For continuous culture of cellulolytic enzymes production to saccharify food wastes, refill concentration of Mandel's medium for continuous culture was 0.5%, and refill intervals were determined to 12 hours by analysis of COD and total nitrogen concentration after 4-days batch culture in flask level. As a result, amylase and FPase productivities were 3.5 and 1.0 U/L.hr, respectively. In 10 L bioreactor, the batch culture mode was compared with fed-batch, fill-and-draw for continuous production of cellulolytic enzyme. Enzyme productivities were most high at batch culture and followed by fed-batch culture. Amylase and FPase activities were 42.3 and 5.6 U/L.hr at batch culture, and 23.0, 2.8 U/L.hr at fed-batch culture, respectively. As a result, in continuous cultivation of cellulolytic enzymes by T. inhamatum KSJ1, the mode of fed-batch was most effective in 10 L bioreactor.
Microbial oxidation of D-sorbitol to L-sorbose by Acetobacter suboxydans is of commercial importance since it is the only biochemical process in vitamin C synthesis. The main bottleneck in the batch oxidation of sorbitol to sorbose is that the process is severely inhibited by sorbitol. Suitable fed-batch fermentation designs can eliminate the inherent substrate inhibition and improve sorbose productivity. Fed-batch sorbose fermentations were conducted by using two nutrient feeding strategies. For fed-batch fermentation with pulse feeding, highly concentrated sorbitor (600g/L) along with other nutrients were fed intermittently in four pulses of 0.5 liter in response to the increased DO signal. The fed-batch fermentation was over in 24h with a sorbose productivity of 13.40g/L/h and a final sorbose concentration of 320.48g/L. On the other hand, in fed-batch fermentation with multiple feeds, two pulse feeds of 0.5 liter nutrient medium containing 600g/L sorbitol was followed by the addition of 1.5 liter nutrient medium containing 600g/L sorbitol at a constant feed rate of 0.36L/h till the full working capacity of the reactor. The fermentation was completed in 24h with an enhanced sorbose productivity of 15.09g/L/h and a sorbose concentration of 332.60g/L. The sorbose concentration and productivity obtained by multiple feeding of nutrients was found to be higher than that obtained by pulse feeding and was therefore a better strategy for fed-batch sorbose fermentation.
As a process for commercial application, production of reducing sugar, antioxidant, and DNA protective compounds from shrimp-shell powder was investigated in a fed-batch biodegradation using Bacillus cereus EW5. The fed-batch biodegradation was operated in a 5-L bioreactor for 96 h according to three times pulse-feeding strategy. On the basis of the equal working volume (3 L), the fed-batch biodegradation showed a better production of the target compounds than the batch biodegradation, with higher cell density and shortened biodegradation period. The maximum values of the target compounds were 0.297 mg/mL of reducing sugar, 92.35% DPPH radical scavenging activity, 98.16% ABTS radical scavenging activity, and 1.55 reducing power at $A_{700}$, which were approximately 12.1, 3.4, 5.2, and 8.4% enhanced, respectively, compared with those obtained from the batch biodegradation. The fed-batch culture supernatant also showed the enhanced DNA damage inhibition activity than the batch culture supernatant. As a result, the fed-batch biodegradation accompanied by high cell density could produce more useful compounds, enabling an increase in the reutilization value of shrimp-shell waste.
Glucose fed-batch culture was studied to improve cellulose productivity by Acetobacter xylinum BRC5. When initial glucose concentrations in batch cultures were less than 20 g/L, yield coefficients of cellulose (Yp/s) remained a constant value of 0.21 g cellulose/g glucose. But a low yield coefficient, Yp/s=0.13 was obtained from an initial glucose concentration of 40 g/L. Since initial high glucose concentrations in batch culture resulted in low yields of cellulose, constant fed-batch cultures were carried out. The optimal feed rate for fed-batch culture was 2.22 g glucose/L.h. In constant fed-batch culture without DO control, 10 g/L of cellulose was obtained from 40 g/L of glucose with this feed rate, which was approximately two fold higher than that of the batch culture with the same initial glucose concentration. In DO stat plus fed-batch culture, the highest cellulose productivity could be obtained when dissolved oxygen level was controlled at 10% of air saturation, and cellulose productivity increased about 1.5 times compared with that of the culture without DO control.
The possibility of application of membrane type immobilized adsorbent to the fed-batch or perfusion culture system with anchorage-independent cells as well as batch system was investigated. The improvement in cell density and cell viability due to the combination of immobilized adsorbent with each culture system was evaluated for the investigation, and the optimum culture system employing immobilized adsorbent system was suggested based on the results. It was observed that the system with immobilized adsorbent showed better cell growth and cell viability than that without immobilized adsorbent in every operation system of batch, fed-batch, and perfusion. In case of batch system, 200% improvement of maximum cell density was observed in the system where ammonium chloride was added on purpose. And 50% improvement of maximum cell density was observed in the fed-batch system where ammonium ion accumulates significantly, while small increase in maximum cell density was observed in the perfusion system where dilution of waste byproducts exists. Especially, the fed-batch system showed the most significant improvement on cell growth because both compensation of nutrient and removal of ammonium ion occurred simultaneously in the system. Therefore a combined system of immobilized adsorbent and fed-batch operation could be suggested as an optimum system with in situ removal of ammonium ion.
