Normal gingival fibroblasts functioning is fundamental for the maintenance of periodontal connective tissue as well as wound healing. Nicotine have been found to affect DNA synthesis and cell proliferation, which appear to depend on the type of cells. This in vitro study was done to determine the effects of nicotine, a major component of tobacco, on cell proliferation, viability, activity, cell cycle distribution, and expression of cell cycle regulatory proteins in human gingival fibroblasts. Nicotine has been tested for 2 days or 4 days in 5 different concentrations; $0.1{\mu}g/ml$; $1{\mu}g/ml$; $10{\mu}g/ml$; $100{\mu}g/ml$; $1000{\mu}g/ml$. To assess cell proliferation and viability, viable and non-viable cells were counted by hemocytometer; to evaluate cellular activity, MTT assay was employed; to analyze cell cycle distribution, fluorescent propidium iodide-DNA complex were measured using fluorocytometer; to determine the expression of cell cycle regulatory proteins, western blot analysis was performed. After 2 days and 4 days incubation respectively, at concentrations of $1{\mu}g/ml$ - $1000{\mu}g/ml$, nicotine significantly inhibited proliferation comparing to non-supplemented controls. The cell viability was significantly decreased after 2 days and 4 days at concentrations of $1{\mu}g/ml$ - $1000{\mu}g/ml$ and at $10{\mu}g/ml$ - $1000{\mu}g/ml$ respectively. After 2 days and 4 days, the cellular activity was significantly decreased at concentrations of $10{\mu}g/ml$ - $1000{\mu}g/ml$. Treatment with $100{\mu}g/ml$ nicotine for 48 hours caused an increase in the proportion of G1-phase cells (from 46.41% to 53.46%) and a decrease in the proportion of S-phase cells (from 17.80% to 14.27%). The levels of cyclin $D_1$ and CDK 4 proteins in nicotine-treated fibroblasts were lower than that of controls, whereas the levels of p16 and pRB were higher than that of controls. These results suggest that the decrease of cell proliferation and lengthened Gap phases (G1) by nicotine may due to the increased expression of p16 and pRB as well as decreased expression of cyclin $D_1$ and CDK 4 in human gingival fibroblasts.
본 연구는 한국재래오골계의 품종보존과 육종개량을 위하여 주요 경제형질중의 하나인 산육능력을 규명하고자 천연기념물 265호로 지정된 연산오골계 총 300수를 공시하여 4주까지는 육계전기식료, 5주부터 16주까지는 육계후기사료로 사육하였다. 조사항목은 체중, 증가율, 가식부와 불가식부의 중량 및 비율, 흉부와 퇴경부의 체형 등이며, 나타난 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) 재동오골계의 체중은 6주령부터 암수간에 유의한 차이를 나타내었다. 수컷과 암컷의 기중은 8주령 $659.0{\pm}154.9$와 $588.3{\pm}68.0$g이었고, 10주령시 $938.1{\pm}72.6$, $810.1{\pm}104.4$g이었다. 암수의 평균체중은 8주령 $623.7{\pm}121.9$, 10주령 $874.1{\pm}109.4$g으로 나타났다. 2) 증체율은 암수간에 큰 차이가 없었고, 암수의 평균증체율은 2~4주, 4~6주, 6~8주, 8~10주에 각각 166%, 106%, 41% 그리고 40%로 나타났다. 3) 총가식부의 증가양상은 12주령까지 암수 모두에서 고도로 유의하게 증가하였고 성간에는 6주령부터 익부, 배부 퇴경부 및 총가식부의 중량은 8주와 10주령시 수컷은 $395.4{\pm}98.5$와 $597.54{\pm}7.25$이고 암컷은 $355.6{\pm}42.0$과 $518.7{\pm}69.7$g이었다. 암수 평균총가식부 중량은 8주와 10주령시 각각 $375{\pm}72.7$g이었고 체중에 대한 비율은 60~63%정도로 나타났다. 4) 가식내장의 체중에 대한 비율은 8주와 10주령시 암수간에 큰 차이가 없었고, 암수 평균은 4~6%정도로 나타났다. 5) 불가식부의 체중에 관한 비율은 주령이 경과함에 따라 점차 낮아지는 경향을 보였고, 암수간에는 비슷한 비율을 나타내었다. 암수평균한 8주령시 비율은 혈액 4%, 우모 7%. 불가식내장 12% 그리고 총불가식부 31%를 차지하였다. 6) 흉부와 퇴경부 체형구성요소들에서는 흉각과 각경을 제외하고는 10주령까지 유의하게 증가하였고, 8주와 10주령시 암수간에는 흉위, 흉골장, 퇴경부 둘레 및 각경에서 유의한 차이가 있었다. 7) 체중과 가식부중량에 대하여 체형구성요소중에 흉위와 퇴경부 둘레가 유의한 상관을 나타내었고, 체중구성요소중에는 가식부의 비율들이 체중에 밀접한 상관관계를 보였으며 특히 흉부와 퇴경부의 비율과 총가식부비율간에는 고도로 유의한 상관관계를 나타내었다.
