Lactic acid bacteria (LAB) are widely used for various food fermentation. With the recent advances in modern biotechnology, a variety of bio-products with the high economic values have been produced using microorganisms. For molecular cloning and expression studies on the gene of interest, E. coli has been widely used mainly because vector systems are fully developed. Most plasmid vectors currently used for E, coli carry antibiotic-resistant markers. As it is generally believed that the antibiotic resistance markers are potentially transferred to other bacteria, application of the plasmid vectors carrying antibiotic resistance genes as selection markers should be avoided, especially for human consump-tion. By contrast, as LAB have some desirable traits such that the they are GRAS(generally recognized as safe), able to secrete gene products out of cell, and their low protease activities, they are regarded as an ideal organism for the genetic manipulation, including cloning and expression of homologous and heterologous genes. However, the vec-tor systems established for LAB are stil insufficient to over-produce gene products, stably, limiting the use of these organisms for industrial applications. For a past decade, the two popular plasmid vectors, pAM$\beta$1 of Streptococcus faecalis and pGK12 theB. subtilis-E. coli shuttle vector derived from pWV01 of Lactococcus lactis ssp. cremoris wg 2, were most widely used to construct efficient chimeric vectors to be stably maintained in many industrial strains of LAB. Currently, non-antibiotic markers such as nisin resistance($Nis^{r}$ ) are explored for selecting recombi-nant clone. In addition, a gene encoding S-layer protein, slp/A, on bacterial cell wall was successfully recombined with the proper LAB vectors LAB vectors for excretion of the heterologous gene product from LAB Many food-grade host vec-tor systems were successfully developed, which allowed stable integration of multiple plasmid copies in the vec-mosome of LAB. More recently, an integration vector system based on the site-specific integration apparatus of temperate lactococcal bacteriophage, containing the integrase gene(int) and phage attachment site(attP), was pub-lished. In conclusion, when various vector system, which are maintain stably and expressed strongly in LAB, are developed, lost of such food products as enzymes, pharmaceuticals, bioactive food ingredients for human consump-tion would be produced at a full scale in LAB.
Moon, Ji Eun;Heo, Wan;Lee, Sang Hoon;Lee, Suk Hee;Lee, Hong Gu;Lee, Jin Hyup;Kim, Young Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권1호
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pp.54-61
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2020
Saccharomyces boulardii is the only probiotic yeast with US Food and Drug Administration approval. It is routinely used to prevent or treat acute diarrhea and other gastrointestinal disorders, including the antibiotic-associated diarrhea caused by Clostridium difficile infections. The formation of reactive oxygen species (ROS), specifically H2O2 during normal aerobic metabolism, contributes to programmed cell death and represents a risk to the viability of the probiotic microbe. Moreover, a loss of viability reduces the efficacy of the probiotic treatment. Therefore, inhibiting the accumulation of ROS in the oxidant environment could improve the viability of the probiotic yeast and lead to more efficacious treatment. Here, we provide evidence that supplementation with a non-reducing disaccharide, namely trehalose, enhanced the viability of S. boulardii exposed to an oxidative environment by preventing metacaspase YCA1-mediated programmed cell death through inhibition of intracellular ROS production. Our results suggest that supplementation with S. boulardii together with trehalose could increase the viability of the organism, and thus improve its effectiveness as a probiotic and as a treatment for acute diarrhea and other gastrointestinal disorders.
본 연구에서는 대표적인 즉석섭취식품 5종(김밥, 초밥, 회, 샐러드, 샌드위치)에 대한 미생물 모니터링 검사를 실시하여, 이들 제품에 대한 위생 안전성 확보를 위한 기초자료를 제공하기 위해 진행되었다. 이를 위해 전국의 대형 백화점, 할인점, 슈퍼 등지에서 판매되는 즉석섭취식품 5종, 총 440품목을 수거하여 위생지표세균 검사 및 식중독균 검사를 실시하였다. 제품별로는 초밥이 20.4%로 가장 높은 미생물 검출율을 보였으며, 그 다음으로 13.3%의 김밥, 12.5%의 회, 6.9%의 샐러드, 2.8%의 샌드위치의 순서로 나타났다. 검출된 미생물을 살펴보면 황색포도상구균이 6.6%로 가장 많이 검출되었으며, 다음은 2.7%의 대장균군, 2.3%의 리스테리아균, 0.7%의 바실러스 세레우스균, 0.5%의 대장균 순서로 검출되었으며, 장염비브리오균과 살모넬라균은 검출되지 않았다. 검출된 황색포도상구균의 정량분석 결과는 전체적으로 $200{\sim}5,500\;cfu/g$의 분포를 보였으며, 평균적으로는 600 cfu/g을 나타내었다.
