Fecal contaminations on poultry carcasses, not easily discemable by human eyes, are potential harbor sites of pathogenic Escherichia Coli (E. coli O157:H7). Development of sensitive detection methods for fecal contamination is essential to ensure safe production of poultry products. Fluorescence has been shown to be very sensitive in detecting fecal and other biological substances that can harbor pathogens. In this study, fluorescence excitation-emission spectra of poultry fecal matter were compared with spectra for poultry skin and meat. Results indicated that the combinations of fluorescence intensities at the wavelength of 520 nm, 579 nm, 625 nm, and 635 nm with 411 nm excitation showed above 97% accuracy for differentiation of the contaminants from poultry tissues. Excitation and emission bands determined could be used for constructing a real-time fluorescence imaging device for detection of harmful residues on poultry carcasses.
This study aims at designing and evaluating light source devices that can stably generate light with various wavelengths in order to make possible PDD using a photosensitizer and diagnosis using auto-fluorescence. The light source was a Xenon lamp and filter wheel, composed of an optical output control through Iris and filters with several wavelength bands. It also makes the inducement of auto-fluorescence possible because it is designed to generate a wavelength band of 380-420nm, 430-480nm, and 480-560nm. The transmission part of the light source was developed to enhance the efficiency of light transmission. To evaluate this light source, the characteristics of light output and wavelength band were verified. To validate the capability of this device as PDD, the detection of auto-fluorescence using mouse models was performed.
Molecular imaging is a powerful method for tracking various infectious disease-causing pathogens in host organisms. Currently, a dual molecular imaging method that can provide temporal and spatial information on infected hosts at the organism, organ, tissue, and cellular levels simultaneously has not been reported for Burkholderia pseudomallei, a high-risk pathogen that causes melioidosis. In this study, we have established an experimental method that provides spatiotemporal information on infected hosts using luminescent and fluorescent dual-labeled B. pseudomallei. Using this method, we visualized B. pseudomallei infection at the organism, organ, and tissue levels in a BALB/c mouse model by detecting its luminescence and fluorescence. The infection of B. pseudomallei at the cellular level was also visualized by its emitted fluorescence in infected macrophage cells. This method could be an extremely useful and applicable tool to study the pathogenesis of B. pseudomallei-related infectious diseases.
Yoo, Sung Young;Park, So Hyun;Lee, Min Ju;Park, Jong Yong;Kang, Hong Gyu;Kang, Sung Ku;Kim, Tae Wan
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.34
no.3
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pp.210-216
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2015
BACKGROUND: In korea, sweet persimmon(Diospyros kaki) cultivation is front to abiotic stresses such as frost damage at fruit maturing stage. The cold and rapid freezing stresses are most damaging to fruit production which is most actively progressed in late fall. This study was performed to evaluate the validity of chlorophyll fluorescence imaging(CFI) technology to determine the degree of frost damage in sweet persimmon fruits. METHODS AND RESULTS: The sweet persimmon fruits were measured separately for each treatment(15, 30, 60 minutes) at 24 hours after treatment(HAT) rapid freezing. A CFI FluorCam (FC 1000-H, PSI, Czech Republic) was used to measure the fluorescence images of the fruits. In rapid freezing for 15 minutes, photochemical parameters were not changed. However, in rapid freezing for 30 and 60 minutes, photochemical parameters were lowered. Especially, $F_m$, $F_v$, $F_v/F_m$ and ${\Phi}PSII$ values were declined under rapid freezing. CONCLUSION: In our study, it was clearly indicated that the rapid freezing could be a stress in sweet persimmon fruits. The CFI analysis and its related parameters are applicable as a rapid assessing technique for the determination of frost damage.
Purpose: Hydrodynamic-based procedure is a simple and effective gene delivery method to lead a high gene expression in liver tissue. Non-invasive imaging reporter gene system has been used widely with herpes simplex virus type 1 thymidine kinase (HSV1-tk) and its various substrates. In the present study, we investigated to image the expression of HSV1-tk gene with 5-(2-iodovinyD-2'-deoxyuridine (IVDU) in mouse liver by the hydrodynamicbased procedure. Materials and Methods: HSV1-tk or enhanced green fluorescence protein (EGFP) encoded plasmid DNA was transferred into the mouse liver by hydrodynaminc injection. At 24 h post-injection, RT-PCR, biodistribution, fluorescence imaging, nuclear imaging and digital wholebody autoradiography (DWBA) were performed to confirm transferred gene expression. Results: In RT-PCR assay using mRNA from the mouse liver, specific bands of HSV1-tk and EGFP gene were observed in HSV1-tk and EGFP expressing plasmid injected mouse, respectively. Higher uptake of radiolabeled IVDU was exhibited in liver of HSV1-tk gene transferred mouse by biodistribution study. In fluorescence imaging, the liver showed specific fluorescence signal in EGFP gene transferred mouse. Gamma-camera image and DWBA results showed that radiolabeled IVDU was accumulated in the liver of HSV1-tk gene transferred mouse. Conclusion: In this study, hydrodynamic-based procedure was effective in liver-specific gene delivery and it could be quantified with molecular imaging methods. Therefore, co-expression of HSV1-tk reporter gene and target gene by hydrodynamic-based procedure is expected to be a useful method for the evaluation of the target gene expression level with radiolabeled IVDU.