본 연구에서는 곰팡이 독소에 대한 노출을 확인하기 위한 목적으로 닭의 간, 신장 조직에서 곰팡이 독소 분석법을 확립하였다. 곰팡이 독소의 경우 닭에서 독성이 강하며, 본 실험에서는 가축의 사료에서 주로 확인되는 곰팡이 독소 6종(아플라톡신 $B_1{\cdot}M_1$, 오크라톡신 A, 푸모니신 $B_1$, 데옥시니발레놀, 제랄레논)을 선별하여 추출, 정제조건을 확립하고 LC-MS/MS를 이용하여 분석하였다. 확립된 분석조건에서 검량선은 $R^2$값이 0.99 이상으로 우수한 직선성을 나타내었다. QUECHERS법을 응용하여 닭 간, 신장 시료에서 곰팡이 독소를 추출, 정제하여 분석하였을 때 곰팡이 독소 4종(아플라톡신 $B_1$, 오크라톡신 A, 데옥시니발레놀, 제랄레논)의 평균 회수율은 80.94~98.10%이고, 상대표준편차도 14% 미만으로 조사되어 높은 정확도와 정밀도를 확인할 수 있었다. 검량선에 근거하였을 때 곰팡이 독소 6종에 대하여 닭 간 시료의 경우 검출한계는 $7.6{\sim}145.79{\mu}g/kg$, 정량한계는 $23.04{\sim}441.78{\mu}g/kg$이었다. 닭 신장의 경우 검출한계는 $6.07{\sim}197.20{\mu}g/kg$, 정량한계는 $18.40{\sim}597.59{\mu}g/kg$으로 나타났다. 본 연구의 결과 LC-MS/MS를 이용하여 닭의 간, 신장에서 곰팡이 독소 6종 동시 분석법을 확립하였으며, 이는 생체시료에서 효율적인 곰팡이 독소 동시 분석법으로 활용이 가능할 것으로 기대된다.
ADHD (Attention Deficit/Hyperactivity Disorder)은 4-17세의 아동 및 청소년의 약 10%가 겪는 흔한 신경 발달 장애이지만 그 핵심 기전이 알려져 있지 않은 가운데 관련한 여러 단백질들이 보고되어왔다. 이중 GIT1 (G-protein coupled-receptor kinase interacting protein-1)은 중추신경계에서 dendritic spine formation와 growth에 영향을 미치는 multifunctional adaptor protein으로, GIT1이 제거된 생쥐는 과잉행동, 주의력결핍 그리고 충동성을 보이는 ADHD 증상을 보이게 된다. 이 논문에서는 GIT1 유전자 변형 생쥐를 이용하여 genotype별로 신경교세포의 전달물질(gliotransmitter)을 비교 분석하는 실험을 진행하였다. 그 결과 주요 흥분성 전달물질인 glutamate는 HE (hetero)와 KO (knock-out)의 세포 내에서 WT (wildtype)보다 더 높은 농도로 존재했다. 한편, 억제성 신경전달물질인 GABA와 glycine의 경우 전반적으로 HE에서 가장 많은 함유량을 보였지만 소뇌 세포내의 경우, KO이 WT보다 많은 양을 함유한 것에 비해 대뇌 세포 내에서는 KO보다 WT의 억제성 전달물질 함유량이 높았다. 또한, glutamate와 GABA를 기준으로 흥분성/억제성 비율(excitation/inhibition ratio)을 보았을 때, 소뇌 세포 내/외 모두에서 KO이 가장 높은 수치를 보였고, 대뇌에서는 세포 내/외 모두 HE에서 가장 높은 수치를 보였다. 억제성 신경전달물질인 GABA가 KO의 대뇌 세포 외에서 가장 많은 것으로 보아 GIT1 결손을 보완하기 위해 억제성 물질을 더 많이 분비하거나 또는 과도하게 분비된 GABA를 재흡수하지 못하는 것이라 사료된다. 이는 ADHD 병리기전으로써 기능할 가능성을 제시하며 후속 연구를 통해 해당 기전에 대한 규명이 필요할 것으로 보인다.
