In order to improve the functional properties of several fish meat extracts as an alternate protein source, theri basic plastein reactions were evaluated. The UV absorption at 270 and 290 nm indicated that plasteins had higher amount of hydrophobic peptide or amino acid than the fish meat extracts. The water solubilities of the extracts were reduced at acidic pH. Values for the emulsifying capacity of the extracts and plasteins were over 30% although the latter showed the higher ones than the former. The osmolalities of the extracts at 1.0% concentration were 39(loach), 33(bastard halibut), 30(jacopever) and 24(crucan carp) milliosmole. Generally the slightly higher osmolalities were noted in the plasteins to be compared with the extracts. Both the extracts and plasteins exhibited a higher antioxidative effect than tocopherol. The hydrophobic amino acid which had been introduced at plastein reaction attributed the stronger antionxidative effect of its product than the extracts.
Neuropeptide Y (NPY), a 36-amino acid polypeptide, is a member of the pancreatic polypeptide family, which consists of NPY, peptide YY (PYY) and pancreatic polypeptide (PP). The neuropeptide Y (NPY) receptors called Y receptors belongs to G-protein coupled that are involved in a variety of physiological functions such as appetite regulation, circadian rhythm and anxiety. Five receptor subtypes have been cloned in mammals (Y1, Y2, Y4, Y5, and Y6) of which four are functional. In this short review, information about the functional NYP receptors was analyzed. Sequence analyses were done between these receptors to identify the relationships between them. Phylogram was generated between these receptors to identify the close homologue between these receptors. Our sequence analyses found that Y1 and Y4 receptors are close than the other receptors. Further structure based analysis could be useful to identify subtype selective antagonists and dual antagonists targeting Y1 and Y4 receptors.
면역 유도된 천잠(Antheraea yamamai) 유충에서 cecropin-A 유전자를 분리하였고 이 유전자를 Ay-CecA로 명명하였다. 전체 Ay-CecA cDNA 크기는 419 bp로 64개의 아미노산 잔기를 인코딩하는 195 bp ORF로 구성되어 있다. 천잠 CecA 유전자는 22개 잔기의 signal peptide, 4개 잔기의 propeptide 및 항균활성을 갖는 37개 잔기로 구성된 성숙 단백질(mature protein) 영역으로 구성되고 예상 분자량은 4046.81 Da으로 산출되었다. 천잠 CecA의 아미노산 서열은 다른 나비목 곤충에서 분리된 cecropin와 매우 높은 상동성(62 ~ 78%)을 나타냈다. Ay-CecA 유전자의 C말단에 기존에 보고된 곤충의 cecropin에서와 동일하게 C말단 아미드화를 위한 glycine 잔기가 존재하고 있다. 이 펩타이드의 항균활성을 검정하기 위해서 대장균 발현 시스템을 이용하여 활성이 있는 재조합 Ay-CecA 발현에 성공하였다. 발현 기주인 대장균에 대한 재조합 CecA 독성 중화를 위해서 불용성 단백질인 ketosteroid isomerase(KSI) 유전자를 CecA 유전자와 융합하였다. 융합 CecA-KSI 단백질은 대부분 불용성 단백질로 발현되었다. 발현된 융합단백질은 Ni-NTA immobilized metal affinity chromatography(IMAC)에 의해서 정제하였으며 CNBr 반응을 통하여 재조합 CecA를 절단하여 용출하였다. 최종적으로 양이온 교환 chromatography 과정을 통하여 CecA를 순수 정제하였다. 정제된 재조합 Ay-CecA는 그람음성균인 E. cori ML 35, Klebsiella pneumonia 및 Pseudomonas aeruginosa에 대해 매우 높은 항균활성을 나타냈었다. 따라서 본 연구 결과, 높은 항균활성 지닌 CecA는 천잠의 면역 반응에서 중요한 역할을 담당할 것으로 사료된다.
Kim, Myung-Jin;Jeong, Eui-Kyong;Kwon, Eun-Young;Joo, Ji-Young;Lee, Ju-Youn;Choi, Jeomil
Journal of Periodontal and Implant Science
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제44권5호
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pp.235-241
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2014
Purpose: Regulatory T cells (Tregs), expressing CD4 and CD25 as well as Foxp3, are known to play a pivotal role in immunoregulatory function in autoimmune diseases, cancers, and graft rejection. Dendritic cells (DCs) are considered the major antigen-presenting cells (APCs) for initiating these T-cell immune responses, of which $CD103^+$ DCs are derived from precursor human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). The aim of the present study was to evaluate the capacity of these PBMC-derived $CD103^+$ DCs to promote the differentiation of antigen-specific Tregs. Methods: Monocyte-derived DCs were induced from $CD14^+$ monocytes from the PBMCs of 10 healthy subjects. Once the $CD103^+$ DCs were purified, the cell population was enriched by adding retinoic acid (RA). Peptide numbers 14 and 19 of Porphyromonas gingivalis heat shock protein 60 (HSP60) were synthesized to pulse $CD103^+$ DCs as a tool for presenting the peptide antigens to stimulate $CD3^+$ T cells that were isolated from human PBMC. Exogenous interleukin 2 was added as a coculture supplement. The antigen-specific T-cell lines established were phenotypically identified for their expression of CD4, CD25, or Foxp3. Results: When PBMCs were used as APCs, they demonstrated only a marginal capacity to stimulate peptide-specific Tregs, whereas $CD103^+$ DCs showed a potent antigen presenting capability to promote the peptide-specific Tregs, especially for peptide 14. RA enhanced the conversion of $CD103^+$ DCs, which paralleled the antigen-specific Treg-stimulating effect, though the differences failed to reach statistical significance. Conclusions: We demonstrated that $CD103^+$ DCs can promote antigen-specific Tregs from naive T cells, when used as APCs for an epitope peptide from P. gingivalis HSP60. RA was an effective reagent that induces mature DCs with the typical phenotypic expression of CD103 that demonstrated the functional capability to promote antigen-specific Tregs.
