The detection of gene-gene interactions during genetic studies of common human diseases is important, and the technique of multifactor dimensionality reduction (MDR) has been widely applied to this end. However, this technique is not free from the "curse of dimensionality" -that is, it works well for two- or three-way interactions but requires a long execution time and extensive computing resources to detect, for example, a 10-way interaction. Here, we propose a boosting method to reduce MDR execution time. With the use of pre-evaluation measurements, gene sets with low levels of interaction can be removed prior to the application of MDR. Thus, the problem space is decreased and considerable time can be saved in the execution of MDR.
Chromosomes located in the nucleus form discrete units of genetic material composed of DNA and protein complexes. The genetic information is encoded in linear DNA sequences, but its interpretation requires an understanding of three-dimensional (3D) structure of the chromosome, in which distant DNA sequences can be juxtaposed by highly condensed chromatin packing in the space of nucleus to precisely control gene expression. Recent technological innovations in exploring higher-order chromatin structure have uncovered organizational principles of the 3D genome and its various biological implications. Very recently, it has been reported that large-scale genomic variations may disrupt higher-order chromatin organization and as a consequence, greatly contribute to disease-specific gene regulation for a range of human diseases. Here, we review recent developments in studying the effect of structural variation in gene regulation, and the detection and the interpretation of structural variations in the context of 3D chromatin structure.
Salmonella typhi is frequent causes of foodborne illness and its detection is important for monitoring disease progression. In this study, by using general PCR and novel LAMP (Loop Mediated Isothermal Amplification) assay, we evaluated the usefulness of LAMP assay for detection of Salmonella typhi. In this LAMP assay, forward inner primer (FIP) and back inner primer (BIP) was specially designed for recognizing target invA gene. Target DNA was amplified and visualized as ladder-like pattern of bands on agarose gel within 60 min under isothermal conditions at $65^{\circ}C$. When the sensitivity and reproducibility of LAMP were compared to general PCR, there was no difference of reproducibility but sensitivity of LAMP assay was more efficient than PCR (the detection limit of LAMP assay was 30 fg, while the PCR assay was 3 pg). These results indicate that the LAMP assay is a potential and valuable means for detection of Salmonella typhi, especially for its rapidity, simplicity and low cost.
Digoxigenin (DIG) was used to prepare nucleic acid probe for the detection of RNA of potato leafroll virus (PLRV) in the potato leaf extracts. The 0.6 kb coat protein (CP) gene cDNA of PLRV in plasmid pSPT 18 vector was labeled with digoxigenin by in vitro run-off transcription and then used for cRNA probe. In the several buffers tested for increase the total RNA extraction efficiency AMES buffer was the most suitable for this detection method. The RNA extracts from potato leaves shown symptoms of PLRV were dot blotted onto nylon membrane and hybridized with labeled RNA probes. After hybridization, labeled RNA bound to PLRV RNA on membrane was detected with anti-digoxigenin alkaline phosphatase. 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate/nitroblue tetrazolium (NBT) salt and CSPD were used as substrate for colorimetric and film exposure detection, respectively. These detection methods were very sensitive allowing for detection of 1/32 diluted total RNA extract from 100 mg leaf tissue.
A PCR-enzyme-linked immunosorbent assay (PCR-ELISA) was developed for the rapid and sensitive detection of L. monocytogenes. PCR primers generating a 132-bp amplicon and a capture probe able to hybridize to the PCR amplicon were designed based on the L. monocytogenes-specific hly gene encoding listeriolysin. The detection limit of PCR-ELISA for L. monocytogenes was determined to be as low as 10 cells per PCR reaction, and this level of detection was achieved within 5 h. These results indicate that the PCR-ELISA provides a valuable tool for the rapid and sensitive detection of L. monocytogenes for the ready-to-eat food industry.