In this study, phytoestrogen for the industrial production of soybean probiotics by lactic acid bacteria (LAB) was studied in a soybean extract. Soybean was fermented with LAB, Lactobacillus plantarum KCTC 3108 and Bifidobacterum longum ATCC 15707. The change in the content of various isoflavones (aglycone and glucoside) and the $\beta$-glucosidase activity in soybean during fermentation were investigated and shown to be dependent on the starter organism. Soybean extract powder fermented with L. plantarum showed the highest $\beta$-glucosidase activity and the greatest increase in the aglycone content. After 48h of fermentation, the contents of daidzin, genistin and glycitin in L. plantarum decreased from a mean initial levels of $83.03{\pm}2.17$, $168.13{\pm}8.17$ and $20.02{\pm}1.07$, respectively, to mean levels of $5.34{\pm}3.24$, $3.79{\pm}0.57$ and $1.87{\pm}1.09\;mg$/100 g. Whereas, after 48h fermentation, the contents of daidzein, genistein and glycitein increased from a mean initial levels of $8.09{\pm}0.78$, $11.20{\pm}0.84$ and $4.71{\pm}0.46$, respectively, to mean levels of $85.76{\pm}0.84$, $175.87{\pm}2.21$ and $22.41{\pm}0.91\;mg$/100 g. Taken together, these results suggested an increase of aglycones and decrease of glucoside in isoflavones occurred during fermentation, which coincided with an increase of $\beta$-glucosidase activity in the fermented soybean extract powder.
본 연구는 넙치 (Paralichthys olivaceus) 자어에 대한 요각류 Paracyclopina nana의 먹이가치를 평가하기 위해 두섭식 단계 (rotifer 섭식 단계와 Artemia 섭식 단계)로 나누어 각각 12일 및 16일 동안 수행되었다. Rotifer 섭식 단계 실험에서, 넙치 자어의 생존과 성장은 부화 12일째 rotifer만 공급했을 때 보다 P. nana (nauplii) 단독으로 공급했을 때 더 높게 나타났다. Arteima 섭식단계 실험에서, 부화 30일째 넙치자어의 성장은 P. nana (C4-adult) 단독 공급실험구와 혼합공급(P. nana+Artemia) 실험구가 다른 실험구에 비해 높게 나타났으나 넙치 자어의 생존은 모든 실험구가 유의적인 차이를 보이지 않았다. P. nana nauplius와 성체(C4-adult)의 n-3 HUFA 함량은 각각 4.0%와 5.4%였다. 결과적으로, 기수산 요각류 P. nana는 해수어 종묘생산을 위한 초기생먹이로 효과적인 것으로 판단된다.
열수(Hot water)를 이용 조제분유 및 선식 준비 시 살균효과를 실험한 결과 $60^{\circ}C$ 이상에서 살균 효과를 나타내었으나 조제분유와 선식에 열수를 가하였을 때 발생하는 온도 저하와 조제분유 및 선식 등의 분말 식품에서 biofilm을 생산하여 내열성이 증가되는 E. sakazakii의 특성을 고려하여 $70^{\circ}C$ 이상의 열수로 조제분유 및 선식 등을 용해하여야 할 것으로 판단된다. 마이크로웨이브를 이용 E. sakazakii의 살균 효과를 실험한 결과 E. sakazakii를 제어하기 위하여 100 mL의 경우 90초 이상 가열하거나 온도측정이 곤란한 경우에는 최초 끓는 시점까지 가열한 후 냉각하여 섭취하여야할 것으로 조사되었다. 용해된 조제분유 및 선식의 저장 안정성을 평가하기 위해 $5{\sim}35^{\circ}C$에 48시간 동안 보관하며 E. sakazakii의 성장곡선을 실험한 결과 $5^{\circ}C$, $10^{\circ}C$ 냉장온도에서는 48시간까지 증식이 미약하였다. 그러나 냉장 온도에서 사멸하지 않고 미약하게 증식하는 E. sakazakii의 특성을 고려하여 조제분유 및 선식의 냉장 보관은 24시간 이내로 제한하여 섭취하여야 할 것으로 판단된다.