젓갈 및 자건품으로 소비량이 많은 멸치의 기능특성해석 및 기능성 조미 소재 제조의 일환으로 단백질 분해효소에 의한 멸치 육단백질 가수분해물의 peptide-nitrogen 생성량과 ACE 저해작용을 검토하였다. 소화효소와 식품공업용 단백질분해효소를 이용한 탈지 멸치육 가수분해물의 $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen 생성량은 반응 8시간을 전후로 하여 거의 일정수준에 도달하였고, ACE 저해효과 역시 높게 나타났다. 따라서, 가수분해 8시간째의 각 효소 가수분해물의 peptide-nitrogen의 함량과 ACE 저해효과를 검토한 결과, 소화효소의 경우, $\alpha$-chymotrypsin으로 가수분해시켰을 때, $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen의 생성량과 ACE 저해효과가 높은 것으로 나타났다 또한, 식품공업용 단백질분해 효소를 사용한 경우는 Alcalase 0.6L를 사용하였을 때가 $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen의 생성량 및 ACE 저해효과가 가장 우수하였고, Protamex에 의해서는 $50\%$ ethanol 가용성 peptide-nitrogen의 생성량은 적었지만, ACE 저해효과는 높게 나타났다. ACE 저해효과가 우수한 멸치육 효소 가수분해물의 $50\%$ ethanol 가용성 획분의 아미노산 조성은 대부분의 가수분해물에서 glutamic acid의 함량이 가장 많았고, 그 다음으로 aspartic acid. cysteine 및 leucine의 순이었다.
본 연구에서는 성장인자, 효소, 펩타이드 등과 같은 기능성 생체 고분자를 대상으로 열에 대한 안정성 및 피부 투과성을 향상시키는 연구를 수행하였다. 이들은 생체 내에서 세포를 활성화 하거나 촉매 작용을 담당하고 있다. 따라서 화장품 등의 외용제에 적용 시, 그 효능의 우수함이 예상되나 열에 대한 불안정성과 높은 분자량으로 피부 투과성이 낮은 단점이 있다. 이를 극복하기 위해 먼저 열에 대한 안정성을 확보할 수 있는 조성을 탐색하였다. 그 결과, 단분자 구조의 humectant 대비 PEG의 길이가 긴 polymeric humectant를 사용한 경우 열에 대한 안정성이 높아지는 것을 확인 할 수 있었다. 한편 이들의 피부 투과를 촉진시키기 위하여 투과 촉진 펩타이드를 phage library로부터 선별하고자 하였다. 투과 촉진 펩타이드는 성장인자, 효소, 펩타이드의 투과 촉진을 위해 공통적으로 사용할 수 있는 구조이다. 그러나 피부의 투과정도는 물질자체의 특성도 영향을 미칠 수 있으나 제형의 성분에 따라서 영향을 받을 수 있다. 본 연구에서는 성장인자를 안정화 할 수 있는 polymeric humectant 제형을 기반으로 투과 촉진 펩타이드 선별을 수행하였다. 그 결과 대조군 펩타이드 대비 투과촉진이 향상된 결과를 확인했을 뿐만 아니라 PBS를 기반으로 선별된 투과 촉진 펩타이드 보다 polymeric humectant 제형에서는 투과도가 우수한 것을 확인 할 수 있었다. 본 연구의 결과는 기능성 생체고분자의 열 안정성 개선 및 피부 투과도 향상에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.
In this study, angiotensin-I-converting enzyme inhibitory (ACEI) activity was evaluated in fermented goat milk fermented by lactic acid bacteria (LAB) from fermented foods and breast milk. Furthermore, the potential for ACEI peptides was identified in fermented goat milk with the highest ACEI activity. The proteolytic specificity of LAB was also evaluated. The 2% isolate was inoculated into reconstituted goat milk (11%, w/v), then incubated at 37℃ until pH 4.6 was reached. The supernatant produced by centrifugation was analyzed for ACEI activity and total peptide. Viable cell counts of LAB and titratable acidity were also evaluated after fermentation. Peptide identification was carried out using nano liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS/MS), and potential as an ACEI peptide was carried out based on a literature review. The result revealed that ACEI activity was produced in all samples (20.44%-60.33%). Fermented goat milk of Lc. lactis ssp. lactis BD17 produced the highest ACEI activity (60.33%; IC50 0.297±0.10 mg/mL) after 48 h incubation, viable cell counts >8 Log CFU/mL, and peptide content of 4.037±0.27/mL. A total of 261 peptides were released, predominantly derived from casein (93%). The proteolytic specificity of Lc. lactis ssp. lactis BD17 through cleavage on the amino acid tyrosine, leucine, glutamic acid, and proline. A total of 21 peptides were identified as ACEI peptides. This study showed that one of the isolates from fermented food, namely Lc. lactis ssp. lactis BD17, has the potential as a starter culture for the production of fermented goat milk which has functional properties as a source of antihypertensive peptides.
