Next generation sequencing (NGS), a high-throughput DNA sequencing technology, is widely used for molecular biological studies. In NGS, RNA-sequencing (RNA-Seq), which is a short-read massively parallel sequencing, is a major quantitative transcriptome tool for different transcriptome studies. To utilize the RNA-Seq data, various quantification and analysis methods have been developed to solve specific research goals, including identification of differentially expressed genes and detection of novel transcripts. Because of the accumulation of RNA-Seq data in the public databases, there is a demand for integrative analysis. However, the available RNA-Seq data are stored in different formats such as read count, transcripts per million, and fragments per kilobase million. This hinders the integrative analysis of the RNA-Seq data. To solve this problem, we have developed a web-based application using Shiny, COEX-seq (Convert a Variety of Measurements of Gene Expression in RNA-Seq) that easily converts data in a variety of measurement formats of gene expression used in most bioinformatic tools for RNA-Seq. It provides a workflow that includes loading data set, selecting measurement formats of gene expression, and identifying gene names. COEX-seq is freely available for academic purposes and can be run on Windows, Mac OS, and Linux operating systems. Source code, sample data sets, and supplementary documentation are available as well.
Resistance to pyraclostrobin due to a single nucleotide polymorphism at 143rd amino acid position on the cytochrome b gene has been a major source of concern in red pepper field infected by anthracnose in Korea. Therefore, this study investigated the response of 24 isolates of C. acutatum and C. gloeosporioides isolated from anthracnose infected red pepper fruits using agar dilution method and other molecular techniques such as cytochrome b gene sequencing, polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP), and allele-specific polymerase chain reaction (PCR). The result showed that four isolates were resistant to pyraclostrobin on agar dilution method and possessed GCT (alanine) codon at 143rd amino acid position, whereas the sensitive isolates possessed GGT (glycine). Furthermore, this study illustrated the difference in the cytochrome b gene structure of C. acutatum and C. gloeosporioides. The use of cDNA in this study suggested that the primer Cacytb-P2 can amplify the cytochrome b gene of both C. acutatum and C. gloeosporioides despite the presence of various introns in the cytochrome b gene structure of C. gloeosporioides. The use of allele-specific PCR and PCR-RFLP provided clear difference between the resistant and sensitive isolates. The application of molecular technique in the evaluation of the resistance status of anthracnose pathogen in red pepper provided rapid, reliable, and accurate results that can be helpful in the early adoption of fungicide-resistant management strategies for the strobilurins in the field.
본 연구에서는 p-cresol 초기 분해에 관여하는 기존의 lap과 pcu 유전자군 외에 새로운 pch 유전자군을 Pseudomonas alkylphenolica KL28로 부터 동정하였다. 이 유전자군(pchACXF-pcaHG-orf4-pcaBC)은 p-cresol을 ${\beta}$-carboxy-cis,cis-muconate로의 전환을 촉매할 수 있는 효소를 암호화하는 것을 알 수 있었다. 이 유전자 군은 영국에서 분리된 Pseudomonas putida NCIMB 9866과 9869의 plasmid에서 유래된 pch 유전자 군과 동일하여, 이들 유전자군은 종간 horizontal gene transfer로 전달되었을 가능성을 제시하였다. 각 유전자군의 관련 유전자의 변이와 gfp 레포터를 갖는 프로모터의 발현 분석을 통해 3개의 분해 유전자군이 모두 p-cresol의 분해에 관여하는 것을 알 수 있었으며, pch 유전자는 p-cresol에 의해 유도되며, 고체 및 액체 배지에서도 pcu 유전자군이 가장 높게 발현되는 것을 확인할 수 있었다. 또한 pcu 유전자 변이주는 p-cresol을 이용하여 버섯모양의 공중체(aerial structure) 형성하지 않았으므로, 탄소원의 이용 속도가 다세포 구조 형성에 영향을 주는 중요한 요소 중의 하나임을 알 수 있었다.
