The eggs of Favonigobius gymnauchen attached on the under side of a small stone were collected off Seongsan-eup Cheju-do in August, 2000 to investigate their development of egg, larvae and juveniles. The fertilized eggs were elliptical in shape (mean long axis: 1.50 mm; mean short axis: 0.57 mm) and transparent. There were filaments on one side of the egg membrane. Larvae hatched at 48 hrs 50 mins after morula stage with 25-26 myotomes in $22.8-28.5^{\circ}C\;(mean\;24.7^{\circ}C).$ The newly hatched larvae were 2.31-2.49 mm (mean 2.37 mm n=10) in total length (TL) and their mouth and anus were already opened. Their melanophores were appeared on the over gas globule, around anus and the part of caudal peduncle with 24-25 myotomes. At 4-5 days after hatching. larvae attained 3.81-4.07 mm (mean 3.96 mm, n=10) in TL and their yolk sac was completely absorbed. They began to eat rotifer and transformed to postlarvae stage. At 14 days after hatching, postlarvae attained 6.17-6.31 mm (mean 6.21 mm, n=10) in TL and their caudal notocord was flexed $45^{\circ}$ upward. At 24 days after hatching, postlarvae attained 8.69-9.10 mm (mean 8.87 mm, n=10) in TL had reached the juvenile stage. All fins were formed with the complete set of fin rays with the following counts: dorsal fin rays IV-I, 9-10; anal fin rays I, 9; pectoral fin rays 17; ventral fin rays: I, 5; caudal fin rays: 9+8= 17.
The aim of this in vitro study was to test the effect of microinjection (Mi) of foreign gene into the rabbit egg pronucleus and epidermal growth factor (EGF) addition on the blastocyst rate, the cell number and the diameter of embryos, and to determine possible relationships between embryo cell number and embryo diameter. Blastocyst rate was significantly decreased in gene- Mi (G-Mi/E0) group (63.1%) comparing to intact ones (83.5%, $p_1$<0.05). The addition of EGF at 20ng/ml (G-Mi/E20) or 200 ng/ml (GMi/ E200) to gene-Mi embryos did not affect blastocyst rate (65.6 and 55.2% resp.). As a control for Mi, the eggs were microinjected with the same volume of phosphate-buffered solution (PBS-Mi) instead of the gene construct solution. Cell numbers and embryo diameters were measured from embryo images obtained on confocal laser scanning microscope. Bonferroni-modified LSD test showed that the embryo cell number in PBS-Mi group was significantly lower ($p_1$<0.05) and in gene-Mi group was tended to decrease compared with intact embryos. Embryo diameter was not different among experimental groups. No effect of EGF given at any doses both on the cell number and embryo diameter was found. A positive correlation between cell number and embryo diameter was observed in all groups of embryos. Since embryo diameter was not changed under the influence of Mi or EGF addition in this study, this seems to be more conservative characteristics of the embryo morphology. These results suggest that the pronuclear microinjection compromises developmental potential of embryos, decreasing blastocyst rate and embryo cell number, whilst embryo diameter is not affected. No effects of EGF on studied parameters were confirmed. Declined quality of Mi-derived embryos is caused by the microinjection procedure itself, rather than by the gene construct used.
Unfortunately, there is no technique which is stable and repetitive to produce transgenic chicken, although various ways of gene transfer including PGC-and embryonic cell-mediated gene transfer, DNA microinjection, virus inoculation and sperm cells have been employed. The aims of this study were 세 develop and establish such a stable, repetitive and efficient way of gene transfer giving a faithful gene expression during development after the reconstruction of embryo in an UV-irradiated egg. A dual reporter plasmid (pJJ9), a fusion gene containing lacZ and GFP driven by a CMV promoter was used to exploit either merits of both reporting markers. lacZ with strong signal or GFP with vital marking. Electroporated embryonic blastodermal cells (EBCs) in the presence of the pJJ9 DNA faithfully showed 377 bp PCR product and lacZ or GFP expressions in the identical cells in vitro of in vivo. Furthermore, analyses of expression pattern of the foreign DNA demonstrated that microinjected EBCs cells into the UV-irradiated recipient egg should participate in normal developmental process, for example, proliferation and differentiation into various tissues. Thirty percentages of the manipulated eggs showed lacZ expression in their tissues. These results together with the specific procedures used in this study should facilitate avian transgenesis.
To investigate the characteristics of hybrid eggs and larva produced by olive flounder Paralichthys olivaceus females and starry flounder Platichthys stellatus males, we examined the developmental speed of hybrid eggs at different water temperatures. The developmental speed of hybrid eggs tended to increase with increasing water temperature. Specifically, the hatching times were 91 hrs, 62 hrs and 43 hrs at $10^{\circ}C$, $15^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$, respectively. The mean biological minimum temperature of the hybrid was $1.3^{\circ}C$, which is in between that of the olive flounder and the starry flounder. In high water temperatureseasons, slower growth was observed in hybrids of the starry flounder which is a coldwater fish.
