강산성 양이온 교환수지를 이용하여 설탕, 포도당이 혼존되어 있는 fructo-oligosaccharides 시럽으로부터 순수한 fructo-oligosaccharides를 분리정제하였다. 분리 조건을 최적화한 결과, 수지탑 운전온도 $80^{\circ}C$, 유속 $0.25h^{-1}$이었으며, 수지탑의 높이와 직경의 비율은 25 이상에서 효과적이었다. 최적 조건에서 4회 분리를 수행한 결과, 분리율은 66%이었으며, 제품의 순도는 96%이었다. 분리된 fructo-oligosaccharides 용액은 양이온 교환수지와 음이온 교환수지가 함께 충전된 혼상 수지탑을 이용하여 염과 색소를 동시에 제거한 후 농축하여 최종제품을 제조하였다.
Fructo-oligosaccharides are found in many plants, such as onion, burdock and wheat. They are not well hydrolyzed by digestive enzymes in animals, but are peculiarly assimilated by Bifidobacterium and some useful bacteria. In our previous experiment (Kobayashi et al., 1987) it was suggested that they were effective in decreasing energy loss in the metabolism of dairy calves. In the present study, the effects of fructo-oligosaccharides on body weight, milk-yield and milk-components (fat, protein and solids-not-fat) were investigated in dairy cows. Lactating cows were fed a standard diet containing fructoligo saccharides at 18.70g, 9.35g and 0.0g (control) per 100kg body weight, day for three weeks. Neither treatments significantly affected any of the parameters examined. The fructo-oligosaccharides were assumed to be hydrolyzed by rumen microorganisms and hardly to affect the bacterium florae in the intestines of the lactating cows.
A study was conducted to investigate cryoprotectant effect of commercially produced oligosaccharides (IMO: isomalto-oligosaccharides, FO: fructo-oligosaccharides and GO: galacto-oligosaccharides) on beef protein and to compare their effectiveness to sucrose or a mixture of sucrose and sorbitol on freezing. The optimal addition level of cryoprotectants was determined by measuring $Ca^{2+}$-ATPase activity of sample treated with different concentration (0 to 12%) after freeze-thaw cycle. Since the stabilization effect was not dramatically increased above 8% sugar concentrations, the 8% was determined as an usage level. During frozen storage (at -18$^{\circ}C$ for 12 week), commercially produced oligosaccharides showed lower cryoprotection ability than sucrose but higher than sucrose+sorbitol as measured by protein solubilities and $Ca^{2+}$-ATPase activities.
Fructosyltransferase와 glucose oxidase의 혼합효소계를 이용한 고순도 fructo-oligosaccharides 생산반응에서의 수학적 모델을 제안하고 실험적으로 검증한 결과 실험치와 모델 값이 서로 잘 일치하였다. 혼합 효소계에서 두 효소의 kinetic parameters를 구한 결과, fructosyltransferase 단일 효소계에서의 값들에 비해 $K_m$ 값들은 감소하였고, $K_m,\;V_{max}$값들은 증가하였다. 혼합 효소계의 반응메카니즘은 전체적으로 Michaelis-Menten kinetics로 표현할 수 있었고, 제안된 모델을 이용하여 고순도 fructo-oligosaccharides 생산에 이상적인 설탕농도를 예측할 수 있었다.
Polystyrene계 음이온 교환수지인 Diaion PA 412에 Aureobasidium pullulans 기원의 fructosyltransferase를 crude enzyme 상태로 고정화하여 fructo-oligosaccharides의 생산을 검토하였다. 고정화 효소의 최적 반응 pH 및 온도는 각각 pH 5.0, $55^{\circ}C$. 이었고 고정화에 의해 열안정성이 크게 증가하였다. 고정화 효소에 의한 fructo-oligosaccharids 생성의 효소 반응 경향은 free cell 및 soluble enzyme과 거의 유사하여 최종 반응산물 중의 당 조성 이 동일하였다. 고정화 효소를 repeated-batch 방법으로 운전하여 fructo-oligosaccharides 생산공정에 적용해 본 결과 $50^{\circ}C$에서 20일까지 안정성을 유지하였다.
