The aim of the study was to determine the effects of Ixeris dentata extract (IDE) on anticancer activity in human breast cancer MDA-MB-231 cells at both cellular and molecular levels. The cells were cultured in the presence of 0, 20, 30 and $40{\mu}g/mL$ Ixeris dentata extract for 24 hours, respectively. At the end of culture, cytochemical analyses for MTT activity, trypan blue dye exclusion, Annexin V-FITC Apoptosis, and radical oxygen species (ROS) were conducted. RT-PCR was also performed to determine whether or not alterations in cell viability affect the Bax/Bcl-2 ratio. MTT assay showed that relative cell viability decreased in a dose-dependent manner (p<0.05). Reduction of cell viability matched well with increased cell membrane permeability as determined by trypan blue dye exclusion test (p<0.05). The rates of intracellular ROS also increased in a similar manner to those of TB-stained cells. There was an associated shift of apoptotic cells from early to late apoptosis between the 30 and $40{\mu}g/mL$. Bax/Bcl-2 ratio significantly increased along with significant decreases in Bcl-2 expression between 30 and $40{\mu}g/mL$ groups (p<0.05). In conclusion, anticancer activity of Ixeris dentata extract is modulated by a reduction in cell viability along with increased membrane permeability, leading to ROS accumulation within cells, and subsequently cell death through an apoptotic pathway that involves Bax and Bcl-2 in human breast cancer MDA-MB-231 cells.
The amino acid compositions of polished barley grain were investigated for 16 varieties by using amino acid autoanalyzer and simple correlation analysis between them and between protein and amino acid per protein was done. 1) Limiting amino acid is lysine, leucine and phenylalanine are high but threonine and tyrosine are low. Total essential amino acids is high. 2) Protein is significantly correlated negatively with lysine arginine, total basic amino acids (at p=0.01) and threonine, alanine, aspartic acid (at p=0.05) and positively with phenylalanine (at p=0.01) proline and cystine (at p=0.05). 3) Lysine is positively and significantly correlated with arginine and aspartic acid indicating that aspartic acid is probable precursor of lysine and that high yielding varieties or fertilization for high yielding decrease aspartic acid pool resulting low lysine. 4) Lysine content is positively correlated with dye binding capacity (at p=0.01). 5) Tryptophan is positively (at p=0.01) and significantly correlated with histidine, total basic amino acids and arginine. 6) In essential amino acids lysine, tryptophan, threonine and valine simultaneously increase or decrease while aromatic amino acids, sulfur contained amino acids, isoleucine and leucine do so together.
High voltage pulsed electric fields (PEF) treatment is one of the more promising nonthermal technologies to fully or partially replace thermal processing. The objective of this research was to investigate the microbial inactivation mechanisms of PEF treatment in terms of intra- and extracellular changes in the cells. Saccharomyces cerevisae cells treated with PEF showed cellular membrane damage. This resulted in the leakage of UV-absorbing materials and intracelluar ions, which increased with increasing treatment time and electric fields strength. This indicates that PEF treatment causes cell death via membrane damage and physical rupture of cell walls. We further confirmed this by Phloxine B staining, a dye that accumulates in dead cells. Using scanning and transmission electron microscopy, we observed morphological changes as well as disrupted cytoplasmic membranes in PEF treated S. cerevisae cells. In addition, PEF treatment led to damaged chromosomal DNA in S. cerevisiae.
Reactive oxygen species can be generated in the skin by hair dyeing. The aim of this study was to find out the effects of the oxidative-type hair dye application in young women on the antioxidant systems. We investigated the lipid peroxide levels, glutathione (GSH) levels, and the antioxidant enzyme activities including superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSHPx) in plasma and erythrocytes and catalase (CAT) in erythrocytes, and DNA damages in lymphocytes. Also, plasma concentrations of antioxidant vitamins, vitamin A and E, were measured and the correlations between various antioxidant parameters and oxidative damages were evaluated The antioxidant enzyme activities in plasma (GSHPx) and in erythrocytes (SOD and CAT) were decreased significantly after hair dyeing. 1be lipid peroxide and GSH levels were not affected in both plasma and erythrocytes. No significant difference was found in the concentrations of both vitamin A and E between before and after hair dyeing. However, DNA damages expressed as the tail extent moment (TEM) and tail length (TL) were significantly (p<0.001) increased. The plasma vitamin E concentration was correlated with DNA damages (TEM: r=-0.590, p<0.01 and TL: r=-0.533. p<0.01) and RBC SOD activity (r=0.570, p<0.05). In turn, RBC SOD activity was significantly correlated with both plasma MDA levels (r=-0.412, p<0.05) and DNA damages (TM: r=-0.546, p<0.01, TL: r=-0.493, p<0.01). Our results demonstrated that the exposure to hair dyeing produced lymphocyte DNA damage and modification of the antioxidant enzyme activities. Also, there were very strong associations between plasma vitamin E concentration, RBC SOD activity and DNA damage induced by hair dyeing. It suggests that the antioxidant status of a subject is likely to be related to the extent of the harmful effects caused by hair dyeing.
