White and black sesame produced in Korea were defatted with ethyl ether or n-hexane. Defatted sesame meal was extracted with water and salt solution, and protein extraction was precipitated at various pH 1 through 12, with trichloro acetic acid (TCA), tannic acid and ammonium sulfate, respectively. Protein was purified by Sephadex A-25, G-75, G-100 and G-200, and identified its protein fraction by polyacrylamide gel electrophoresis. Amino acids composition of protein in white sesame was analyzed by automatic amino acid analyzer. Protein contents of white sesame, black sesame and sesame meal are 20.5%, 19.2%, and 44.7%, respectively. n-Hexane was the most suitable solvent for extraction of oil from sesame. Crude protein precipitation was better in higher pH. The protein extraction was more effective with the solution containing sodium chloride tinder the pH 8. Globulin in total protein was high and prolamin was less than in other cereal proteins. Glutamic acid contents of white sesame and sesame globulin were 17.1%, and 20%, respectively. Both proteins contained relatively high levels of essential amino acids. 12-13 bands were found in water soluble protein and 2 bands in salt soluble protein were detected by the disc gel electrophoresis, and were identified in both of white and black sesame. The salt soluble protein of white sesame could be purified by Sephadee G-100 and G-200.
In this study, to assess the diagnostic value for mastitis in dairy cows, change of acute phase proteins(haptoglobin and serum amyloid A) concentrations in milk and sera of dairy cows were measured. 50 dairy cows were used in this experiment and divided into two groups. The first group was the healthy dairy cow group whose milk contained less than 2.0${\times}$10$\^$5/ somatic cell counts(n=5). The second group was the mastitis-dairy cow group whose milk counted higher than 5.0${\times}$10$\^$5/ somatic cell counts(n=45). The concentration of haptoglobin and serum amyloid A in milk and sera from these two groups were determined by Tridelta range haptoglobin kit and serum amyloid A kit. The concentration of haptoglobin in the milk from first group was undetectable value and that of the second group was 124.0$\mu\textrm{g}$/$m\ell$. And the concentration of haptoglobin in serum of the first group was 32.0$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ and that of the second group was 214.4$\mu\textrm{g}$/$m\ell$. The concentration of serum amyloid A in the milk from first group was 0.32$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ and that of the second group was 17.7$\mu\textrm{g}$/$m\ell$. And the concentration of serum amyloid A in serum of the first group was 5.1$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ and that of the second group was 25.8$\mu\textrm{g}$/$m\ell$. It was concluded that concentration of haptoglobin and serum amyoid A in milk and serum may be was to discriminate between normal and mastitic milks.
Obesity results from a combination of genetic, environmental, and behavioral factors. Uncoupling proteins (UCP) are members of the larger family of mitochondrial anion carrier proteins (MACP). UCP separates oxidative phosphorylation from ATP synthesis with energy dissipated as heat, also referred to as the mitochondrial proton leak. UCP facilitates the transfer of anions from the inner to the outer mitochondrial membrane and the return transfer of protons from the outer to the inner mitochondrial membrane. Therefore, we investigated the genotype for the G>A polymorphism at the position -866 of UCP2 gene in Koreans and compared genotype of patients with control group. 50 patients (Male 22, Female 28), who previously underwent type 2 diabetcs (T2DM) and 30 controls (Male 14, Female 16) participated in this study. There was a weak significant association between -866 G>A polymorphism in UCP2 gene and T2DM. The present study shows that UCP2 -866 G>A polymorphism may not be associated with the pathogenesis of T2DM as opposed to the previous reports in other countries. Further studies with larger population may be needed for the development of diagnostic methods at genetic level such as DNA chip.