Angel, Laura Iztacihuatl Serrano;Segura, Daniel;Jimenez, Jeiry Toribio;Barrera, Miguel Angel Rodriguez;Pineda, Carlos Ortuno;Ramirez, Yanet Romero
한국미생물·생명공학회지
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제48권2호
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pp.185-192
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2020
The global carbon storage regulator (Csr) system is conserved in bacteria and functions as a regulator in the exponential and stationary phases of growth in batch culture. The Csr system plays a role in the central carbon metabolism, virulence, motility, resistance to oxidative stress, and biofilm formation. Although the Csr was extensively studied in Gram negative bacteria, it has been reported only in the control of motility in Bacillus subtilis among Gram positive bacteria. The goal of this study was to explore the role of the csrA gene of Bacillus licheniformis M2-7 on motility and the bacterial ability to use hydrocarbons as carbon source. We deleted the csrA gene of B. licheniformis M2-7 using the plasmid pCsr-L, harboring the spectinomycin cassette obtained from the plasmid pHP45-omega2. Mutants were grown on culture medium supplemented with 2% glucose or 0.1% gasoline and motility was assessed by electron microscopy. We observed that CsrA negatively regulates motility by controlling the expression of the hag gene and the synthesis of flagellin. Notably, we showed the ability of B. licheniformis to use gasoline as a unique carbon source. Our results demonstrated that CsrA is an indispensable regulator for the growth of B. licheniformis M2-7 on gasoline.
Achromobacter xylosoxidans KF701 and Pseudomonas putida (NAH7) were significantly different in degradative capability of aromatic compounds including benzoates, biphenyls, and naphthalene. However, both of the bacterial strains can grown on catechol as the sole carbon and energy source. Catechol 2, 3-dioxygenase gene for naphthalene oxidation or biphenyl oxidation was cloned into Escherichia coli HB 701. A E. coli HB 101 clone containing catechol 2, 3-dioxygenase gene from P. putida (NAH7) contains a recombinant plasmid with 3.60kb pBR322 and 6-kb insert DNA. Another E. coli HB101 clone containing catechol 2, 3-dioxygenase gene from A. xylosoxidans KF 701 has a recombinant plasmid with 4.4kb pBR322 and 10-kb insert DNA. Physical maps of the recombinant plasmids were constructed, and catechol 2, 3-dioxygenase gene in the recombinant plasmide was further localized and subcloned int M13. The cloned-catechol 2, 3-dioxygenase game products were identified as yellow bands on nondenaturaing polyacrylamide gel after electrophoresis followed by activity staining with catechol solution.
Bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs) have the capacity for self-renewal and differentiation into a variety of cell types. They represent an attractive source of cells for gene and cell therapy. The purpose of this study is to direct the specific expression of the DsRed reporter gene in $Sca-1^+$ BMMSCs differentiated into a cardiomyogenic lineage. We constructed the prMLC-2v-DsRed vector expressing DsRed under the control of the 309 tp fragment of the rat MLC-2v 5'-flanking region. The specific expression of the DsRed reporter gene under the transcriptional control of the 309 bp fragment of the rat MLC-2v promoter was tested in 5-azacytidine healed-$Sca-1^+$ BMMSCs over 2 weeks after the prMLC-2v-DsRed transfection. The prMLC-2v-DsRed was specifically expressed in the $Sca-1^+$ BMMSCs with cardiomyogenic lineage differentiation and it demonstrates that the 309 bp sequences of the rat MLC-2v 5'-flanking region is sufficient to confer cardiac specific expression on a DsRed reporter gene. The cardiac-specific promoter-driven reporter vector provides an important tool for the study of stem cell differentiation and cell replacement therapy in ischemic cardiomyopathy.
A gene coding for the $\beta$-galactosidase (lactase) of Kluyveromyces tragilis UCD 55-55 was isolated by complementation in Escherichia coli YMC9. From the plasmid library made from Sau3A-digested chromosomal DNA, one positive clone was selected. The cloned gene for $\beta$-galactosidase was on 7.3 kilobase pair DNA fragment, and a slightly low level of $\beta$-galactosidase enzyme activity was detecied in E. coli. It was also confirmed that the cloned gene comes from K. tragilis by DNA-DNA hybridization and immunochemical blotting experiments. In order to construct a new yeast strain having the metabolic ability for lactose, the cloned gene for K. tragilis $\beta$-galactosidase was inserted in yeast vector YEp24 and YRp17, and transformed into Saccharomyces cerevisiae YNN27 and Ml-2B. The yeast transformants showed the nearly the same $\beta$-galactosidase productivity as level of K. tragilis when uninduced, but these could not utilize lactose as a sole carbon source, presumably due to the lack of lactose transport system. Nevertheless, a slightly higher ethanol productivity was achieved by these transformants than S. cerevisiae or K. tragilis, in the medium containing glucose and lactose.
