The objectives of this study were to analyze ecological effects on effluents from the Sagok Stream (Chonnam province) as an abandoned mine drainage through necropsy-based health assessments and fish exposure tests, and to conduct In situ field pilot tests for restoration of stream water. Also, we analyzed water quality including general parameters and heavy metals. The tests were performed three times on April 2005, April 2006, and April 2007. Also, we constructed a reactor facility in the outflowing point of the abandoned mine for the remediation of AMD wastewater. In lab test, death rates in all three treatments were ${\geq}50%$ in the experiments. Necropsybased fish tissue assessments using the Health Assessment Index (HAI), indicated that the most frequently damaged tissue was liver (average: 20.8). Values of Health Assessment Index were lower in the control than any other treatments of T1, T2, and T3 and three treatments showed a distinct toxicity impacts by the AMD. In situ lethal test, concentration of Fe, Al and Zn decreased particularly by 85%, 99% and 94%, respectively through the disposal facility. Values of pH, ranged from 3.1 to 7.0, increased by 2.3 fold (mean=5.1) along with the reduction of metal contents. All fishes in P1 cage died 100% on 3 days later after the experimental setting, while all fishes in the P6 died 100% on 9 days later. Overall, these results evidently provide a key methodology for pilot test using the disposal facility and also clarify the toxicity of AMD once again, so this approach used in the pilot facilities here may reduce the acidic and toxic effects in the abandoned mining drainage.
2개월된 어린 백연어의 성장에 있어서 7종의 배양조류와 동물플랑크톤의 먹이 기여도를 조사하기 위하여 10L의 원통형 수조에 8일동안 각각 배양하였다. 동물플랑크톤 Moina는 대부분의 배양조류를 효과적으로 섭취하였는데, Cryptomonas의 경우, 60분동안에 거의 대부분의 조류를 제거한 반면 남조류 Oscillatoria와 Microcystis는 강하게 Moina개체군을 감소시켰다. 어린 백련어는 52시간동안에 배양조류의 약 50% 정도 섭취하였으나, 남조 Microcystis의 경우 60% 이상이 여전히 수조에 남았으며, 동시에 어류체중의 5${\sim}$12%를 감소시켰다. 실험에 사용된 동일한 밀도로 계속적으로 투입할 경우, 어린 백련어는 11${\sim}$65일만에 사멸하였다. 동물플랑크톤 Moina는 투입된 어류밀도에 따라 각 개체의 성장특성이 다소 차이가 있으나 단일배양조류보다 어류성장을 유도하는 가장 직접적인 영양원으로 사료되었다.
In this study, the correlation between clinical changes and RSIV genome copy number was investigated to determine the quantitative criteria for the characteristics of RSIV infection. The rock bream (Oplegnathus fasciatus) was intraperitoneally injected with three different doses (1.0×101, 1.0×103 and 1.0×105 viral genome copies/fish) as low, medium, and high doses, respectively. The clinical signs (spleen enlargement, death) observation and real-time PCR were conducted at 5, 10 and 14 days post-injection. During the experiment, spleen index as a quantitative indicator for spleen enlargement was continuously increased in the medium- (up to 2.26) and high-dose (up to 4.99) challenge groups, respectively. Notably, when the spleen index was over 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0, a positive correlation was revealed with average viral genome copy numbers of 2.51, 3.37, 4.97 and 5.43×107 viral genome copies/mg, respectively. Moreover, the threshold of spleen index over 1.5 was 1.0×106 viral genome copies/mg, while the thresholds of spleen index over 2.0 and dead was 2.51×107 viral genome copies/mg and the thresholds of spleen index over 2.5 and 3 was 3.98×107 viral genome copies/mg. These findings suggest the possibility of quantitatively analyzing the characteristics and development process of RSIV infection.
수온은 양식어류의 생존에 영향을 미치는 가장 주요한 환경 요인이며, 겨울철 급작스런 수온 하강은 양식어류의 질병과 집단폐사 발생의 요인이 되기도 한다. 본 연구는 겨울철 수온 하강으로 인해 빈번하게 폐사가 발생하고 있는 말쥐치의 양식관리를 위한 기초자료로 활용하기 위해 말쥐치의 하한수온내 성범위, 산소소비율, 혈액학적 및 조직학적 반응을 조사하였다. 수온 5℃에서 노출 3일째, 수온 6℃에서는 노출 4일째 모두 폐사하여 말쥐치의 저수온에 대한 반수치사 하한수온은(LT50) 6.97℃ (6.69~7.27℃)였다. 산소소비율은 수온 하강에 따라 감소하여 수온 간 유의한 차이(p<0.05)를 나타내었다. 혈액내 활성산소 소거효소인 SOD활성도는 대조구 10℃에 비해 수온 6℃에서 유의하게 상승하였다(p<0.05). 반면 CAT는 실험수온 간에 유의한 변화를 나타내지 않았다(p>0.05), 삼투질농도는 대조구와 실험수온 간 유의한 차이는 나타나지 않았다(p>0.05). 코티졸은 대조구에 비해 수온 하강에 따라 증가하였으며 수온 간 유의한 차이를 나타내었다(p<0.05). 간의 조직학적 변화는 혈관내 혈구의 감소, 간세포의 공포화와 간세포 핵의 응축, 췌장 외분비 선세포의 위축 및 효소원과립들이 감소하였다.