최근 국내에서는 Escherichia coli O157:H7, Listeria monocytogenes등의 미생물에 대한 건강위해성이 강조되면서 미생물 위해성평가에 대한 필요성이 제기되고 있고, U.S.FPA, U.S.DA, FAO/WHO를 비롯한 국제기구 및 외국 유관기관들에서도 미생물 위해성평가 방법을 식품관리에 활용하고자 방법론 연구에 주력하고 있다. 미생물 위험성은 화학물질과 달리 인체건강에 대한 영향이 즉각적이고, 심각하게 나타나 정량적인 위해성평가가 용이하지 않고 유해화학물질과는 다른 평가방법이 요구된다. 식품중 미생물의 위해성평가는 크게 4단계로 구분되는데, 미생물관련질환 추세파악 및 미생물 관련질병에 관한 역학조사 등을 활용하는 위험성확인 단계와 실제 식품원료, 식품가공, 수송, 포장단계 중 식품의 물리적, 화학적 조건에 따른 미생물 변화를 고려하여 식품중 미생물에 대한 노출을 정량화하는 노출평가 단계, 미생물의 용량에 따른 질병발생에 근거하여 용량-반응관계를 규명하는 용량-반응평가 단계, 규명된 모델을 활용하여 모든 평가결과를 통합함으로 위해 도치 예측과 불확실성 분석 등을 수행하는 위해도결정단계로 구성되어 있다. 미생물 용량-반응평가는 크게 비역치(Nonthreshold)와 역치(Threshold) 평가 방법론으로 구분되는데, 비역치 평가방법론은 단일 병원균이 감염을 일으킬 수 있다는 것과 감염을 일으킬 수 있는 확률이 독립적이라는 가정을 전제로 하고, 역치평가방법론은 미생물이 감염을 일으키기 위해서 각기 개별 역치가 존재하는데 어느 정도의 미생물수가 모여 서로 작용해야 독성유발물질을 만들어 낸다는 가정을 전제로 한다. 현재 받아들여지고 있는 비역치 모델로는 Exponential, Beta-poisson, Gompertz, Gamma-weibull 모델 등이 있으며, 역치모델로는 Log-normal, Log-logistic모델 등이 있다. 본 연구에서는 인체 volunteer자료를 활용하여 용량-반응자료를 입력하고 용량-반응자료를 토대로 적합한 수학적 모델을 찾아내어, 선별한 모델의 적합도 검정을 실시하는 방법론 연구를 실시하였으며, 노출평가 자료와 용량-반응평가 결과를 연계하여 위해도를 결정하는 과정에 대해 연구하였다 이 밖에도 모델(Food MicroModel)을 이용하여 식품의 염도, 수분활성도, 온도, pH등의 조건에 따른 미생물의 성장률, 사멸률 등 변화를 예측할 수 있는 방법론 연구를 통해 식품의 최적 보관 조건등을 찾아내는 방법을 습득하였다. 미생물 위해성평가는 외국에서도 아직 초기 연구단계에 있으며 현재로서 사후조사자료인 역학자료보다 건강한 성인남자를 대상으로 한 volunteer 자료를 우선적으로 활용하고 있으나 노약자나 민감그룹에 대한 실험은 현실적으로 불가능하여 동물실험을 이용한 평가방법을 연구중에 있다. 추후 연구방향으로는 국내 volunteer들을 대상으로 한 미생물별 용량-반응결과를 토대로 population sensitivity를 비교할 수 있는 기초자료를 확보함으로써 미생물에 대한 인구집단의 반응 민감성 차이를 비교하고 시료채취 후 즉각적인 실험실적 분석이 가능토록하여 정확한 인체노출평가를 수행함으로써 미생물 위해성평가방법론을 식품미생물관리에 적용하는 것이다.