본 연구는 우리나라 연안에 서식하는 괴도라치의 산란행동 및 난 발생과 자어 형태발달을 조사하여 다른 장갱이과 어류자어와의 유연관계를 밝혀 분류학적 연구의 기초자료로 이용하고자 한다. 실험에 사용된 친어는 평균전장 $32.9{\pm}0.21cm$(31.8~34.0)로 2003년 12월 전남 여수시 신덕동 연안에서 원통형 통발을 이용해 8개체를 채집하여 실험실로 수송 후 사각 유리수조 ($50{\times}30{\times}35cm$)에 수용하여 순환여과식으로 사육하였다. 사육수온은 $12.3{\sim}15.8^{\circ}C$ (평균 $14.1{\pm}2.47$)를 유지하였고, 염분농도는 32.5~33.5‰ (평균 $33.0{\pm}0.05$‰)의 범위를 유지하였다. 수정란은 구형으로 백색의 불투명한 침성 점 착란이었다. 난의 크기는 1.81~2.19 mm (평균 $2.00{\pm}0.27mm$, n=50)이었다. 부화는 수정 271시간 30분 후 머리부터 난막을 뚫고 나오면서 시작되었다. 부화 직후 전기 자어는 전장 8.45~8.84 mm (평균 $8.65{\pm}0.28mm$, n=5)로 입과 항문이 열려있었고, 1개의 유구를 가지고 있었다. 부화 11일째 후기 자어는 전장 10.5~11.3 mm (평균 $10.9{\pm}0.57mm$)로 이 시기의 근절 수는 66개로 증가하였다.
본 연구는 우리나라에 서식하는 쌀미꾸리(Lefua costata)의 산란기 특징 및 초기발달과정을 밝히고자 2018년 1월부터 12월까지 강원도 강릉시 옥계면 주수천 일대에서 수행되었다. 산란기는 생식소성숙도 변화와 당년생 치어 출현, 난경의 분포 등을 고려하여 5월부터 8월로 추정되었고, 다회 산란형이었다. 성비는 암컷 1,117개체, 수컷 879개체가 채집되어 1 : 0.79였다. 산란기 동안 확인된 난경은 0.24~0.93 mm로 성숙란과 미성숙란이 함께 확인되었다. 성숙란의 크기는 0.71±0.02 mm, 포란수는 평균 1,786±818 (n=31)개였다. 난 발달과정을 관찰한 결과 수정란은 점착성을 띤 회색의 분리침성난으로 난경은 0.76±0.03 mm였다. 25℃에서 수정 후 34시간(50%) 후에 부화하였으며, 부화직후 전기자어 크기는 전장 2.7±0.11 mm였다. 부화 후 4일에는 전장 4.5±0.16 mm로 난황이 모두 흡수되어 후기자어로 이행하였다. 부화 후 20일에는 전장 11.5±0.67 mm로 모든 지느러미 기조가 정수가 되어 치어기로 이행하였다. 부화 후 100일에는 전장 49.8±2.60 mm로 외형과 체측무늬는 성어와 비교적 유사하였다.
담수산 징거미새우 Macrobrachium nipponense (De Hann)는 우리나라 남부의 하구 기수 구역에 서식하는 흔한 종으로 체장 약 7 cm 정도이며 우리나라 Macrobrachium 속의 새우 중에서는 가장 큰 종이다. 최근 자연 수역의 오염으로 자연에서의 이 종의 수가 급격히 감소되고 있어서 이에 대한 대책이 시급한 실정이다. 따라서 본 실험에서는 이 종의 인공종묘생산을 위한 기초로서의 생식생태 즉 교미전탈피 횟수, 교미전탈피의 형태학적 특징, 탈피기간중의 일일 먹이량, 교미 행동, 정자와 정포의 구조, 정소내의 수정관의 형태, 산란 기작, 적정인공수정 시간, 교미로 부터 산란에 소요되는 시간 및 과정, 수온과 염분농도에 따른 난발생 및 부화에 미치는 영향, 난부화과정을 조사하였고 그 결과는 다음과 같다. 1. 수온 $28^{\circ}C$ 감소량 $3.26{\~}4.35\%_{\circ}$ 에서 암컷은 $17{\~}18$일 주기로 성장 탈피를 하였고, $13{\~}14$일 간격으로 $4{\~}5$회의 교미전탈피를 하였다. 인공수정에 적절한 시간은 교미전탈피 후 14시간 이내였고 최적시간은 탈피후 8시간 이내였다. 교미시에 수컷은 한천질의 정포를 암컷의 복구에 넣었고 산란은 교미후 $6{\~}17$시간 후에 관찰되었으며 산란시에 체외수정이 된다고 사료된다. 수정난은 암컷의 유영지 사이에 안들어 진 포난실에 부착되며 그 수는 암컷 체장이 6.5 cm인 경우 약 $5000{\~}6000$입 정도이다. 2. 산란 직후의 알은 타원형이며 평균 크기는 $0.58{\times}0.48$ mm였고 난발생이 진행되면서 크기가 증가되어 마지막에는 $0.85{\times}0.48$ mm로 되었다 알의 장축(Y)와 소요일수(X)와의 상관관계는 Y=5.60194+0.007358X로 나타낼 수 있었다. 난의 발생은 표할이었으며 분할구는 4 세포기에 나타났다. 난발생은 수온 $22{\~}30^{\circ}C$에서 정상적이며 최적수온은 $26{\~}28^{\circ}C$로 나타났고, 염분도는 염소양 $0{\~}6.64\%_{\circ}$ 에서 정상적으로 발생하였으며 최적염분 농도는 $2.21{\%_{\circ}}$이었다. 난부화일수(Y)와 수온(X)와의 상관관계는 Y=50.803-1.355X로 나타났고 수온 $28{\~}28.6^{\circ}C$에서 산란에서 부화까지는 $12{\~}13$일이 소요되었다. 3. 교미전탈피는 성장 탈피와 형태적으로 큰 차이가 났으며 교미전탈피에서만 번식강모와 번식 섬모가 흉복갑부, 복부측판 및 $1{\~}4$번 유영지 기부에 나타났다.