돼지감자 괴경의 수확시기 및 저장온도에 따른 가용성당의 조성변화를 HPLC 방법으로 조사하였다. 성숙된 괴경의 가용성당은 저온충격을 받은 후 수확한 시료에서부터 급격히 변화하여 봄에 수확한 시료의 경우, 중합도가 높은 GF8이상의 inulin은 총당의 66.4%에서 25.4%로 감소한 반면, GF2부터 GF7까지의 fructo 올리고당은 28.8%에서 61%로, sucrose는 3.4%에서 13.6%로 각각 증가하였다. 이러한 자가효소에 의한 inulin의 fructo 올리고당 및 sucrose로의 전환은 저온 충격을 받지않은 괴경을 $4^{\circ}C$에서 저장할 때에도 나타나서 $25{\sim}34$일 저장으로 거의 비슷한 결과를 보였다. 이와는 달리 fructo 올리고당이 61%에 달하는 3월 수확시료를 각각 $25^{\circ}C{\sim}40^{\circ}C$에서 3일간 저장한 경우에는 fructo 올리고당은 감소하나 sucrose는 증가하며 GF8이상의 inulin도 증가하거나 일정하여 저온저장과는 달리 fructo 올리고당이 감소하고 inulin의 합성이 일어나는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 괴경내의 fructo 올리고당 함량을 최대화하기 위해서는 돼지감자괴경을 포장에서 월동시켜 3월 중순에 수확하거나 또는 저온 충격을 받지 않은 것을 저온저장하는 것이 효과적인 방법으로 보인다.
Calcium Alginate gel에 고정화된 Aureobasidium pullulans cell을 이용한 fructo-이igosaccharides 생산 반응메카니즘에 있어서 포도당, sucrose 및 fructo-oligosaccharides의 유효확산계수를 구하고, 반응메카니즘에 대한 수학적 모벨을 제안하였다. $770g/\ell$, $860g/\ell$ 의 고농도 당용액에서 이들의 유효확산계수는 $1.2-7.6\times10^{-7}\textrm{cm}^2$/s 범위로 매우 낮은 값을 보였고, 이 결과를 모댈식에서 적용하여 기질농도, bead 크기 및 첨가비율 등을 변화시키면서 실험적으로 검증해 본 결과 실험치와 모델식이 대체로 잘 일하였다.
This study was conducted to examine the effects of green tea polyphenols (GTP) and fructo-oligosaccharides (FOS) supplement on performance, counts of caecal microflora and its metabolites production. In female broiler chickens fed on semi-purified diets from 28 to 42 d of age, dietary green tea polyphenols (GTP) and fructo-oligosaccharides (FOS) significantly reduced mortality (p<0.05). Dietary GTP significantly decreased the total count of caecal microflora, each colonic population count and caecal flora metabolites contents when compared to other groups (p<0.05). Dietary FOS did not influence the total count of caecal flora but it selectively increased Bifidobacteri and Eubacteria counts (p<0.05) and decreased the count of other microflora and concentrations of caecal phenols and indole (p<0.0.5). These results suggest that GTP and FOS in semi-purified diets can decrease mortality and change the caecal colonic flora population, but GTP shows antibiotic-like effects of non-selectively decreasing all colonic flora and then metabolites, and FOS acts selectively by increasing profitable microflora and decreasing production of caecal microflora metabolites besides volatile fatty acids.
Continuous production of fructo-oligosaccharides employing a packed bed reactor charged with immobilized cells of Aureobasidium pullulans was investigated. The optimum conditions for reactor operation were a feed concentration of 860 g/l; a feed rate, expressed as superficial space velocity of $0.2\;h^{-1}$, and a temperature of $50^\circ{C}$. Under these optimum conditions, the productivity of the reactor was $180\;g/l\cdot{h}$. Initial activity was maintained for more than 100 days. The reactor was successfully scaled up to a production scale of 1000l.
HPLC를 이용하여 fructose oligomer인 fructo올리고당(GF2-GF7) 및 inulo올리고당(F2-F4)의 분리, 정량을 실시하였다. TSK-gel amide 80 column과 acetonitrile-water(65:35; v/v) 용매를 사용하여 각 표준당들을 효과적으로 분리할 수 있었으며 이들의 retention time은 분석시마다 거의 변하지않아 재현성이 있었다. 각 당의 농도에 따른 peak면적을 이용하여 표준곡선을 작성한 결과 넓은 당량의 범위에 걸쳐 결정계수가 0.9884이상의 값을 보여 본 HPLC방법에 의한 정량법이 타당한 것으로 나타났다. 또한 기울기는 비슷하나 y축 절편 값이 당마다 크게 상이하여 몇가지 표준당들을 기준으로 하여 모든 당을 일률적으로 정량하는 것은 적합하지 않으며 각 당에 대한 표준곡선을 하나씩 작성하여 정량하여야함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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