제주지역에 서식하고 있는 블루베리 (Vaccinium corymbosum L.)로부터 수용성 추출물을 효과적으로 제조하기 위하여 5가지 종류의 탄수화물 분해효소 (AMG, Celluclast, Termamyl, Ultraflo, Viscozyme)와 또 다른 5종의 단백질 분해효소 (Alcalase, Flavourzyme, Kojizyme, Neutrase, Protamex)를 이용하여 효소적 추출을 시도하였다. 이들 효소를 이용하여 제조된 여러 가지 블루베리 효소 추출물에 대하여 1,1-diphenyl 2-picrylhydrazyl (DPPH), 활성산소종 (ROS), 일산화질소 $(NO{\cdot})$ 등의 소거 활성, 금속 킬레이트결합능, 그리고 지질 과산화 저해능과 같은 항산화 효과를 검토하였다. 모든 효소 추출물의 페놀함량은 $517.85\~597.96\;mg/100 g$ 건조시료이었으며, 항산화 효과에 대한 평가에서 특히 DPPH 및 $NO{\cdot}$ 소거활성, 그리고 금속 킬레이트 결합능 등이 우수한 것으로 나타났다. Viscozyme 추출물은 DPPH 소거활성 $(0.046{\pm}0.002\;mg/mL)$이, 그리고 AMG 추출물은 $NO{\cdot}$ 소거활성$(0.339{\pm}0.011\;mg/mL)$ 및 지질 과산화 억제활성 $(0.28{\pm}0.01\;mg/mL)$이 각각 우수하였다. 과산화 수소 소거활성에 있어서는 블루베리 효소 추출물들이 천연 항산화제인 a-토코페롤보다 상대적으로 높았다. 이러한 결과로 볼 때 블루베리는 항산화 효과가 우수한 화합물들을 함유하고 있을 것으로 판단되며, 향후 천연 항산화 자원으로서 이용이 가능할 것으로 사료된다.
숙성온도와 기간에 따른 대추의 성분변화 및 항산화활성 변화를 분석한 결과 갈변도는 무처리구에 비해 가온숙성처리구에서 전체적으로 증가하였으며, 숙성 30일차 및 50일차에서는 다소 감소하는 경향을 보였다. 환원당, fructose와 glucose함량은 가온숙성처리구에서 높았으며, 숙성온도 및 기간이 증가함에 따라 유의적으로 감소하였다. 5-HMF 함량은 숙성온도 및 기간이 증가함에 따라 증가하여 숙성 50일차 $80^{\circ}C$에서 최대값을 나타내었다. 총 폴리페놀 함량도 숙성 온도와 기간이 증가함에 따라 증가하였으며, DPPH 라디칼 소거능 및 ABTS 라디칼 소거능도 가온숙성처리구에서 높았으며, 환원력은 숙성온도가 증가함에 따라서 증가하였지만 숙성일수에 따른 변화는 작게 나타났다. 숙성 온도 및 기간이 증가함에 따라 페놀성 화합물의 증가로 인하여 항산화 활성도 증가하였으며, 대추의 항산화활성을 높일 수 있는 최적숙성조건은 $70^{\circ}C$에서 15~30일로 판단되었다. 이를 통하여 건대추의 항산화 활성을 향상시켜 새로운 건강기능성 식품소재로 이용가능하며, 이에 따라 대추의 활용도 제고 및 부가가치를 높일 수 있을 것으로 판단된다.
In order to observe the endemic status of Clonrchis sinensis infection in Samrangjin eup, Milyang gun, Kyongsang nam do, a total number of 294 stool specimens were collected from the inhabitants who lived in the basin of the Nakdong river. The specimens were examined by cellophane thick smear technique and Stoll's egg dilution technique during the period from May to June 1983. The epidemiological status was analysed statistically by the regression equation and catalytic curv with the results obtained from this area. The results are as follows : 1) The infestation rate of Clonorchis sinensis in 294 was 49.0%. 2) No remarkable difference was observed between male (52.5%) and female (44.8%). 3) Average E.P.G. by Stoll's egg dilution technique in this area was 9,597. 4) The degree of the intensity of Clonorchis infection by E.P.G. count was distributed as 10.5% in very heavy infection, 14.7% in heavy infection, 47.4% in moderate infection, and 29.3% in light infection. 5) The intensity of endemicity in this area was represented with the regression equation calculated with the cumulative percentages of E.P.G. counts. Regression equation was y=3.40+1.23 log x and Cs. $D._{50}$ was 19.99. 6) The two stage catalytic model was applied and the calculation lead to the equation $y=1296(e^{-0.008t}-e^{-0.035t})$ ; a=0.035 > b=0.008 in this surveyed area. 7) Other helminthic infection rate in this area was 7.1% in A. lumbricoides, 9.5% in T. trichiura and 4.1% in E. vermicularis respectively.