The problems caused by new biological organisms in Ogasawara Island of Japan include : (1) loss of native species' habitats and extinction of native species due to the multiplication of invasive species; (2) reduction of native species and confusion in the food chain in result of invasive species' predation; (3) confusion in genes due to hybridization of new and native plants; and (4) destruction of ecosystem and erosion of earth due to rapid increase of invasive species. The natural ecosystem of preserved areas in Korea is constantly confused and destroyed by new animals and plants, but Korea does not has any solutions because new animals and plants rarely affect human lives. Invasive species are manually introduced by humans and are considered disasters caused by humans. Korea is in desperate need of campaigns as the general public does not understand the seriousness of the destruction and confusion of natural ecosystem caused by new biological organisms and their indirect/direct influences on humans. It is necessary to evaluate the biological characteristics, ecological influence, and harms of invasive species in preserved areas to establish a system to manage invasive species and plan the priority removal of species that are highly harmful and locally distributed. Manual removal and suppression of new biological organisms that cause problems is effective, but it takes cost, effort, and time. Therefore, we would need to research and develop the most efficient and effective techniques and measures to manage invasive species in our ecosystem.
Ordinary heterotrophic organism (OHO) active biomass plays key roles in biological wastewater treatment processes. However, due to the lack of measurement techniques, the OHO active biomass exists hypothetically within the design and simulation of biological wastewater treatment processes. This research was purposed to develop a quick and easy quantifying technique for the OHO active biomass applying a modified batch aerobic growth test. Two nitrification-denitrification activated sludge systems, with 10- and 20-day sludge ages, were operated to provide well-cultured mixed liquor to the batch tests. A steady state design model was firstly applied to quantify the "theoretical" OHO active biomass concentration of the two parent systems. The mixed liquor from the parent systems was then inoculated to a batch growth test and a batch digestion test to estimate the "measured" OHO active biomass concentration in the mixed liquor. The measured OHO active biomass concentrations with the batch growth test and the batch digestion test were compared to the theoretical concentrations of the parent system. The measured concentrations with the batch growth test were generally smaller than the theoretical concentrations. However, the measured concentrations with the batch aerobic digestion tests showed a good correlation to the theoretical concentrations. Thus, a different microbial growth condition (i.e., a higher food/biomass ratio) in the batch growth test, compared to the parent system or the batch digestion test, was found to cause underestimation of the OHO active biomass concentrations.
Sixteen polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) were analyzed in seventy marine organisms (40 species) from the Korean coast. PAHs were present in all the organisms. The level of total PAHs in the organisms varied from 0.45 to 224 ng/g dry weight and the carcinogenic PAHs varied from 0.05 to 49.8 ng/g dry weight. The PAHs residues according to the marine organisms showed a highest content in bivalve species, and followed by crustaceans, cephalopods, fish and gastropods. Human dietary intake of total PAHs through marine organism in Korea was estimated to be 4.12 ng/kg body weight/day and 0.67 ng/kg body weight/day for carcinogenic PAHs. The relative contributions of individual species to the total dietary intake of PAHs were in the order of bivalves $(53.4{\%})$, fish $(21.9{\%})$, crustaceans $(15.3{\%})$, cephalopods $(8.8{\%})$ and gastropods $(0.6{\%})$. Daily dietary intake of $PAH_{TEQ}$ expressed as a TEQ value was estimated to be 0.13 pg TEQ/kg body weight/day, which did not exceed a tolerable daily intake (TDI) proposed by the KFDA and the WHO as well as the UK toxicity committee. Lifetime cancer risk due to ingestion of marine species by the Korean adult was evaluated using the equation estimating exposure of food ingestion. Although approximately $23{\%}$ of cumulative frequency of the sampled marine species exceeded the cancer risk guideline, lifetime cancer risk associated with marine organism consumption was negligible. Results indicate that dietary intake of PAHs through the consumption of the Korean marine organisms seems to be safe for human ingestion with negligible cancer risk.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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