In this study, the bactericidal activity of each extract from Sawa-wasabi (Wasabia japonica) root, stem and leaf against the fish pathogenic bacteria were examined. The main component related to bactericidal activity in Sawa-wasabi was well known to AlT. The Sawa-wasabi roots showed the highest AIT amount with 1.18 mg/g. Stems was 0.41 and leaves was 0.38 mg/g. All of them showed bactericidal activity against 2 strains of Vibrio hollisae, V. anguillarum, and 2 strains of Edwardsiella tarda, but weak effect against Staphylococcus capitis. The Sawawasabi leaves showed the strongest bactericidal activity with minimal bactericidal concentrations (MBCs) of 156.3mg of dry weight/mL against 2 strains of V. hollisae, V. anguillarum and 2 strains of E. tarda. The roots and stems showed a little weak bactericidal activities with 312-1,250mg of dry weight/mL against them. These results suggest that certain components besides AIT in Sawa-wasabi are affective in killing fish pathogenic bacteria.
본 연구에서는 주요 어류 병원성 그람음성세균인 E. tarda 및 V. anguillarum에 대하여 14 종의 생약 추출물의 항균활성을 검색하였다. 그 결과, 감초, 지유 및 칠피 추출물이 항균활성을 나타냄을 밝혔다. 그 중, 가장 우수한 항균활성을 나타낸 칠피 추출물에 대하여 활성지향적인 분리기법을 적용하여 활성분획물인 EtOAc분획물로부터 항균활성물질 1종을 분리하고 페놀성 화합물인 methyl gallate로 동정하였다. methyl gallate는 실험에 사용된 E. tarda 및 V. anguillarum의 균주들의 증식을 효과적으로 저해하였으며 이에 대한 MIC는 모두 1 mg/ml로 측정되었다.
This study is a report on combinational effects between four sesquiterpene lactones (SLs) from bay laurel (Laurus nobilis) leaves, and oxytetracycline (OTC) or amoxicillin (AMX) against four fish pathogenic bacteria such as Vibrio anguillarum, V. harveyi, Edwardsiella tarda, and Streptococcus iniae. Individually, four SLs exerted little antibacterial activity against fish pathogenic bacteria. However, when combined with OTC or AMX, they showed synergistic interaction against pathogenic bacteria. Especailly, zaluzanin C (1) reduced the MIC of OTC (or AMX) eight-fold. Our results showed that combinations of SLs with antibiotics (ABTs) are more effective than ABTs alone to control pathogenic bacteria. The highest synergistic effect was observed when zaluzanin C (1) was combined with OTC or AMX against V. harvey or S. iniae, displaying significant reductions of MICs up to 8-fold (0.125 to 0.015 ㎍/mL and 0.0078 to 0.0009 ㎍/mL). In addition, zaluzanin C (1) improved the antibiotic potency of OTC against OTC resistant V. harveyi (250 ㎍/mL to 62.5 ㎍/mL). Synergism between ABTs and phytochemical such as SLs could be a therapeutically helpful concept to improve the efficacy of ABTs and prevent antibiotic resistance. These results suggest that SLs can be used as an alternative to reduce antibiotic resistance in aquaculture.
The gamma-radiation sensitivity of three kinds of pathogenic bacteria to fish was investigated. $D_{10}$ values (irradiation dose required to inactivate 90% of the population) of Edwardsiella tarda, Vibrio anguillarum and Streptococcus faecalis were 0.08, 0.10 and 0.44 kGy, respectively. The inactivation factors were 4.50 - 24.30 and 6.75 - 36.45 at radiation doses of 2 and 3 kGy. Raw moist pellets were inoculated with Edwardsiella tarda, Vibrio anguillarum or Streptococcus faecalis. Inoculated feed samples were packaged in air and irradiated at 5 kGy. This dose was effective in controlling the inoculated and general bacteria in fish feed. We consider gamma-radiation to be an effective method to sterilize pathogenic bacteria in fish feed.
The present study was to investigate anti-microbial effects of curcumin on major bacterial pathogens for farmed fish, such as Aeromonas hydrophila, A. salmonicida subsp. masoucida, A. salmonicida subsp. salmonicida, Edwardsiella tarda, Vibrio vulnificus, V. paraheamolyticus using disk diffusion, minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) tests. In disc diffusion test, curcumin exhibited concentration-dependent antimicrobial activities to all bacteria pathogens used in the study. Antimicrobial effects of curcumin was found differently depending on bacterial species when determined by MIC or MBC tests. For examples, E. tarda and A. hydrophila was respectively the most sensitive bacterium for bacteriostatic and bacteriocidal effect of curcumin. Collectively, curcumin could be a potential natural drug for controlling pathogenic bacteria in the aquaculture industry.