사람 Y염색체상에 존재하는 RPS4Y(Ribosomal Protein S4Y) 유전자는 성별감정시 유용한 유전자로 규명되어 유전질환의 조기 발견이나 예방 및 태아의 성별판정 등에 응용되고 있다. 신원이 불분명한 사체에서 성별감정시, 기존의 성별감정에 이용되고 있는 다른 유전자와 함께 RPS4Y 유전자를 검색함으로써 성별감정의 신뢰도를 높힐 수 있을 것으로 사료된다. 또한 사체의 손상이 심할 때 유전자를 이용한 개인식별은 제한을 받게 된다. 이때 치아는 인체의 기관 중 가장 견고한 구조로 구성되어 있어 외부 환경에 대한 물리적, 화학적 저항성이 높아 법의치과학적 개인식별에 널리 이용되므로, 본 연구에서는 사람 치아에서 중합효소연쇄반응법을 이용한 RPS4Y유전자를 검출하여 법의학적 성별감정에 응용하고자 하였다. 남녀 각각 10개의 치아에서 치수와 상아질을 분리한 후 DNA를 추출하여 중합효소연쇄반응을 시행하였다. RPS4Y 유전자를 검출한 결과, 남자에게서만 특이적으로 유전자가 검출되었으며, 이는 사람 치아에서 RPS4Y 유전자를 이용한 성별감정이 법의학적 개인식별의 성별감정 실무에 있어서 다른 유전자와 함께 유용하게 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
The aim of this study is to monitor reporter gene expression under osteocalcin gene promoter, using a real-time molecular imaging system, as tool to investigate osteoblast differentiation. The promoter region of mouse osteocalcin gene 2 (mOG2), the best-characterized osteoblast-specific gene, was inserted in promoterless luciferase reporter vector. Expression of reporter gene was confirmed and relationship between the reporter gene expression and osteoblastic differentiation was evaluated. Gene expression according to osteoblstic differentiation on biomaterials, utilizing a real-time molecular imaging system, was monitored. Luciferase was expressed at the only cells transduced with pGL4/mOGP and the level of expression was statistically higher at cells cultured in mineralization medium than cells in growth medium. CCCD camera detected the luciferase expression and was visible differentiation-dependent intensity of luminescence. The cells produced osteocalcin with time-dependent increment in BMP-2 treated cells and there was difference between BMP-2 treated cells and untreated cells at 14days. There was difference at the level of luciferase expression under pGL4/mOGP between BMP-2 treated cells and untreated cells at 3days. CCCD camera detected the luciferase expression at cells transduced with pGL4/mOGP on Ti disc and was visible differentiation-dependent intensity of luminescence This study shows that 1) expression of luciferase is regulated by the mouse OC promoter, 2) the CCCD detection system is a reliable quantitative gene detection tool for the osteoblast differentiation, 3) the dynamics of mouse OC promoter regulation during osteoblast differentiation is achieved in real time and quantitatively on biomaterial. The present system is a very reliable system for monitoring of osteoblast differentiation in real time and may be used for monitoring the effects of growth factors, drug, cytokines and biomaterials on osteoblast differentiation in animal.
Communications for Statistical Applications and Methods
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제14권3호
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pp.687-698
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2007
A normal mixture model with which dependence between classes is incorporated is proposed in order to detect differentially expressed genes. Gene clustering approaches suffer from the high dimensional column of microarray expression data matrix which leads to the over-fit problem. Various methods are proposed to solve the problem. In this paper, use of simple averaging data within each class is proposed to overcome the various problems due to high dimensionality when the normal mixture model is fitted. Some experiments through simulated data set and real data set show its availability in actuality.
Trichomoniasis caused by Trichomonas vaginalis is a common sexually transmitted disease. Its association with several health problems, including preterm birth, pelvic inflammatory disease, cervical cancer, and transmission of human immunodeficiency virus, emphasizes the importance of improved access to early and accurate detection of T. vaginalis. In this study, a rapid and efficient loop-mediated isothermal amplification-based method for the detection of T. vaginalis was developed and validated, using vaginal swab specimens from subjects suspected to have trichomoniasis. The LAMP assay targeting the actin gene was highly sensitive with detection limits of 1 trichomonad and 1 pg of T. vaginalis DNA per reaction, and specifically amplified the target gene only from T. vaginalis. Validation of this assay showed that it had the highest sensitivity and better agreement with PCR (used as the gold standard) compared to microscopy and multiplex PCR. This study showed that the LAMP assay, targeting the actin gene, could be used to diagnose early infections of T. vaginalis. Thus, we have provided an alternative molecular diagnostic tool and a point-of-care test that may help to prevent trichomoniasis transmission and associated complications.
유전자변형 장미 개발에 이용된 형질전환 벡터 pSPB130을 검출할 있는 duplex PCR이 개발되었다. 유전자변형 장미를 검출하기 위해 anthocyanin synthase($ANS$)가 장미 내 재유전자로 PCR 검사법에 이용하였다. 107bp의 PCR 산물을 얻을 수 있는 RHANS-KF/KR primer가 ANS 유전자를 증폭시키는데 이용되었고, 이것을 이용하여 9개의 다른 식물에 대해서 PCR한 결과 장미에서만 특이적인 증폭산물이 확인되었다. GMRH-KF/KR primer가 형질전환 벡터 pSPB130에 삽입된 35S promoter와 flavonoid 3',5'-hydroxylase($F3^{\prime}5^{\prime}H$) 사이의 염기서열을 확인할 수 있도록 제작되었다. 본 연구에서 개발된 duplex PCR의 검정한계치는 약 0.5%이며, 이러한 duplex PCR이 우리나라 미승인 유전자변형 장미를 모니터링 하는데 유용하게 사용될 수 있을 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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