We demonstrate that high-resolution (~60 nm) near-field fluorescence images of fluorescent nanospheres can be obtained by utilizing the tip-induced fluorescence quenching process. A time-stamped photon counting (TSPC) technique employed enables us to efficiently measure the degree of fluorescence quenching caused by the dielectric or metallic atomic force microscopy tip. We find that the degree of quenching is not only determined by the tip-material but also by the local morphology of the tip. The fringe patterns around individual nanospheres observed are explained in terms of the interference between the excitation field that is directly induced by the laser source, and the scattered excitation field from the tip.
Moon, Cheol;Kim, Eun Jung;Choi, Dan Bee;Kim, Byoung Soo;Kim, Sa Hyun;Choi, Tae Hyun
Biomedical Science Letters
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v.21
no.1
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pp.23-31
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2015
Recently, specific antibodies have been used extensively to diagnose and treat various diseases. It is essential to assess the efficacy and specificity of antibodies, especially the in vivo environment. Anti-HER-2/neu mAb was evaluated as a possible transporting agent for radioimmunotherapy. The monoclonal antibody was successfully radio-labeled with $^{131}I$. In vitro binding assays were performed to confirm its targeting ability using another radio-iodine, $^{125}I$. Binding percentage of $^{125}I$ labeled anti-HER-2/neu mAb in HER-2/neu expressing CT-26 cells was found to be 4.5%, whereas the binding percentage of $^{125}I$ labeled anti-HER-2/neu mAb in wild-type CT-26 was only 0.45%. In vivo images were obtained and analyzed through $\gamma$-camera and an optical fluorescent modality, IVIS-200. $\gamma$-camera images showed that $^{131}I$ labeled anti-HER-2/neu mAb accumulated in HER-2/neu CT-26 tumors. Optical imaging based on near infrared fluorescence labeled anti-HER-2/neu mAb showed higher fluorescence intensities in HER-2/neu CT-26 tumors than in wild-type CT-26 tumors. Anti-HER-2/neu mAb was found to specifically bind to its receptor expressing tumor. Our study demonstrates that in vivo imaging technique is a useful method for the evaluation of an antibody's therapeutic and diagnostic potentials.
Seo, Youngwook;Lee, Ahyeong;Kim, Bal-Geum;Lim, Jongguk
Korean Journal of Agricultural Science
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v.47
no.3
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pp.633-644
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2020
Rice paper is an element of Vietnamese cuisine that can be used to wrap vegetables and meat. Rice and starch are the main ingredients of rice paper and their mixing ratio is important for quality control. In a commercial factory, assessment of food safety and quantitative supply is a challenging issue. A rapid and non-destructive monitoring system is therefore necessary in commercial production systems to ensure the food safety of rice and starch flour for the rice paper wrap. In this study, fluorescence hyperspectral imaging technology was applied to classify grain flours. Using the 3D hyper cube of fluorescence hyperspectral imaging (fHSI, 420 - 730 nm), spectral and spatial data and chemometric methods were applied to detect and classify flours. Eight flours (rice: 4, starch: 4) were prepared and hyperspectral images were acquired in a 5 (L) × 5 (W) × 1.5 (H) cm container. Linear discriminant analysis (LDA), partial least square discriminant analysis (PLSDA), support vector machine (SVM), classification and regression tree (CART), and random forest (RF) with a few preprocessing methods (multivariate scatter correction [MSC], 1st and 2nd derivative and moving average) were applied to classify grain flours and the accuracy was compared using a confusion matrix (accuracy and kappa coefficient). LDA with moving average showed the highest accuracy at A = 0.9362 (K = 0.9270). 1D convolutional neural network (CNN) demonstrated a classification result of A = 0.94 and showed improved classification results between mimyeon flour (MF)1 and MF2 of 0.72 and 0.87, respectively. In this study, the potential of non-destructive detection and classification of grain flours using fHSI technology and machine learning methods was demonstrated.
Heo, Yunmi;Lee, Seungah;Lee, Sang-Won;Kang, Seong Ho
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.34
no.9
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pp.2725-2730
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2013
Single C-reactive protein (CRP) molecules, which are non-specific acute phase markers and products of the innate immune system, were quantitatively detected on a gold-nanopatterned biochip using evanescent field-enhanced fluorescence imaging. The $4{\times}5$ gold-nanopatterned biochip (spot diameter of 500 nm) was fabricated by electron beam nanolithography. Unlabeled CRP molecules in human serum were identified with single-molecule sandwich immunoassay by detecting secondary fluorescence generated by total internal reflection fluorescence (TIRF) microscopy. With decreased standard CRP concentrations, relative fluorescence intensities reduced in the range of 33.3 zM-800 pM. To enhance fluorescence intensities in TIRF images, the distance between biochip surface and CRP molecules was optimally adjusted by considering the quenching effect of gold and the evanescent field intensity. As a result, TIRF only detected one single-CRP molecule on the biochip the first time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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