Monthly changes in the proximate and fatty acid compositions of chub mackerel (Scomber japonicus) muscle during cultivation from October 2007 to September 2008 were investigated. The lipid content increased gradually from the first stage of cultivation until March 2008 and then dramatically until May, before decreasing. The highest lipid content during cultivation was 21.6% in May, just before the fish spawns. There was a negative correlation (y=-1.1585x+87.741, $R^2$=0.9495) between the lipid and moisture contents during cultivation of chub mackerel. By contrast, the protein ($18.6{\pm}1.05%$) and ash ($1.18{\pm}0.11%$) contents were essentially unchanged during cultivation. Prominent fatty acids in chub mackerel muscle were 16:0, 18:0, 14:0 saturates, 18:1n-9, 16:1n-7, 18:1n-7 monoenes, and 22:6n-3 (docosahexaenoic acid, DHA), 20:5n-3 (eicosapentaenoic acid, EPA), and 18:2n-6 polyenes. The percentages of n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA), such as DHA and EPA, were higher during three months in the early stage of cultivation than they were subsequently. However, the PUFA (DHA+EPA) content (in mg/100 g of muscle) was lower in the early stage (740-796 mg/100 g muscle) than in the other stages. The highest PUFA (DHA+EPA) content was from April to May (2,749-2751 mg/100 g muscle). The PUFA content was positively correlated with the total lipid content of chub mackerel muscle during cultivation. The results indicate that cultured chub mackerel is a very good source of n-3 PUFA, such as DHA and EPA.
Juhyung Kim;Soyoon Hwang;Narae Hwang;Yeonji Lee;Hee Jeong Cho;Joon Ho Moon;Sang Kyun Sohn;Dong Won Baek
Journal of Yeungnam Medical Science
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제40권3호
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pp.283-288
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2023
Severe chronic neutropenia is classified as severe congenital, cyclic, autoimmune, or idiopathic. However, there is a lot of uncertainty regarding the diagnosis of severe congenital neutropenia (SCN) and chronic idiopathic neutropenia, and this uncertainty affects further evaluations and treatments. A 20-year-old man presented with fever and knee abrasions after a bicycle accident. On admission, his initial absolute neutrophil count (ANC) was 30/µL. He had no medical history of persistent severe neutropenia with periodic oscillation of ANC. Although his fever resolved after appropriate antibiotic therapy, ANC remained at 80/µL. Bone marrow (BM) aspiration and biopsy were performed, and a BM smear showed myeloid maturation arrest. Moreover, genetic mutation test results showed a heterozygous missense variant in exon 4 of the neutrophil elastase ELANE: c597+1G>C (pV190-F199del). The patient was diagnosed with SCN. After discharge, we routinely checked his ANC level and monitored any signs of infection with minimum use of granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), considering its potential risk of leukemic transformation. Considering that SCN can be fatal, timely diagnosis and appropriate management with G-CSF are essential. We report the case of a patient with SCN caused by ELANE mutation who had atypical clinical manifestations. For a more accurate diagnosis and treatment of severe chronic neutropenia, further studies are needed to elucidate the various clinical features of ELANE.
본 연구에서는 T24 인체방광암 및 U937 백혈병 세포의 증식에 미치는 genistein의 영향을 조사 하였다. Genistein이 처리된 T24 및 U937 세포는 처리 농도 의존적으로 세포의 증식이 현저히 감소되었으며 심한 형태적 변형이 동반되었으나, U937 세포에서 보다 높은 감수성을 보였다. 이러한 T24 및 U937 세포의 증식억제 및 형태 변형은 G2/M기의 세포주기 억제 및 apoptosis 유발과 연관성이 있음을 flow cytometry를 이용한 세포주기의 분석을 통하여 확인하였다. T24 세포에서 genistein에 의한 G2/M arrest는 cyclin A, cyclin B1 및 Cdc25C 등의 단백질 발현 감소와 연관성이 있었으나, 종양억제 유전자 p53 및 Cdk inhibitor p21의 발현에는 큰 변화가 없었다. U937 세포에서 genistein에 의한 G2/M arrest는 cyclin B1 및 p53 비의존적인 p21의 발현 증가와 연관성이 있었다. 이상의 결과들은 현재까지 거의 연구가 진행된 바 없는 인체방광암 및 백혈병 세포에서 genistein의 항암작용을 이해하는데 중요한 자료가 될 것이고 나아가 genistein을 포함한 그와 유사한 항암제 후보물질들의 연구에 있어서 기초 자료로서 사용될 수 있을 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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