Korean rockfish, Sebastes schlegelii, is a representative bony fish that belongs to the family Scorpaenidae and the order Scorpaeniformes. It has high ecological and economic value and is widely cultivated in many East Asian countries, including South Korea, Japan and China. One of streptococci, Streptococcus iniae, is Gram-positive cocci with a negative reaction for catalase and oxidase. The Korean rockfish shows clinical signs when infected with S. iniae, such as body darkening, bleeding, enlarged kidneys, blurred eyes, abdominal distension, etc., ultimately leading to death. The Korean rockfish causes significant economic losses every year in South Korea due to streptococcosis. In this study, we identified bacteria from the fish using polymerase chain reaction and conducted analyses of hemolytic activity and biochemical tests using API 20 STREP and API ZYM systems. Results of confirming the hemolytic activity (n=4) observed in alpha-type hemolysis (25%), beta-type hemol- ysis (50%), and gamma-type hemolysis (25%) of isolates. The biochemical test results exhibited sig- nificant variation among S. iniae. Additionally, we performed intraperitoneal injection with S. iniae in the fish and analyzed the phylogenetic tree using housekeeping genes of S. iniae, including cpsD, arcC, glnA, groEL, gyrB, mutS, pheT, prkC, rpoB, and tkt, via multilocus sequence typing (MLST). The lethal dose (LD50) showed strong pathogenicity, such as 3.34 × 10 colony-forming unit (CFU)/ml for 23FBStr0601 strain and 7.16 × 10 CFU/ml for 23FBStr0602 strain. 23FBStr0603 strain showed relatively low pathogenicity at 1.73 × 105 CFU/ml. The strains 23FBStr0601 and 23FBStr0602, which showed strong pathogenicity, clustered into one monophyletic group. The 23FBStr0603 strain showed weak pathogenicity and formed a monophyletic group with KCTC 3657.
Park, Tae-Gyu;Kang, Yang-Soon;Seo, Mi-Kyung;Park, Young-Tae
Fisheries and Aquatic Sciences
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제11권4호
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pp.209-211
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2008
Heterotrophic dinoflagellate Pfiesteria piscicida (Dinophyceae) has been claimed to produce potent ichthyotoxins that cause disorientation and eventually death of fish and other marine animals. A real-time PCR probe targeting for SSU rRNA gene was used for detection of P. piscicida in Chinhae Bay, Korea. PCR inhibitors were successfully removed by dilution of template DNA. Positive detections were shown from surface water samples indicating the presence of P. piscicida in Chinhae Bay.
수산 양식 산업에서 발생하는 다제내성균에 의한 질병을 통제하기 위해 기존에 사용하던 수산용 의약품 대신 어류에 사용이 금지된 동물용 의약품 사용이 증가하고 있다. 그 중, 티아물린은 그람 양성균에 효과적인 항균성을 나타내기 때문에 일부 양식 어가에서 불법적으로 사용되고 있다. 불법적 사용을 막기 위해서는 티아물린의 수산동물에 대한 연구를 통해 수의사나 수산질병관리사의 처방전에 따라 수산생물의 치료행위가 수반되어야 한다. 연쇄구균에 감염된 강도다리에 대해 티아물린을 5, 10, 15 mg kg-1의 농도로 근육주사 하였으나 치료 효과가 나타나지 않았고 15, 30 mg kg-1의 농도로 경구투여 하였으나 마찬가지로 치료 효과가 미비하였다. 안전성 확인을 위해 30, 60 mg kg-1의 농도로 근육주사와 경구투여한 경우 항생제의 독성에 의한 폐사가 발생하였고 따라서 연쇄구균에 감염된 강도다리에 티아물린으로 항생제 처리를 하는 것은 부적절하다고 할 수 있다.