Transgenic 양서류를 만들기 위한 연구의 일환으로 bacterial $\beta$-galactosidase 유전자를 cytopalsmic actin promoter에 연결시킨 plasmid를 xenopus 수정란에 미세주입하여 외부 DNA의 발현을 조사하였다. $\beta$-gal DNA를 20nl당 1ng에서 2ng의 농도로 미세주입하는 경우, 이 농도는 배발생에 크게 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 또한 유전자 산물인 $\beta$-galactosidase는 양서류의 모든 배엽성 세포에서 발현 가능하고, 정상적인 활성을 나타내므로 외부 DNA의 발현여부를 in situ 상태에서 판명할 수 있었다. 주입된 외부 DNA는 낭배기 시기에 최초로 발현되고, 적어도 올챙이 시기까지 유지 및 발현 가능하며, 초기 발생동안 extrachromosomal 상태에서 발현되는 것으로 나타났다. 그러나 발현의 정도는 주입된 개체는 물론 매 실험마다 차이를 보였고, 또한 기질인 X-Gal에 반응하는 부위가 전체 배에 분포하는 겅우는 거의 없으며, 일정 부위에 한정되어 있음이 관찰되었다. 이는 세포막을 통해서 DNA가 다른 할구로 이동하지 못하는 사실에 비추어 미세주입된 DNA가 난할시 각 할구로 균등하게 분포되지 못하고 국부적으로 나뉘어 들어가기 때문인 것으로 사료된다.
In fresh water fish hatcheries and farms, Saprolegniales often cause serious mortality to the fish and their eggs. Malachite green is an effective antifungal agent, but is carcinogenic to fish and humans. Alternative antifungal agents are needed. Presently, we tested various concentrations of MBT-01108 (Opuntia ficus-indica extracts) alone and in combination with bronopol, formalin and sodium chloride (MBT-01108 mixture) on in vitro mycelial growth and in vivo remediation of adult eel, Anguilla japonica, infected with Saprolegnia sp. and fertilized eggs of chum salmon, Oncorhynchus keta, to evaluate the compounds' antifungal efficacy on eyed-egg and hatching rates. MBT-Oll08 mixtures incorporating bronopol and formalin at respective concentrations of 50 and 30 parts per million (ppm), and 100 and 20 ppm were most effective in controlling Saprolegnia in vitro and in vivo (P<0.05). Repeated daily exposures to 50 ppm and 100 ppm MBT-01108 were more effective than exposure every 2-3 days post-fertilization for the inhibition of Saprolegnia infection of rainbow trout, Oncorhynchus mykiss eggs as compared with control (0 ppm).
To determine whether the reproductive processes of sea bass, Lateolabrax japonicus, proceed normally after transportation from an outdoor net-cage into indoor tanks, we examined changes in the gonadosomatic index (GSI), histological gonadal tissue, and plasma levels of sex hormones (testosterone and estradiol-17ß) during their annual reproductive cycle. We also measured maturation and spawning across two sea water salinity levels (full and low salinity). Fecundity was estimated by the relationship between egg number and body size in female sea bass. Monthly changes in the GSI, histological gonadal tissues, and oocyte size showed both male and female sea bass reach final maturation in January and February, respectively, indicating that the spermiation of males occurs earlier than the spawning of females. The histological results indicated that the sea bass is a multiple spawner, similar to many marine teleosts, exhibiting group-synchronous oocyte development. Female maturation and spawning were enhanced in lower salinity seawater (29.6-31.0 psu) compared to that of normal salinity (34.5-35.1 psu). These results confirm that sea bass reproduction can occur successfully in captivity and imply that fertilized eggs can be collected from February to March. Additionally, our results show that lower salinity enhances oocyte maturation and spawning of female sea bass.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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