본 실험의 목적은 Gram 양성균 뿐만 아니라 Gram음성세균에 대한 넓은 항균활성 및 내산성 그리고 항생제 내성을 갖고 있는 유용한 probiotic 후보균주를 선발하여 어류의 세균성 질병 예방 흑은 치료를 함으로써 양식산업의 효율성을 증대시키고자 한다. 20균주의 유산균을 김치, 양식 넙치의 장 그리고 각종 젓갈류 중에서 분리하여 어류 병원성 세균에 대한 항균능을 MRS agar상에서 agar spotted method에 의해 조사하여 Vibrio anguillarum, Edwardsiella tarda 그리고 streptococcus sp.에 대해 항균활성 이 있는 7균주를 1차 선발 하고 이들중 항균스펙트럼 이 넓은 BK19를 최종선발하여 동정한 결과 Lactobacillus sakei BKl9로 나타났다. L. sakei BK19의 cell free supernatant를 pH 중화 및 catalase 처리한 후 어병세균에 대하여 항균활성을 확인하였다. L. sakei BK19 supernatant의 V.anguillarum 및 V.alginolyticus에 대한 항균성 기작은 주사전자현미경 관찰을 통하여 확인하였고 세포벽을 붕괴 시킴으로써 성장을 저해하고 사멸시키는 것으로 확인되었다.
본 실험의 목적은 Gram 양성균 뿐만 아니라 어병세균인 Gram 음성세균에 대한 넓은 항균활성 및 내산성 그리고 항생제 내성을 갖고 있는 유용한 probiotic 후보균주를 선발하여 어류의 세균성 질병 예방 혹은 치료를 함으로써 양식산업의 효율성을 증대시키고자 한다. 20종의 유산균을 김치, 양식 넙치의 장 그리고 각종 젓갈류 등에서 분리하여 어류병원성 세균에 대한 항균능을 MRS agar상에서 agar spotted method에 의해 조사하여 Vibrio anguillarum, Edwardsiella tarda, 그리고 Streptococcus sp.에 대해 항균활성이 있는 7종의 균주를 1차 선발을 하였다. pH 및 항생제 내성능을 검토하여 probiotic 균주를 분리하였다. 분리된 후보 균중 창란젓에서 분리된 BK19에서 가장 큰 항균 spectrum과 pH 내성 그리고 항생제에 대한 내성이 확인되어 최종적으로 본 실험의 공시균주로 선발하여 생화학적, 형태학적 특성 및 16S rRNA 분석을 통하여 Lactobacillus sakei BK19로 동정하였다.
본 연구에서는 주요 어병세균인 Staphylococcus sp., Streptococcus sp., E. tarda 및 V. anguillarum에 대한 30 종의 해조류 추출물의 항균활성을 검색하였다. 그 결과, C. officinalis, D. simplex, G. furcata, G. lanceolata 및 G. turuturu의 경우는 그람 양성균인 Staphylococcus sp.에 대하여, 그리고 S. thunbergii 및 P. morrowii 는 그람 음성균인 E. tarda와 V. anguillarum에 대하여 항균활성을 나타냄을 밝혔다. 그 중, 가장 우수한 항균활성을 나타낸 P. morrowii의 항균활성분획물인 90% MeOH 분획물은 E. tarda의 증식을 매우 효과적으로 저해하며, MIC는 1 mg/ml으로 측정되었다. 뿐만 아니라, 다양한 pH 조건하에서도 항균활성이 유지되었으며 분획물의 주요활성 성분은 할로겐 함유 phenol계 화합물일 것으로 추정된다.
손바닥선인장(Opuntia ficus-indica var. saboten Makino) 줄기 가수분해 분획물(MBT-01108)의 어병세균에 대한 in vitro 항균활성을 조사하였다. 실험에 사용한 어병세균은 Edwardsiella tarda, Listonella anguillarum, Vibrio sp., Lactococcus garvieae, L. raffinose, Streptococcus parauberis, S. iniae 등 총 18종이었다. 또한, oxytetracycline을 포함한 시판 항균제 disc를 MBT-01108의 항균활성에 대한 양성 대조군으로 하여 항균활성을 비교 조사하였다. 그 결과, MBT-01108은 실험에 사용한 어병세균들에 대하여 우수한 항균활성을 나타내었다.
녹차 추출물을 이용하여 각종 어병세균의 collagenase 활성과 생성 억제 및 생육저해 효과를 조사하였다. 어병세균의 감염시에 필요한 효소인 collagenase활성을 8종의 어병세균에 대하여 측정한 결과 0.08-0.7unit/ml 범위로 나타났다. 그중 collagenase활성이 높은 Edwardsiella tarda의 collagenase 활성은 0.2 mg/ml의 녹차 추출물이 첨가된 반응액에서 거의 100% 저해되었다. E. tarda의 collagenase 생합성은 ST배지에서 $25^{\circ}C$, 16시간 배양하였을 때 가장 높게 나타났다. 이 효소는 0.08 mg/ml의 녹차 추출물이 첨가된 배양액에서 1/3이상 생합성이 감소하였다. 또한 균의 생육에 미치는 녹차 추출물의 영향을 조사한 결과 8 mg/ml이 첨가된 배양액 내에서 균의 생육이 완전히 억제되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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