2004년 12월부터 2005년 4월까지 양식넙치에서 분리된 스쿠티카 섬모충 P. dicentrarchi를 넙치 치어 3 ㎝ 그룹과 5 ㎝ 그룹에 인위 감염시킨 후 감염에 따른 폐사율 등의 병원성을 조사하였다. 소형수조에 스쿠티카충 P. dicentrarchi를 접종시킨 결과 수조저면에서 활발히 증식하였으며 접종 후 6일째부터 1.4 × 103 cell ㎖-1~2.5 × 103 cell ㎖-1범위로 ㎖당 2,000 cell 내외의 밀도로 증식하였다. 반면에 중층인 경우는 ㎖당 300 cell 이하의 낮은 밀도를 유지하였다.수조저면에 P. dicentrarchi충을 증식시킨 후 넙치치어를 방양한 결과 3 ㎝ 그룹과 5 ㎝ 그룹 모두 배양시킨 충에 감염되었으며, 충 감염에 의한 폐사는 3 ㎝ 그룹인 경우 치명적이었다. 접종 후 5일째부터 폐사가 시작되었으며, 28일 만에 95.6%의 높은 폐사율을 보였다. 대조구에서는 실험기간 동안 4.4% 폐사율을 보였으나 스쿠티카충은 검출되지 않았다. 5 ㎝ 그룹은 접종 후 18일째에 처음으로 폐사되기 시작하여 3 ㎝ 그룹에 비해 폐사 진행이 현저히 늦었다. 이 그룹은 스쿠티카충의 인위 접종 후 28일 동안 71%가 폐사하여 3 ㎝ 그룹에 비해 폐사율이 낮았다. 5 ㎝ 그룹의 대조구에서는 실험기간 동안 폐사가 없었으며 스쿠티카충의 감염도 없었다.모든 실험구의 폐사어에서 인위 감염시킨 충을 재분리하여 SSU rRNA에 대한 유전학적 분석결과, 처음 접종시킨 P. dicentrachi와 각 실험구별 재분리된 섬모충의 SSU rRNA 유전자가 일치하여 동일 섬모충에 의한 감염임이 확인되었다.
배경: 결핵은 전세계적으로 단일 원인균으로는 가장 높은 치사율을 가진 질병이다. 결핵의 치료에 있어서 마이코박테리아를 빠르고 정확하게 확인하는 것이 필수적이다. 본 연구에서는 임상 객담 검체의 도말 슬라이드에서 결핵균과 비결핵 항산균의 감별을 위해 Peptide Nucleic Acid (PNA) Probe를 이용한 FISH assay를 평가하고자 한다. 방법: 결핵균과 비결핵 항산균의 16s rRNA를 타겟으로 한 PNA probe를 합성하였다. 각 probe의 특이도는 표준 균주인 Mycobacterium tuberculosis ATCC 13950, M. kansasii ATCC 12479, 임상 검체에서 분리된 마이코박테리아 3종(M. abscessus, M. avium, and M. intracellulare) 그리고 호흡기계에서 흔히 분리되는 10종류의 박테리아를 이용하였다. Centers for Disease Control and Prevention (CDC)의 Acid fast bacili (AFB) 염색 기준상 trace 이상인 128개의 임상 객담 검체를 이용하여 Probe의 성능을 평가하였다. PNA FISH와 항산균 염색결과는 CDC 기준에 따라 단계를 분류하고 서로 비교하였다. 결과: 결핵균과 비결핵 항산균 특이 PNA probe는 결핵균과 M. kansasii 표준 균주 그리고 임상검체에서 분리된 3종의 마이코박테리아에 대해 특이적인 반응을 보였고 다른 박테리아와 교차반응을 보이지 않았다. 또한 89개의 결핵균 배양 양성 객담 검체와 29개의 비결핵 항산균 배양 양성 객담 검체에 각각 특이적인 반응을 보였고 CDC 기준에 따라 분류한 PNA FISH와 AFB염색 결과는 2+ 이상의 검체에서 서로 잘 일치하였다. 결론: PNA FISH 방법은 임상 객담 검체에서 결핵을 진단하고, 항산균과 비결핵 항산균을 구분하는데 있어서 민감하고 정확한 결과를 보였다.
Methylmercury (MeHg) is a ubiquitous environmental toxicant that can be exposed to humans by ingestion of contaminated food including fish and bread. MeHg has been suggested to exert its toxicity through its high reactivity to thiols, generation of arachidonic acid and reactive oxygen species (ROS), and elevation of intracellular $Ca^{2+}$ levels ([$Ca^{2+}$]$_{i}$). However, the precise mechanism has not been fully defined. Here we show that phosphatidylcholine-specific phospholipase C (PC-PLC) is a critical pathway for MeHg-induced toxicity. MeHg activated the acidic form of sphingomyelinase (A-SMase) and group IV cytosolic phospholipase $A_2$ ($cPLA_2$) downstream of PC-PLC, but these enzymes as well as protein kinase C were not linked to MeHg's toxicity. Furthermore, MeHg produced ROS, which did not cause the toxicity. However, D6O9, an inhibitor of PC-PLC, significantly reversed the toxicity in a time- and dose-dependent manner in MDCK and SH-5YSY cells. Addition of EGTA to culture media resulted in partial decrease of [$Ca^{2+}$]$_{i}$ and partially blocked cell death. In contrast, D609 completely prevented cell death with parallel decreases in diacylglycerol and [$Ca^{2+}$]$_{i}$. Together, our findings indicated that MeHg-induced toxicity was caused by elevation of [$Ca^{2+}$]$_{i}$ through activation of PC-PLC. The toxicity was not attributable to the signaling pathways such as $cPLA_2$, A-SMase, and PKC, or to the generation of ROS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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