여 식물체를 고사시킨다. Acetyltransferase에 의해 encoding된 bialaphos저항성 유전자는 세균 Streptomyces hygroscopicus SF1239로부터 cloning된것을 사용하였다. Bialaphose 저항성 유전자를 Agrobacterium 감염법을 이용하여 국내에서 재배되는 벼(동진)에 도입한 결과 약30%정도의 형질전환 식물체를 얻을 수 있었다. $\textrm{T}_{1}$ 세대의 17개체는 hygromycin과 bialaphos에 대한 저항성 유전형질이 3:1로 분리되었다. 또한 Southern 분석을 실시한 결과 wild type의 식물체에서는 Bar 유전자의 검출을 볼 수 없었으나 형질전환 식물체의 경우 Bar 유전자의 검출이 가능하였다. $\textrm{T}_{3}$세대의 형질전찬 식물체와 wild type의 식물체를 포장상태에서 비선택성 제초제인 바스타를 살포하고 3주 후에 관찰한 결과 형질전환 식물체는 외형적으로 아무런 피해를 받지 않고 정상적으로 생장하였으나, wild type의 식물체와 잡초는 모두 고사하였다. 이상의 결과를 종합해보면 hygromycin과 bialaphos 저항성 유전자는 Agrobacterium감염법을 이용하여 단자엽 식물인 벼에 도입할 수 있다는 것을 보여준 것이며, 또한 bialaphos 저항성 유전자가 식물에 도입됨으로써 비선택성 제초제에 대한 저항성 식물을 개발 할 수 있다는 것을 보여 주었다.
Our previous studies showed that kisspeptin-10 (Kp-10) injected in vivo can markedly increase lipid anabolism in liver of quails. In order to investigate the direct effect of Kp-10 on lipid metabolism of hepatocytes in birds, cells were separated from embryos livers and cultured in vitro with 0, 100 and 1,000 nM Kp-10, respectively. The results showed that after 24 h treatment, cells viability was not affected by 100 nM Kp-10, but showed a mild decrease with 1,000 nM Kp-10 compared to the control cells. Based on the results of the cell viability, 100 nM dosage of Kp-10 was selected for the further study and analysis. Compared with control cells, total cholesterol (Tch) contents in 100 nM treated cells were increased by 51.23%, but did not reach statistical significance, while the level of triglyceride (TG), high density of lipoprotein-cholesterol (HDL-C) and low density of lipoprotein-cholesterol (LDL-C) were significantly increased. Real-time PCR results showed that ApoVLDL-II mRNA expression had a tendency to increase, genes including sterol regulatory element-binding protein-1 (SREBP-1), acetyl coenzyme A carboxylase ${\alpha}$ ($ACC{\alpha}$), carnitine palmitoyltransferase 1 (CPT1), 3-hydroxyl-3-methylglutaryl-coenzyme A reductases (HMGCR) and stearyl coenzyme A dehydrogenase-1 (SCD1) mRNA in hepatocytes were significantly down-regulated by 100 nM Kp-10. However, contrary to its gene expression, SREBP-1 protein expression was significantly up-regulated by 100 nM Kp-10. Some of the significant correlations in mRNA expression were found between genes encoding hepatic factors or enzymes involved in lipid metabolism in liver of birds. These results indicate that Kp-10 stimulates lipid synthesis directly in primary cultured hepatocytes of chickens.
듀럼밀(Triticum durum var. hordeiforme 2n=28 AABB)에서 trisomics(2n=28+1)을 육성하여 외부형태적 형질에 발현되는 양적효과를 조사하였다. Trisomics은 각각의 잉여염색체에 존재하는 유전자의 상호작용에 의해서 외부형태적 형질에 정상식물과 명백히 상이한 양적효과를 나타내었다. 그러나 A및 B의 양 genome에 속하는 동조염색체간에는 서로 유사한 특성을 나타내어 상호 구별짓기가 매우 어려웠다. 이와 같은 현상으로 부터 몇몇의 외부형질에 관여하는 주동유전자의 염색체위치는 동조염색체상에 존재하고 있음이 시사되었으며, 이들은 같은 역할을 하는 동조유전자인 것으로 밝혀졌다. 따라서 듀럼밀의 동조성 및 연관군이 동시에 해명된 것으로 보여지며, 본 trisomics은 밀속의 A및 B genome의 각각의 염색체에 관한 유전분석 및 유전자지도 작성을 위한 연구재료로서 유익할 것이다. 또한 빵밀(Triticum aesitivum AABBDD)의 선조종인 듀럼밀(T. durum AABB)과 타루호밀(T. squarrosa DD)의 진화과정 및 비교유전분석상 매우 중요한 소재로서 이용될 것이다.
Livestock wastewater containing concentrated organic matters and nutrients has been known as one of the major pollutants. It is difficult to apply the conventional activated sludge process to treat livestock wastewater because of high Non-biodegradable (NBD) matter and ammonia. The objectives of this study are to remove NBD matters including aromatic compounds and ammonia in livestock wastewater using Coagulation-Fenton oxidation-Zeolite (CFZ) processes and ascertain applicable feasibility in the field through pilot plant experiment. NBD matters and color remained in the treated water were removed over 92% by Fenton oxidation as the second treatment process. Ammonia was removed by over 99.5% in the zeolite ion exchange process as the last treatment method. From $UV_{254}$, $E_2/E_3$ ratio and GC/MS analyses of treated water at each process, the aromatic compound was converted to aliphatic and aromaticity was decreased. In pilot scale test, organics and ammonia removal efficiencies were not much different from the result of lab-scale test at various operation conditions. Furthermore, reaction time and dosage of Fenton reagent in pilot scale experiment reduced by 40 min and 50% rather than in lab-scale test. $BOD_5$, $COD_{Mn}$, SS, T-N and T-P of treated water in the pilot-scale experiment also met the effluent standards.
