철근의 대체보강재로서 섬유보강근에 대한 적용연구가 증가하고 있으며, 단기거동에 대한 많은 연구가 진행되어 왔다. 본 연구에서는 동결융해와 알칼리 환경하에서의 바살트와 유리섬유보강근의 미세구조와 인장거동 변화를 실험적으로 평가하였다. 100회까지의 동결융해에서 5% 내외의 강도와 탄성계수 저하가 발생하였다. 20일까지의 초기 미세구조변화의 경우 알칼리용액의 온도가 낮은 경우에는 손상이 거의 발생하지 않았으나, $60^{\circ}C$에서는 20일 경과시에도 수지 용해와 섬유 손상이 관찰되었으며, 수지계면의 섬유분리가 발견되었다. 알칼리 환경에서는 $20^{\circ}C$환경에서 100일까지는 10% 내외의 강도저하 현상이 발생하였으며, 500일 노출시 최대50%의 강도 저하가 발생하는 것으로 관찰되었다. $40^{\circ}C$와 $60^{\circ}C$ 환경에서는 50일과 100일에서 급격한 강도저하가 관찰되었으며, 바살트섬유보강근의 경우에는 알칼리에서 섬유부풀음에 의한 손상으로 강도저하가 더 크게 나타났다. 따라서 블레이디드된 섬유보강근의 장기성능을 향상시키기 위해서는 내알칼리성 확보를 위한 표면처리가 필요한 것으로 분석되었다.
The objective of this study was to optimize the vitrification method of in vitro produced bovine embryos. Thus, in vitro produced embryos at 8 cell, morula and blastocyst stages were vitrified on electron microscope grids (EM grids) or in open pulled straws (OPS) with EG5.5 (5.5 M ethylene glycol, 1.0 M sucrose and 10% FBS in m-DPBS medium) freezing solution and their survival rates after thawing were compared. The embryos on EM grids or in OPS were briefly exposed to EG5.5 freezing solution and plunged directly into liquid nitrogen within 30 to 35 sec. Post-thawed embryos were serially diluted in 0.5, 0.25 and 0.125 M sucrose in m-DPBS, each for 1 min, and then cultured in CRI aa medium supplemented with 10% FBS. Embryonic survival rate was assessed as re-expanded and hatched rates of those embryos after warming. The rates of re-expansion embryos did not significantly different between EM grid (8 cell: 42.10%, morula: 66.66% and blastocyst: 77.08%) and OPS (8 cell: 47.36%, morula: 61.90% and blastocyst: 83.33%) methods. In addition, the hatched rates in EM grid (8 cell: 31.57%, morula: 57.14% and blastocyst: 72.91%) were similar to those in OPS (8 cell. 34.21%, morula: 50.00% and Blastocyst: 77.08%). Interestingly, even at the same blastocyst stage, the in vitro survival of day 7 embryos (EM grid: 79.48 and OPS: 87.18%) was higher than those of day 8 embryos (EM grid: 72.10 and OPS: 82.06%). The total cell number of blastocyst developed in vitro after vitrification was examined with Hoechst 33342 staining to compare the embryo quality among different treatment groups. The total cell number of blastocyst was not significantly different between vitrified groups (EM grid: 162.4$\pm$8.0 and OPS: 158.4$\pm$7.1) and unvitrified control (168.0$\pm$5.6). These results indicate that both vitrification containers can provide the high rate of embryo survival. Moreover, the OPS container may not need a cap to protect the container from floating after immersion in L$N_2$. Therefore, this study suggest that bovine embryos can be cryopreserved easily, effectively and successfully by vitrification method using EM grid or OPS with EG5.5 freezing solution. In the future, the Pregnancy rate would be investigated after transfer of our vitrified embryos into the appropriated recipients.
International Journal of Air-Conditioning and Refrigeration
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제14권3호
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pp.110-117
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2006
Ice adhesion or cohesion leads to the decrease of the performance of ice making system, especially to dynamic type ice thermal storage system (DISS) which mainly forms ice from the flow of an aqueous solution. The ice adhesion is influenced by various parameters associated with operating or geometric condition. In this study, the influence on an adhesion of ice to the characteristic of cooling surface and to composition of an aqueous solution was fundamentally observed by using batch type cooling device,. a beaker. Three patterns of solution in each beaker were cooled with brine. Moreover, the characteristic of cooling surface on each beaker was distinguished to coating materials. Stirring power as a degree of the ice adhesion was measured. The stirring power to cooling heat transfer rate in each beaker was compared. As a result, the lowest stirring power of 8.9 W with non-adhesion of ice, was shown in the case of the aqueous solution of EG(4) + PG(1.5) + 1,6HD(1.5). in PE coating beaker.