This study intends to define $\ulcorner$personality$\lrcorner$ as $\ulcorner$Human-ware$\lrcorner$ based on $\ulcorner$Gene-ware$\lrcorner$ in business management. The sides of personality in management are important source of manifestation of ‘Synergy’, because the importance of personality, that is, $\ulcorner$attitude$\lrcorner$ in individuals is increasing compared with the traditional techniques, $\ulcorner$craft$\lrcorner$. In this work it is considered that Human-ware activates interchange in reciprocal relation between Gene-ware and Hard-ware and performs balancing, intermediating (catalyzing) functions in relative that things(Geneware $\leftrightarrow$ Humanware $\leftrightarrow$ Hardware). $\ulcorner$Gene-ware$\lrcorner$ represents factor and phenomena of life in evolutionary information as human instincts, system of Gene-duum(Gene+Residuum(in phenomenology) ), Synchronization(in structuralism). In this view, this paper defines the concepts and effects of personality in management as the results of creative and stational functions of Human-ware. And this paper intends to identify the strata of psycho in human as three vertical aspects of $\ulcorner$Manifest$\lrcorner$, $\ulcorner$Latent$\lrcorner$, and $\ulcorner$Found$\lrcorner$, in this respects, function of Human-ware have analogy to that of Manifest in psychological behaviors. Finally, reviewing the Ford system based on Fordism and Taylor's system in Industrial Engineering, pursues the meaning and importance of personality, that is Humanware in management.
It can be hypothesized that dietary fatty acids can modulate immune responses in fish by inducing apoptosis of immune cells since dietary polyunsaturated fatty acid (PUFA) increase apoptosis by oxygen radicals generated by peroxidation. Thus we examined the effects of deferent dietary lipid sources such as squid liver oil (FO), linseed oil (LO) and soybean oil (SO) on oxidation (Cytochrome C oxidase; COS), apoptosis (TNF-${\alpha}$ Scinderin like) and immune (IL-$1{\beta}$ and NKEF) gene expression in the main immune organ (head kidney) in olive flounder (Paralichthys olivaceus) by Q-PCR analysis after feeding diets containing each oil (5%) for 15 weeks. Linseed oil and soybean oil were chosen to compare n-3 or n-6 enriched vegetable oils, respectively. Consequently, COS, TNF-${\alpha}$ and Scinderin like gene expression was increased in SO group, indicating the induction of oxidation and apoptosis. Meanwhile, no significant difference was found in immune gene expression. In conclusion vegetable oils containing n-3 PUFA like linseed oil seems to be more suitable lipid source than soybean oil for replacement of fish oil in flounder since n-6 PUFA in SO leads to activation of apoptosis pathways within the cellular damage in head kidney.
Hesham, Abd El-Latif;Mostafa, Yasser S.;AlSharqi, Laila Essa Omar
Mycobiology
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제48권2호
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pp.122-132
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2020
Citric acid is a commercially valuable organic acid widely used in food, pharmaceutical, and beverage industries. In this study, 260 yeast strains were isolated from soil, bread, juices, and fruits wastes and preliminarily screened using bromocresol green agar plates for their ability to produce organic acids. Overall, 251 yeast isolates showed positive results, with yellow halos surrounding the colonies. Citric acid production by 20 promising isolates was evaluated using both free and immobilized cell techniques. Results showed that citric acid production by immobilized cells (30-40 g/L) was greater than that of freely suspended cells (8-19 g/L). Of the 20 isolates, two (KKU-L42 and KKU-L53) were selected for further analysis based on their citric acid production levels. Immobilized KKU-L42 cells had a higher citric acid production rate (62.5%), while immobilized KKU-L53 cells showed an ~52.2% increase in citric acid production compared with free cells. The two isolates were accurately identified by amplification and sequence analysis of the 26S rRNA gene D1/D2 domain, with GenBank-based sequence comparison confirming that isolates KKU-L42 and KKU-L53 were Candida tropicalis and Pichia kluyveri, respectively. Several factors, including fermentation period, pH, temperature, and carbon and nitrogen source, were optimized for enhanced production of citric acid by both isolates. Maximum production was achieved at fermentation period of 5 days at pH 5.0 with glucose as a carbon source by both isolates. The optimum incubation temperature for citric acid production by C. tropicalis was 32 ℃, with NH4Cl the best nitrogen source, while maximum citric acid by P. kluyveri was observed at 27 ℃ with (NH4)2 SO4 as the nitrogen source. Citric acid production was maintained for about four repeated batches over a period of 20 days. Our results suggest that apple and banana wastes are potential sources of novel yeast strains; C. tropicalis and P. kluyveri which could be used for commercial citric acid production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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