Shin, Han Jae;Lee, Hayyoung;Park, Jong Dae;Hyun, Hak Chul;Sohn, Hyung Ok;Lee, Dong Wook;Kim, Young Sang
Molecules and Cells
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v.24
no.1
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pp.119-124
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2007
TLR4 together with CD14 and MD-2 forms a pattern recognition receptor that plays an initiating role in the innate immune response to Gram-negative bacteria. Here, we employed the surface plasmon resonance technique to investigate the kinetics of binding of LPS to recombinant CD14, MD-2 and TLR4 proteins produced in insect cells. The dissociation constants ($K_D$) of LPS for immobilized CD14 and MD-2 were $8.7{\mu}m$, and $2.3{\mu}m$, respectively. The association rate constant ($K_{on}$) of LPS for MD-2 was $5.61{\times}10^3M^{-1}S^{-1}$, and the dissociation rate constant ($K_{off}$) was $1.28{\times}10^2S^{-1}$, revealing slow association and fast dissociation with an affinity constant $K_D$ of $2.33{\times}10^6M$ at $25^{\circ}C$. These affinities are consistent with the current view that CD14 conveys LPS to the TLR4/MD-2 complex.
Aspergillus ustus was cultured in the salts media contained dextran (2%). Then the cultured liquid media were filtrated and concentrated up to 10 folds by evaporation, and then purified by means of acetone precipitation, of a repeated chromatography on the columns of DEAE-Ccellulose, Biogel P-150, and Sephadex G-200. Total proteins in the initial culture filtrate were 38,500mg, but the final amounts of proteins were 172mg. The specific activity of the protein in the culture filtrate was $1,340\;{\mu}moles$ products per minute per mg protein, but the final specific activity of the protein was $2,448\;{\mu}\;moles$ products per minute per mg protein. The final yields remained about 30% of the initial.
This study was performed to apply a protein film containing a natural antimicrobial compound to meat packaging and determine quality change of meat during storage. Proteins obtained from the by-products of food processing have been utilized as biodegradable film sources. Porcine meat and bone meal (MBM) is obtained during meat processing, and proteins from the MBM can be extracted and used as a film base material. Previously, an antimicrobial MBM film containing coriander oil (CO) was prepared and its physical properties and antimicrobial activity were characterized. In this study, the antimicrobial MBM-CO film was applied to beef patties packaging, and the microbial population and the degree of lipid oxidation were determined during storage at 4℃ for 15 d. The population of inoculated E. coli O157:H7 in the samples wrapped with the MBM-CO film was 6.78 log colony forming unit (CFU)/g after 15 d of storage, whereas the control had 8.05 Log CFU/g, thus reducing the microbial population by 1.29 Log CFU/g. In addition, retardation of lipid oxidation in the patties was observed during storage for the samples packaged by the MBM-CO film, compared with the control samples. These results suggest that the MBM-CO film can be useful for enhancing the quality of beef patties during storage.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a common metabolic disease triggered by epigenetic alterations, including lysine acetylation at histone or non-histone proteins, affecting the stability or transcription of lipogenic genes. Although various natural dietary compounds have anti-lipogenic effects, their effects on the acetylation status and lipid metabolism in the liver have not been thoroughly investigated. MATERIALS/METHODS: Following oleic-palmitic acid (OPA)-induced lipid accumulation in HepG2 cells, the acetylation status of histone and non-histone proteins, HAT activity, and mRNA expression of representative lipogenic genes, including $PPAR{\gamma}$, SREBP-1c, ACLY, and FASN, were evaluated. Furthermore, correlations between lipid accumulation and HAT activity for 22 representative natural food extracts (NExs) were evaluated. RESULTS: Non-histone protein acetylation increased following OPA treatment and the acetylation of histones H3K9, H4K8, and H4K16 was accelerated, accompanied by an increase in HAT activity. OPA-induced increases in the mRNA expression of lipogenic genes were down-regulated by C-646, a p300/CBP-specific inhibitor. Finally, we detected a positive correlation between HAT activity and lipid accumulation (Pearson's correlation coefficient = 0.604) using 22 NExs. CONCLUSIONS: Our results suggest that NExs have novel applications as nutraceutical agents with HAT inhibitor activity for the prevention and treatment of NAFLD.