Bifidobacteria have been previously shown to stimulate the immune functions and cytokine production in macrophages and T-lymphocytes. Accordingly, the RAW 264.7 murine macrophage cell line was used to assess the effects of Bifidobacterium on the proliferation and cytoskeleton reorganization of the cells. Cytokine production after exposure to Bifidobacterium was also monitored in both whole cells and cell-free extracts. When RAW 264.7 cells were cultured for 24 h in the presence of heat-killed Bifidobacterium bifidum BGN4, the proliferation of macrophages was slowed down in a dose-dependent manner and cell differentiation was observed by staining with the actin-specific fluorescent dye, rhodamin-conjugated phalloidin. Although EL-4 cells, a T-cell line, stimulated RAW 264.7 cells to produce TNF-${\alpha}$ and IL-6, the stimulatory activity of B. bifidum BGN4 decreased as the EL-4 cell number increased. When disrupted and fractionated BGN4 was used, the whole cell fraction was more effective than the other fractions for the TNF-${\alpha}$ production. In contrast, the cell-free extract exhibited the highest IL-6 production level among the fractions, which was evident even at a $1{\mu}g/ml$ concentration. The current results demonstrate that Bifidobacterium induced differentiation of the macrophages from the fast proliferative stage and that the cytokine production was differentially induced by the whole cells and cell-free extracts. The in vitro approaches employed herein are expected to be useful in further characterization of the effects of bifidobacteria with regards to gastrointestinal and systemic immunity.
The aerial part of Artemisia iwayomogi Kitamura has traditionally been used for inflammation, infectious disease, cancer, pyretic, diuretic, liver protective effect, and choleretic purposes in Korea. We investigated that the essential oil induces apoptosis in KB cell as evidenced by Hoechst-33258 dye staining, flow cytometry (cell cycles), and DNA fragmentation for nuclear condensation and Western blotting for activation of caspases-3, -8, -9, Bax, Bcl-2, cytochrome c, and poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) cleavage. In the present study, we found that the essential oil could induce apoptosis in KB cells, as characterized by DNA fragmentation, activation of caspase-3, -8, and -9, and PARP cleavage. The efficacious induction of apoptosis was observed as a dose-dependent. The essential oil-induced apoptotic cell death was accompanied by up-regulation of Bax and down-regulation of Bcl-2. The essential oil also caused the loss of mitochondrial membrane potential and cytochrome c release from mitochondria to cytosol. These findings indicate that mitochondrial pathways might be involved in the essential oil-induced apoptosis and enhance our understanding of the anticancer function of the essential oil in herbal medicine.
A Citrobacter sp. MB 2, azo dyes decolorizing bacterium, was isolated from the wastewater and soil and identified as Citrobacter sp.. It was examined that optimum conditions for culture media were 0.5% of sucrose, 1.0% of yeast extract, 0.1% of $K_2HPO_4$, 0.1% of $NaHCO_3$ per distilled water. The best efficient condition of culture was obtained at pH 7.0, $30^{\circ}C$ and aerobic shaking culture. The number of Citrobacter sp. MB2 in optimum medium was increased more than 7 fold compared to basal medium and 50 fold compared to nutrient broth. This strain was exhibited strong resistance against metal salts and antibiotics (ampicillin and penicillin G).
The neuroprotective effect of methanolic extracts from Dendrobium nobile Lindl. (DME) against $H_{2}O_{2}$-induced neurotoxicity in PC12 cells was investigated. The treatment of PC12 cells with various DME concentrations under $H_{2}O_{2}$ resulted in the induction of protective effect in a dose-dependent manner, as determined by the results of an MTT reduction assay, an LDH release assays, and a morphological assay. Interestingly, we also detected reduction of apoptotic bodies and inhibition of caspase-3 activity by DME in $H_{2}O_{2}$-indeced PC12 cells. These data show that the neuroprotective effect of DME against PC12 cells might be related to the suppression of caspase-3 activation. Therefore, these results suggest that DME could be a new potential candidate as chemotherapeutic agents against neuronal diseases.
Kim, Ji-Young;Jeong, Jung-Eun;Moon, Suk-Hee;Park, Kun-Young
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.8
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pp.1126-1131
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2010
The antiobesity effect of soymilks fermented with Bacillus subtilis KC-3 (KCCM 42923) from cheonggukjang was compared with other sources of B. subtilis KCCM 11316 and B. subtilis MYCO. The antiobesity effect was investigated by measuring the release of leptin, Oil red O staining, glycerol secretions and adipogenic transcription factor by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) in the 3T3-L1 adipocytes. Fermented soymilk with B. subtilis KC-3 (F-KC) led to decrease levels of leptin secretion and increase levels of glycerol secretion in the cells. In addition, F-KC reduced contents of Oil red O dye in the 3T3-L1 adipocytes. Also, mRNA expression levels of both SREBP-1c (sterol regulatory element-binding protein 1-c) and PPAR-$\gamma$ (peroxisome proliferator-activated receptor-$\gamma$), which are adipogenic transcription factor, in cells treated with F-KC were markedly down regulated. These results demonstrate that the Bacillus subtillis fermented soymilk (F-KC) decreased lipid content in 3T3-L1 adipocytes by inhibiting lipogenesis. All B. subtilis fermented soymilks had shown antiobesity activities, however, F-KC exhibited the strongest antiobesity effect in the 3T3-L1 adipocytes. Our study suggests that especially F-KC increased the potential of antiobesity effects.
Hong Byeong Il;Jung Byung Chun;Son Byung Yil;Jung Woo Jin;Ruck Ji Hee;Choi Byeong Dae;Lee Kang-Ho
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.35
no.6
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pp.671-675
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2002
The present study was conducted to elucidate functional properties of sulfated polysaccharides from ascidian tunics, In physical properties of the crude polysaccharides, emulsion ability and foaminess were more excellent compared with chitin and chitosan, particular dye binding capacity was prominent. Anti-blood coagulation of partially purified sulfnted polysaccharides showed with respect to APTT (Activated partial thromboplastin time). Especially, active fraction $(F_4)$ obtained by DEAE-cellulose ion exchange chromatography showed highest activity, which was approximately $20\%$ of the activity of heparin. ACE inhibitory activity also similar to anticoagulant activity. Active fraction $(F_4)$ obtained by DEAE-cellulose ion exchange chromatography showed about $34\%$, in ACE inhibitory activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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