Kim, Bu-Youn;Kim, Jong-Chul;Lee, Hyune-Hwan;Hyun, Hyung-Hwan
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
/
v.6
no.1
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pp.11-17
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2001
To enhance the productivity and activity of nitrile hydratase in Rhodococcus rhodochrous M33, a glucose-limited fed-batch culture was performed. In a fed-batch culture where the glucose was controlled at a limited level and cobalt was supplemented during the fermentation period, the cell mass and total activity of nitrile hydratase both increased 3.3-fold compared to that in the batch fermentation. The productivity of nitrile hydratase also increased 1.9-fold compared to that in the batch fermentation. The specific activity of nitrile hydratase in the whole cell preparation when using a fed-batch culture was 120 units/mg-DCW, which was similar to that in the batch culture.
In order to maximize the RNA accumulation and biomass production is Saccharomyces cerevisiae MTY62, a high-content RNA yeast strain, batch and fed-batch cultures were performed. Among the feeding modes of fed-batch cultures examined, the intermittent feeding mode R\`(IFB-lV), in which 50 ml of 40% molasses and 20% com steep liquor (CSL) solution was intermittently fed for 5 times, resulted in the cell concentration of 33.8 g- dry cell weight/1 and the RNA concentration of 5221 mg-/l, and RNA content of 153 mg-RNA/g-dry cell weight. The constant fed-batch with feeding mode III (CFB-III), in which the feeding rate of 40% molasses and 20% CSL solution was stepwisely decreased from 48 mph (9-13 h), to 24 mph (13-21 h), and to 18 ml/h (21∼ 48 h), gave the highest cell concentration of 42.7 g-dry ceil weigh71 and R7IA concentration of 5536 mg-RNA/1, which were about 2.4-fold and 1.9-fold increased levels, respectively, compared to the results of batch culture. However, the RNA con- tent of 130 mg-RNA/g-dry cell weight of the fed-batch was lower than that of the batch culture (171 mg-RNA/g-dry cell weight) and other fed-batch cultures. When the specific growth rates in the fed-batch cultures were increased, the RNA contents increased. This result indicates that the RNA content is adversely proportional to the cell concen- tration. However, at the same specific growth rate, the RNA content was maintained at higher level in the intermit- tent fed-batch than in the constant fed-batch culture.
Fed-batch fermentations with different feeding media were carried out in order to increase the productivity of invertase expression using a recombinant Saccharomyces cerevisiae containing plasmid pRB58. Two batch cultures showed the expression of the SUC2 gene at a low concentration of glucose, suggesting that glucose concentration could be used as a control variable in a fed-batch operation mode. In the fed-batch culture by feeding the basal medium, cell mass and specific invertase activity did not increase much as compared with the simple batch culture. A series of fed-batch cultures revealed that the sucrose-supplemented medium increased cell mass whereas the enriched medium did specific invertase activity. To capitalize on the synergism of the sucrose-supplemented medium and the enriched medium, the sucrose-supplemented enriched medium was used as a feeding medium. The fed-batch culture using this medium resulted in a 2.4-fold increase in cell mass and a 1.9-fold enhancement in specific invertase activity compared with those of the batch culture. The increase in cell mass and specific invertase activity led to a marked increase in total invertase activity, 250U/ml, which was 6.3 times higher than that of the batch culture.
The production of red pigment from glucose by fed-batch culture of Monascus anka was investigated. In batch culture using fermentor, 200 rpm of agitation speed, 1vvm of aeration volume, and 10% (v/v) of inoculum size were optimal, respectively. The red pigment production was increased by removal of wall-attached mycelium. In an intermittent feeding fed-batch culture, dry cell weight increased to 30 g/l, adn the red pigment content reached 350 of absorbance at 495nm. In a continuous feeding fed-batch culture, dry cell weight increased to 22g/l, and the red pigment content reached 190 of absorbance at 495nm.
A two-stage fed-batch fermentation was carried out to increase xylitol productivity by Candida tropicalis. The first stage for cell growth was performed in the pH-stat and continuous fed-batch modes. The higher cell growth and lower ethanol production obtained in the fed-batch mode where the growth medium was fed when pH of culture broth increased over 5.7. And also the effect of oxygen transfer on xylitol production was investigated by changing agitation speed under 0.5 vvm of aeration. The maximum xylitol productivity and yield were obtained at 500 rpm of agitation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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