The health function food law has been carried into effect from January 31, 2004 just after the proposal of 'a draft of a proposed law concerning the health function foods for the promotion of a nation health' on November 29, 2000 in Korea. After enforcement of health functional food law, there have been difficult market penetration with overall stagnancy of business activities and the current of health functional food within the country divided two groups. In standardized health functional foods the present condition, nutrition supplementary products (938 items) and red ginseng products (351 items) are prevalent and total 32 products are registered containing lactobacilli (297 items), glucosamine (295 items), ginseng (182 items), yeast(136 items) so on. In 2005, five products (products containing green tea extract, soybean protein, plant sterol, fructooligo sugar and Monascus sp. products are newly notified and raw material or component of total 21 products containing xylitol, teanin extract, sardine peptide are recognized as individual authorized health functional foods. Efficacies of ginseng are studied in many-sided researches but benefits of the ginseng in the health functional food law limited to 3 items (staminaresume, immune enhancement, nourishment robustness). To enlarge functionalities of ginseng it needs raw material and ingredient approval through data application to Korea Food and Drug Administration and this procedure acts as barrier of the functional food development in the ginseng industry. It is necessary to develop the authorized health functional foods for leading health functional food market in the future.
심장이상증상의 상태에서 분비되는 심장혈관호르몬인 BNP의 혈중 농도측정은 심장기능부전환자의 진단에 유용하게 이용 되고 있다. 혈청 또는 혈장에서의 BNP 농도측정은 샌드위치형태의 면역학적 검정법을 이용할 수 있으며, 이때에 항 BNP 항체를 BNP 탐지 인자로 사용할 수 있다. 특히, 탐지 인자로의 사용을 위해서는 항원항체 반응부분을 링커로 연결하여 전체 항체에 비해서 경제적이며 효율 면에서도 뛰어난 scFv의 사용이 용이하다고 판단하였고, 이에 scFv의 취약점인 대장균에서의 불용성 형태의 발현을 최소화 시키고 기능적 발현을 극대화하여 심장질환 진단용 센서의 센서 칩 항체로 사용할 수 있도록 항 BNP scFv 항체의 발현을 대장균 세포질 내에서 유도 하였다. 대장균 세포질내에서의 scFv 제작을 위하여 항 BNP scFv 항체 유전자를 pColdⅣ 벡터와 pET22b (+)벡터에 각각 클로닝한 후 발현 하였으며, 그 결과 대량 생산의 장점이 있는 강력한 T7 promoter를 지닌 pET22b (+) 벡터를 이용하여 낮은 온도에서 단백질의 발현을 느리게 유도할 때 적절한 단백질 접힘 현상이 일어나 기능적인 scFv의 발현이 극대화됨을 확인하였다. 또한 IPTG의 투여에 있어서 그 농도가 높아지면 빠른 단백질 유전자의 전사를 도와 발현율이 증가하지만 과도한 농도의 IPTG 투여는 세포내의 독성을 일으켜 단백질의 생산을 저해할 수 있다는 결론에 도달하였으며, 연구를 통하여 개발한 항 BNP scFv 항체가 오직 BNP 항원과의 결합특이성을 가진다는 사실도 확인 가능 하였다.
콜라겐 펩타이드(collagen peptide)는 단백질의 가수 분해물로서 주름 완화, 보습력 증대, 탄력 개선 등의 특정 피부 효능을 나타낼 수 있어 화장품 혹은 피부 개선 기능식품으로서 활용되고 있다. ${\gamma}-aminobutyric$ acid (GABA)는 척추 동물의 뇌, 척수에 존재하는 신경전달 물질로서 수면의 질과 양을 개선해 준다고 알려져 있다. 본 연구에서는 콜라겐 펩타이드와 GABA의 복합물이 수면 장애가 있는 여성에게 8주 경구 섭취를 통해서 수면 및 피부 상태를 개선할 수 있는가에 관하여 확인하였다. 복합물(J85091900)은 8주간 연속적으로 섭취 시, 수면장애지수(PSQI)가 유의적으로 감소하였으며, 수면 시간을 7% 증가시켰다. 또한, 피부 거칠기, 눈가 주름 및 피부 수분량(capacitance)을 유의적으로 개선하였다. 이상의 결과에서 콜라겐과 GABA의 복합물은 복합 수면 장애에 따른 피부의 노화 현상으로부터 피부를 보호할 수 있음을 확인하여 먹는 화장품의 핵심 소재로 활용 가능함을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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