Intake of caffeine during pregnancy can cause retardation of fetal development. Although the significant influence of caffeine on animal development is widely recognized, much remains unknown about its mode of action because of its pleiotropic effects on living organisms. In the present study, by using Caenorhabditis elegans as a model organism, the effects of caffeine on development were examined. Brood size, embryonic lethality, and percent larval development were investigated, and caffeine was found to inhibit the development of C. elegans at most of the stages in a dosage-dependent fashion. Upon treatment with 30 mM caffeine, the majority ($86.1{\pm}3.4%$) of the L1 larvae were irreversibly arrested without further development. In contrast, many of the late-stage larvae survived and grew to adults when exposed to the same 30 mM caffeine. These results suggest that early-stage larvae are more susceptible to caffeine than later-stage larvae. To understand the metabolic responses to caffeine treatment, the levels of expression of cytochrome P450 (cyp) genes were examined with or without caffeine treatment using comparative microarray, and it was found that the expression of 24 cyp genes was increased by more than 2-fold (p < 0.05). Among them, induction of the cyp-35A gene family was the most prominent. Interestingly, depletion of the cyp-35A family genes one-by-one or in combination through RNA interference resulted in partial rescue from early larval developmental arrest caused by caffeine treatment, suggesting that the high-level induction of cyp-35A family genes can be fatal to the development of early-stage larvae.
Powdery mildew of Indian mustard (Brassica juncea), caused by Erysiphe cruciferarum, is emerging as major problem in India. All the Indian mustard cultivars presently grown in India are highly susceptible to powdery mildew and so far no resistance source has been reported. In this study, with an aim to identify resistant source, 1,020 Indian mustard accessions were evaluated against E. cruciferarum PMN isolate, at Wellington, The Nilgiris, Tamil Nadu, India under natural hot spot conditions. The study identified one accession (RDV 29) with complete resistance against E. cruciferarum PMN isolate for the first time, which was consistent in five independent evaluations. Genetic analysis of F1, F2 and backcross populations obtained from the cross RSEJ 775 (highly susceptible) × RDV 29 (highly resistant) for two season revealed that the resistance is governed by two genes with semi-dominant and gene dosage effect. Further, a new disease rating system using six scales (0, 1, 2, 3, 4, and 5) has also been proposed in this study to score powdery mildew based on progress of fungal growth in different plant parts of the F2 population. The outcome of this study viz. newly identified powdery mildew-resistant Indian mustard accession (RDV 29), information on inheritance of resistance and the newly developed disease rating scale will provide the base for development of powdery mildew-resistant cultivars of Indian mustard.
Unreduced (2n) gametes are meiotic products (pollen or egg) having a sporophytic (somatic) chromosome number, resulting from abnormalities during either microsporogenesis or megasporogenesis. They occur naturally at a low frequency in many plant species. Unreduced (2n) gametes in plants can be identified for four possible ways as follow i) pollen size and/or shape differences between haploid (n) and diploid (2n) pollen, ii) ploidy analysis (chromosome number) of progeny or meiotic analysis (presence of dyads andlor triads at the microspore stage), iii) progeny performance and fertility and iv) dosage of isozyme and DNA markers. Unreduced (2n) gametes can be an effective breeding tool in synthesizing new cultivars, providing a unique method to maximizing heterozygosity, i.e., transferring a large proportion of the non-additive genetic effects (intra- and inter- locus interactions) h m parent to offspring and can also be used to overcome infertility of interploidy crosses. Sexual polyploidization through 2n gametes has been a major route to the formation of naturally occurring polyploids. The three mechanisms of 2n pollen formation in potato have been discovered as follow: i) parallel spindles (ps) or tripolar spindles (ts), ii) premature cytokinesis (pc-I, pc-2) and iii) synaptic mutants (sy-2, sy-3, sy-4). Genetic analysis indicated that the mechanisms of 2n gamete formation were controlled by single recessive gene in potato, alfalfa, red clover, etc., and by two recessive genes in wheat. The use of 2n gametes which can efficiently transfer germplasm fiom wild relatives to cultivated species, especially fiom diploid to tetraploid could make a contribution to the improvement of germplasm base in breeding programs.
Background : Infection caused by rapidly growing mycobacteria (RGM) is not uncommon, and the prevalence of RGM infection has been increasing. Clinical diagnosis is difficult because there are no characteristic clinical features. There is also no standard antibiotic regimen for treating RGM infection. A small series of patients with RGM infections was studied to examine their treatments and outcomes. Methods : A total of 5 patients who had developed postoperative infections from January 2009 to December 2010 were retrospectively reviewed. Patients were initially screened using a mycobacteria rapid screening test (polymerase chain reaction [PCR]-reverse blot hybridization assay). To confirm mycobacterial infection, specimens were cultured for nontuberculous mycobacteria and analyzed by 16 S ribosomal RNA and rpoB gene PCR. Results : The patients were treated with intravenous antibiotics during hospitalization, and oral antibiotics were administered after discharge. The mean duration of follow-up was 9 months, and all patients were completely cured of infection with a regimen of a combination of antibiotics plus surgical treatment. Although none of the patients developed recurrence, there were complications at the site of infection, including hypertrophic scarring, pigmentation, and disfigurement. Conclusions : Combination antibiotic therapy plus drainage of surgical abscesses appeared to be effective for the RGM infections seen in our patients. Although neither the exact dosage nor a standardized regimen has been firmly established, we propose that our treatment can provide an option for the management of rapidly growing mycobacterial infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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