This study was conducted to develop a reclaimer of the vehicle disinfector to be used at livestock fm. The reclaimer was mainly consisted of ball-valves, geared motors and one-chip processor, and the purpose of the system was to prevent liquid freezing as well as decrease environmental pollution of antiseptic solution. The properly spraying pressure of the vehicle disinfector was found over 1.96 MPa at 1m of the spraying range. While certain amount of the antiseptic solution remained in the injection-pipes, the spray starting time was found not making any significant effect on the remained amount of the antiseptic solution. The amounts of the antiseptic solution remained in the injection-pipes were 50 ml and 270 ml in average, respectively with and without the use of the reclaimer. The reclaimer was the most effective when the connection of the injection-pipe and sprayer line was located below the side-injection-pipe and then connected to the injection-pipe located at the bottom of vehicles.
This study was conducted to investigate the effects of vitrification solution and developmental stage on the survival rate of vitrified-thawed human blastocyst embryos. Human blastocyst embryos were cryopreserved by vitrification using EFS and GE solution, and their survival rates were examined after thawing and further culture. EFS solution was consisted of 40% ethylene glycol, 18% Ficoll 70 and 0.3M sucrose. GE solution was consisted of 25% glycerol and 25% ethylene glycol. Embryos were exposed to EFS and GE solution by 2 steps and 3 steps, respectively, and plunged into liquid nitrogen after loading into 0.25ml plastic straws. Blastocysts were classified into 4 groups in accordance with their developmental stage: into 1) EEB, 2) MEB and 3) EdB, of blastocysts developed on day 5, and 4) 6d-Bla(the blastocysts which formed on day 6). The blastocysts at each stage were vitrified by GE solution and cryopreserved in LN2. After thawing them, we examined their survival rates, respectively. The resulted of this study were as follows: 1. The survival rate of blastocysts vitrified by GE solution was 64.4%, significantly higher than that (5.7%) vitrified by EFS solution (P<0.001). 2. When the blastocysts were vitrified by GE solution according to each developmental stage, the survival rates of EEB, MEB, EdB and 6d-Bla were 65.9%, 65.9%, 73.2% and 58.1%, respectively. In conclusion, the cryopreservation of human blastocysts by vitrification is likely to have a marked advantage in terms of cost, work and time as compared to the conventional slow freezing in IVF-ET programs.
The present study was carried out to investigate the effects of cryoprotectants, equilibration step, freezing rate, culture condition following in vitro fertilization, and age and development stage of embryo by freezing with conventional slow freezing and vitrification on survival of frozen-thawed Korean native cattle(KNC) blastocysts produced in vitro. The KNC blastocysts produced in vitro were equilibrated in 1.8M ethylene glycol or 1.4M glycerol and cooled from -6$^{\circ}C$ to -35$^{\circ}C$ at -0.3$^{\circ}C$ or -O.6$^{\circ}C$ /minute. When equilibrated in 1.8M ethylene glycol, survival rate of fiozen4hawed blastocysts was sarne in both -0. 3$^{\circ}C$ /min and -0.6$^{\circ}C$ /min cooling rate(71.4%). With the equilibration in 1.4M glycerol, survival rate was higher in -0.3$^{\circ}C$ /min(63.6%) than in -0.6$^{\circ}C$ /min cooling rate(53.8%). For vitrification of the KNC blastocysts produced in vitro, they were equilibrated in 2-step or 3-step exposure to vitrification solution(25% ethylene glycol + 25% glycerol). Survival rate was sirilar in both 2-step(45.0%) and 3-step exposure(47.4%). According to culture condition following in vitro fertilization, higher survival rate was obtained for blastocysts co-cultured with bovine oviductal epithelial cell(BOEC, 77.3%) than for those cultured with epidermal growth factor(EGF, 65.7%) or for those co-cultured with BOEG + EGF (54.8%). According to embryo age and development stage, higher survival rate was obtained for 7-day ernbryos(70.0%) than 8-day(56.8%) or 9-day(20.0%) for blastocyst stage and obtained for 8-day embryos(74.3%) than 7-day(62.5%) or 9-day(42.9%) for exponded blastocyst. In surnmary, higher survival rate of frozen4hawed KNC blastocysts produced in vitro were obtained by using ethylene glycol for cryoprotectant and -0.3$^{\circ}C$ /min for cooling rate. And higher survival rate were obtained with co-culture with BOEC for culture condition following in vitro fertilization and with 7-day blastocyst or 8-day expanded blasto cyst for embryo age and development stage.