We have recently discovered that mycelium of Phellinus linteus, popular medical mushrooms in Korea, possess alcohol dehydrogenase and produce alcohol. In the present study, it was examined that the effect of fermented rice wine made by using mycelium of P. linteus (FLMP) on the expression of in-flammation-related proteins in both $HepG_2$ cells and rats. To examine the effect of FLMP on the morphology and expression of inflammatory proteins in $HepG_2$ cells, the cells were incubated with ethanol, and FLMP for 24 hours, and then analyzed by microscopic observation and Western blot and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). While ethanol induced the morphological change accompanied with cell debris formation and scattering on $HepG_2$ cells, FLMP had no effect. The results of Western blot and RT-PCR analyses showed that the level of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-1 and COX-2 was induced by ethanol, however, FLMP inhibited the expression of these proteins and its mRNAs. In the animal model, the value of flutamate oxaloacetate transaminase and glutamate pyruvate transaminase was significantly increased by administration with ethanol. But the group administrated with FLMP showed lower levels on the changes of these markers compared with ethanol-administrated group. Besides, the results of Western blot and RT-PCR analyses showed that the expression of inflammatory proteins such as iNOS, COX-1 and COX-2 was not affected by FLMP administration in rat liver. About histopathological and immunohistochemical observations, inflammatory loci were markedly decreased in the FLMP-administrated rat compared to ethanol-administrated rats and showed weaker COX-2 and iNOS jmmunoreactions. These results suggested that FLMP showed slight changes on the inflammatory proteins expression compared to ethanol and FLMP may be used as a functional alcoholic beverage.
In this study, we used functional genomic strategies, proteomics and quantitative real-time (qRT)-PCR, to advance our understanding of genes associated with fumonisin production in the fungus Fusarium verticillioides. Earlier studies have demonstrated that deletion of the FCC1 gene, which encodes a C-type cyclin, leads to a drastic reduction in fumonisin production and conidiation in the mutant strain (FT536). The premise of our research was that comparative analysis of F. verticillioides wild-type and FT536 proteomes will reveal putative proteins, and ultimately corresponding genes, that are important for fumonisin biosynthesis. We isolated proteins that were significantly upregulated in either the wild type or FT536 via two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis, and subsequently obtained sequences by mass spectrometry. Homologs of identified proteins, e.g., carboxypeptidase, laccase, and nitrogen metabolite repression protein, are known to have functions involved in fungal secondary metabolism and development. We also identified gene sequences corresponding to the selected proteins and investigated their transcriptional profiles via quantitative real-time (qRT)-PCR in order to identify genes that show concomitant expression patterns during fumonisin biosynthesis. These genes can be selected as targets for functional analysis to further verify their roles in $FB_1$ biosynthesis.
A chimeric gene encoding enhanced green fluorescent protein (EGFP) and a S-layer protein from Lactobacillus brevis KCTC3102, and/or two copies of the Fe-binding Z-domain, a synthetic analog of the B-domain of protein A, was constructed and expressed in Escherichia coli BL21(DE3). The S-layer fusion proteins produced in a 500-1 fermentor were likely to be stable in the range of pH 5 to 8 and $0^{\circ}C$ to $40^{\circ}C$. Their adhesive property enabled an easy and rapid immobilization of enzymes or antibodies on solid materials such as plastics, glass, sol-gel films, and intestinal epithelial cells. Owing to their affinity towards intestinal cells and immunoglobulin G, the S-layer fusion proteins enabled the adhesion of antibodies to human epithelial cells. In addition, feeding a mixture of the S-layer fusion proteins and antibodies against neonatal calf diarrhea (coronavirus, rotavirus, Escherichia coli, and Salmonella typhimurium) to Hanwoo calves resulted in 100% prevention of neonatal calf diarrhea syndrome (p<0.01), whereas feeding antibodies only resulted in 56% prevention.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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