This study was carried out to set up the ovum bank for ovum donation and to determine the best freezing method for human immature oocytes. Human immature follicular oocytes were cryopreserved by slow freezing and rapid thawing method. Immature follicular oocytes were treated by propanediol(PROH) solution by 2 and 4 step method in protocols A & B, respectively. In protocol C, immature oocytes were exposed to sucrose prior to treatment of PROH by 4 step method. We compared survival rate, maturation rate, and fertilization rate of immature oocytes among three protocols. Results were as follows. 1. Oocytes treated by the protocol C showed the highest survival rate( 70.3 %) and maturation rate(34.6%) after thawing. 2. Survival rate of oocytes treated by the protocol C was significantly higher than that of the protocol B after thawing(p<0.05). In conclusion, treatment of oocytes with sucrose prior to expose PROH was the best freezing method. Sucrose may have reduced the toxic effect of cryoprotectant to oocytes. We failed to induce fertilization of oocytes, which were treated by any protocols, by conventional insemination method, but obtained 28.8% fertilization rate by using partial zona dissection(PZD) method. This result suggests that micromanipulation(PZD) of the thawed oocytes before insemination will improve the fertilization rate.
The purpose of this study was to examine the suvival rates of cryopreserved porcine embryos collected on Day 6 (Day 0=onset of estrus) with various cryprotectants. Eighty two embryos at different stages, ranged from expanded blastocyst to hatched blastocyst, were allocated to 6 experimental groups in different combinations of cryoprotectants glycerol, egg yolk and/or trehalose. Porcine embryos were cryopreserved using conventinal slow freezing precedures. The embryos were equilibrated with one of the freezing solutions, cooled from 25 to -7$^{\circ}C$ at 1$^{\circ}C$/min, seeded at -7$^{\circ}C$ frozen to -36$^{\circ}C$ at 0.5$^{\circ}C$/min, and then plunged into liquid nitrogen. The frozen embryos were thawed by immersion in 37$^{\circ}C$ water and the cryoprotectants were removed by dilution with 0.5M sucrose solution. Embryonic survival was estimated from the normal development of embryos for 12, 24 and 48hrs culture. Then the embryos were stained and their cell nuclei was counted. The survival rates of morphological embryos were significantly higher in group I (10% glycerol) or group IV (10% glycerol+10% egg yolk+0.5M trehalose) than those in other groups, although the nuclei number was quite higher in embryos treated with 10% glycerol and 0.25M trehalose at expended blastocyst. However, hatched blastocysts showed higher viability and nuclei number treated with either egg york or trehalose, but the survival rates after 48hrs of culture were quite low. These results indicate that egg yolk and trehalos as a supplement to freezing solutions can be useful to the cryopreservation ofn porcine embryos.
본 연구에서는 PVC 오수받이를 대상으로 상용 프로그램인 FEM LAB(ver. 3.2)을 이용하여 여러 시공 환경조건에서 오수받이 내부에 설치된 악취방지용 Z형 트랩 내부에 잔류하고 있는 물의 겨울철 동결여부를 평가하였다. 시뮬레이션 결과 외부온도 $-20^{\circ}C$가 42일간 지속되더라도 토양이 건조한 상태라면 Z형 트랩에 남아 있는 물이 동결되지 않음을 알 수 있다. 토양이 습윤 상태일 경우 약 14일 정도, 토양이 일반상태의 경우 약 17일 정도가 지나면 Z형 트랩이 위치한 지면으로부터 60cm 지점이 Z형 트랩 내에 동결될 가능성이 있으나, 토양이 건조한 상태에 있을 경우에는 42일이 지나도 지면으로부터 60cm 지점은 영상의 온도를 유지하는 것으로 보아 Z형 트랩 내에 있는 물이 동결되지 않는다는 것을 알 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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